恶性实体瘤患者自体细胞因子诱导杀伤细胞过继免疫治疗的安全性改进

目的观察恶性实体瘤患者外周血来源的细胞因子诱导杀伤细胞在自体血浆中的增殖特性及静脉回输治疗的安全性。方法用淋巴细胞分离液分离获取50例恶性实体瘤患者外周血单个核细胞,在含10%自体血浆的RPMI-1640培养液中添加rhIFN-γ、Anti-CD3mAb和rhIL-2联合诱导单个核细胞为细胞因子诱导杀伤细胞。在培养第13天进行细胞计数,通过流式细胞术检测细胞免疫表型,并将细胞进行自体回输。结果在培养第13天,细胞因子诱导杀伤细胞得到大量扩增,细胞数增加30.0±5.2倍。CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+和CD3+CD16+CD56+细胞在培养第13天分别占(93.0±6.1)%、(28.4±7.2)%、(65.5±4.5)%和(25.8±12.2)%。恶性实体瘤患者回输自体细胞因子诱导杀伤细胞的治疗过程中未观察到明显的毒副作用,主要表现有畏寒、发热。结论恶性实体瘤患者血浆可以高效扩增自体细胞因子诱导杀伤细胞,临床应用安全可靠,且无明显的毒副作用。

树突状细胞—细胞因子诱导杀伤细胞过继免疫治疗晚期非小细胞肺癌的临床效果

目的 观察树突状细胞—细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK)过继免疫治疗晚期非小细胞肺癌的临床效果。方法 选取2017年3月—2020年3月龙岩市第二医院收治的晚期非小细胞肺癌患者120例,根据随机数字表法分为观察组和对照组,各60例。对照组予多西他赛联合顺铂化疗,观察组在对照组基础上加用DC-CIK过继免疫治疗,1个疗程为3个治疗周期,2组均治疗1个疗程。比较2组客观缓解率、疾病控制率,治疗前后炎性因子[白介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10]水平、T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+))、生存质量评分、生存率及不良反应。结果 观察组客观缓解率、疾病控制率为71.67%、88.33%,均高于对照组的51.67%、73.33%(P<0.05)。治疗1个疗程后,2组IL-2、IL-6水平较治疗前降低,IL-4、IL-10水平较治疗前升高,且观察组降低/升高幅度大于对照组(P<0.05或P<0.01);2组CD3^(+)、CD4^(+)较治疗前升高,CD8^(+)较治疗前降低,且观察组升高/降低幅度大于对照组(P<0.01);2组生存质量评分高于治疗前,且观察组高于对照组(P<0.01)。观察组1年生存率、2年生存率分别为70.00%、40.00%,均高于对照组的50.00%、21.67%(P<0.05);观察组与对照组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(18.33%vs. 16.67%,χ^(2)=0.058,P=0.810)。结论 采取DC-CIK过继免疫治疗及多西他赛联合顺铂化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌,能提高治疗效果与生存质量,改善细胞免疫功能,且不会明显增加不良反应,可作为晚期非小细胞肺癌治疗的一种有效方法。

体细胞治疗(技术)临床研究和临床应用监管完善研究

查阅我国体细胞治疗在监管层面的相关规定及文献,分析我国体细胞治疗临床研究和临床应用监管现状。发现我国体细胞治疗临床研究和临床应用存在监管体系尚不健全、没有分级分类监管、监管职权存在交叉、对伦理委员会监管不足、处罚力度不足等问题。并提出完善监管体系、采取分级分类监管、明确监管职权、完善伦理委员会的监管制度、加大对医疗机构及医务人员的监管力度等建议。

过继免疫治疗联合放化疗治疗非小细胞肺癌的Meta分析

目的:探讨过继免疫治疗联合放化疗与单纯放化疗相比对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者疗效的差异。方法:通过检索PubMed、Medline、EMBASE、Cochrane数据库、中国期刊全文数据库和维普中文数据库,收集1995年1月至2012年9月发表的符合要求的随机化对照试验(randomized controlled trial,RCT)或非随机同期对照试验(non-randomized concurrent controlled trail,NRCCT),应用Revman5.0软件进行数据分析。结果:共纳入10项研究,共计1 326名患者。Meta分析结果显示:与单纯放化疗相比,过继免疫治疗联合放化疗能够提高患者2年无进展生存(progression-free surviv-al,PFS)(OR=2.20,95%CI:1.44～3.36,P=0.0003)和2年总生存(OR=2.69,95%CI:1.92～3.78,P<0.00001)。接受过继免疫治疗后,早期和进展期NSCLC患者都能得到较大的获益[(OR=3.24(1.65～6.35);OR=2.86(1.37～5.98)]。过继免疫治疗引起的不良反应多呈自限性,主要有发热、寒战、恶心、乏力等,未观察到严重毒性反应。结论:过继免疫治疗联合放化疗能延缓NSCLC复发,提高患者生存期,且早期患者接受免疫治疗获益更显著。

自体外周血造血干细胞移植后过继免疫治疗B细胞性恶性淋巴瘤的临床疗效分析

目的:探讨自体外周血造血干细胞移植(auto-PBHSCT)后过继免疫治疗B细胞性恶性淋巴瘤(ML)的临床疗效。方法:以2000年1月至2009年12月在auto-PBHSCT后给予过继免疫治疗的110例ML患者为过继免疫治疗组(简称治疗组),以1995年1月至1999年12月在auto-PBHSCT后未予以过继免疫治疗的74例ML患者为对照组,分析比较2组间的疗效。治疗组110例ML患者中霍奇金淋巴瘤(HL)32例,非霍奇金淋巴瘤(NHL)78例。对照组74例ML患者中HL 22例,NHL 52例。所有患者序贯化疗6个疗程后进行auto-PBHSCT。造血恢复后过继免疫治疗组每月给予重组人白细胞介素2 100万U/日×10 d为1疗程的过继免疫治疗,共6个疗程。对照组未给予过继免疫治疗。随访时间以5年为限。结果:两组中各有1例患者在移植后3月、2月时因肝功衰竭和脑出血死亡,其他患者均获得造血重建。疗效比较显示,过继免疫治疗组1、3、5年的无病生存率(DFS)为97.3%、93.6%、87.3%,对照组为91.9%、73.0%、64.9%。3、5年的DFS两组间有统计学差异(P<0.01)。过继免疫治疗组Ⅰ/Ⅱ期与Ⅲ/Ⅳ期患者1、3、5年的DFS为100%、100%、91.7%和96.5%、91.9%、86.0%,而对照组为100%、93.3%、86.7%和89.8%、67.8%、59.3%。两组间Ⅲ/Ⅳ期患者3、5年的DFS有统计学差异(P<0.01)。HL患者疗效比较显示,两组中HL患者1、3、5年的DFS分别为100%、93.8%、84.4%和100%、72.7%、59.1%,3、5年的DFS统计学差异显著(P<0.05)。两组Ⅰ/Ⅱ期HL患者1、3、5年的DFS为100%、100%、88.9%和100%、100%、80.0%,Ⅲ/Ⅳ期HL患者1、3、5年的DFS分别为100%、91.3%、82.6%和94.1%%、64.7%、52.9%,Ⅲ/Ⅳ期HL患者3、5年的DFS有统计学差异(P<0.05)。NHL患者疗效比较显示,两组中NHL患者1、3、5年的DFS分别为96.2%、93.6%、88.5%和90.4%、73.1%、65.4%,3、5的DFS有统计学差异(P<0.01)。两组Ⅰ/Ⅱ期NHL患者1、3、5年的DFS分别为100%、100%、93.3%和100%、90.0%、90.0%,Ⅲ/Ⅳ期NHL患者1、3、5年的DFS分别为95.2%、92.1%、87.3%和88.1%、69.0%、59.5%,Ⅲ/Ⅳ期NHL患者3、5年的DFS有统计学差异(P<0.05)。结论:自体外周血造血干细胞移植后过继免疫治疗B细胞性恶性淋巴瘤疗效令人满意,尤其Ⅲ、Ⅳ期患者获益明显。

异基因造血干细胞移植联合供者CIK细胞过继免疫治疗复发难治血液肿瘤11例临床分析

目的观察异基因干细胞移植(allogeneic stem cell transplantation,allo-HSCT)联合供者细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cells,CIK)过继免疫治疗复发难治血液肿瘤的效果。方法回顾性分析我科2005年3月至2012年3月行供者CIK细胞输注的allo-HSCT后复发难治血液肿瘤患者11例临床资料,其中急性髓系白血病3例,急性淋巴细胞白血病1例,慢性髓系白血病2例,多发性骨髓瘤1例,淋巴瘤4例。患者均进行亲缘allo-HSCT后给予供者CIK输注。结果移植后11例患者造血均重建,CIK细胞输注的中位次数为4(2～7)次,中位细胞总数为11.9×106/kg[(5.8～86.5)×106/kg];11例患者原发肿瘤均获完全缓解。4例移植后2～4个月再次复发(急性髓性白血病髓外复发1例,多发性骨髓瘤2例,慢粒急变1例),经供者CIK输注、停用免疫抑制剂后重获完全缓解3例。4例死亡,其中2例死于特发肺综合征,均为单倍型移植后原发肿瘤复发停用免疫抑制剂所致,另2例死于严重感染。总体中位生存时间9(2～53)个月;7例生存至今,生存时间12～53个月,除1例MM分子复发外,其余仍处于完全缓解。结论 allo-HSCT联合供者CIK过继免疫治疗血液肿瘤有明显效果,副作用小,值得进一步进行多中心病例对照研究。

自体树突状细胞瘤苗诱导的杀伤细胞过继免疫在老年性大肠癌姑息治疗的临床研究

目的探讨自身肿瘤抗原（Ag）致敏的树突状细胞（DC）联合细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）的过继免疫在老年性大肠癌（CRC）姑息治疗的临床疗效。方法选择110例诊断明确的老年性晚期CRC患者（不再适宜行手术或放化疗）,随机分为2组：对照组55例,接受内科对症治疗;免疫组55例,除接受内科对症治疗外,还给予Ag致敏的DC-CIK过继免疫治疗,观察两组患者的临床疗效和安全性。结果治疗后免疫组患者外周血淋巴细胞Ag NOR的IS值、CD56阳性率、血清IL-12含量、PS评分、VAS评分、CEA含量均比对照组改善,差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗后,免疫组患者的半年疗效、1年生存率、2年生存率及MST均优于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。1例免疫组PR患者在6次免疫治疗后病灶明显缩小。有6例患者在第1次细胞回输后出现短暂发热和寒颤（体温38-39℃）,其中1位患者体温自行恢复,其余患者给予地塞米松和降温药后症状消失,后续细胞治疗未再发生。结论 Ag-DC-CIK过继免疫对晚期老年CRC患者有良好的姑息治疗价值。

癌相关CD8^+记忆T细胞在过继免疫治疗中的应用

针对癌症患者的过继免疫治疗是临床肿瘤治疗研究中的热点话题。癌症患者体内天然存在着能够对恶性肿瘤细胞进行识别、攻击和杀伤的癌相关CD8+记忆T细胞,它们具有对少量肿瘤细胞产生快速免疫应答和持续长期发挥抗癌作用的优点。癌相关CD8+记忆T细胞主要存在于骨髓中,如将骨髓中的这部分T细胞分离出来,并以特定手段激活并回输体内,将可发挥强大的免疫治疗作用。为了帮助临床癌症治疗研究者们更加清晰地认识癌相关CD8+记忆T细胞的生物学特性、肿瘤杀伤能力和临床治疗效果,并妥善处理实际应用过程中遇到的各种问题,本文对近年有关癌相关CD8+记忆T细胞在肿瘤免疫治疗中应用的研究进展加以介绍。

肿瘤过继免疫治疗临床级抗原特异性T细胞的研究进展

抗原特异性T细胞是肿瘤过继免疫治疗的核心,靶向性强、杀伤活性高、毒性作用小、疗效卓越的临床级细胞的制备是提高治疗效果的关键。近年来,全封闭自动化T细胞分离系统提高了安全性,新型人工抗原提呈方法和γc家族细胞因子增加了T细胞扩增效率,低分化表型T细胞的选择提高了有效性,而T细胞受体和嵌合抗原受体基因修饰赋予T细胞抗原特异性杀伤性能,病毒基因转导和理化基因转染T细胞方法的不断改进为基因修饰重定向T细胞的抗原特异性提供了保障。越来越多的临床试验展示了令人鼓舞的治疗效果,为肿瘤过继免疫治疗注入了新的生命力。

T细胞过继免疫治疗法在肿瘤疾病治疗中的应用进展

目前T细胞过继免疫治疗技术已应用于治疗各种疾病,尤其是在肿瘤领域的应用,具有肿瘤抗原特异性的T细胞过继免疫疗法不仅可以在体外实验中诱导肿瘤细胞死亡,而且已经部分应用于临床患者并达到一定的治疗效果,有望成为从基因水平上解决肿瘤疾病的前沿武器。本文对近年来T细胞过继免疫疗法在肿瘤疾病治疗方面的研究进行综述。

自身CD3AK细胞过继免疫治疗乙型肝炎47例

目的:CD3AK(Anti-CD3antibodyinducedactivatedkiller,CD3AK)细胞具有增生快、杀瘤活性强和杀瘤谱广的特点.本文旨在评估用CD3AK细胞过继回输治疗乙型肝炎的疗效.方法:用淋巴细胞分离液分离乙型肝炎患者末梢血单个核细胞,然后将末梢血单个核细胞加入含有IFN-α、IL-2和CD3单抗的培养基中进行培养扩增,将经培养后的CD3AK细胞回输给患者;患者一个疗程接受CD3AK细胞总数在(0.8-7)×1010.结果:在47例接受治疗者中,治疗结束后HBeAg+HBV-DNA转阴率为53.2%.总有效率(HBeAg和/或HBV-DNA转阴)为74.5%.CD3和CD8T淋巴细胞绝对值在CD3AK细胞治疗后均增加在85%以上.结论:用自身CD3AK细胞过继回输治疗能明显提高乙型肝炎患者细胞免疫功能,治疗结束后HBeAg+HBV-DNA转阴率达53.2%.且无毒副作用,对乙型肝炎是一种安全有效的治疗方法.

调节性T细胞与恶性肿瘤的过继免疫治疗

过继免疫治疗利用自身免疫细胞进行体外扩增培养,然后回输到体内,它通过增强机体免疫力来对抗肿瘤,对肿瘤细胞具有靶向杀伤性作用,是最有可能彻底清除手术或放化疗后残存肿瘤细胞的治疗手段.但是,调节性T细胞（Regulatory T cells,Tregs）在多种恶性肿瘤患者外周血及微环境中普遍存在着比例上调的情况,这不仅会导致机体固有免疫的负性平衡,还会影响过继免疫治疗的疗效,使其不能发挥最大的抗肿瘤作用.通过对Tregs日渐深入的了解,人们已经研究出多种抑制及消除Tregs的治疗策略.

细胞因子诱导的NK细胞过继免疫治疗恶性肿瘤的初步应用

目的 采集不同类型恶性肿瘤患者外周血,扩增CINK细胞,并观察自体CINK细胞过继免疫治疗的疗效和安全性.方法 利用抗CD3 单抗、IL-2、PHA从9 例肿瘤患者PBMC中诱导扩增CINK细胞,2 周左右开始自体回输.结果 CINK细胞经培养后细胞总数和CD3- CD56+NK细胞均获大量增殖.肿瘤患者经自体CINK 细胞免疫治疗后, CD3、CD4 T 细胞、NK 细胞、CD4/CD8的比例均显著提高(P<0.01),睡眠、食欲等指标也有相应改善,治疗过程中未见副作用. 结论 自体CINK细胞过继免疫治疗可以显著提高患者免疫功能,改善患者生活质量,且副作用小.

混合造血干细胞移植联合过继免疫治疗对急性髓系白血病的疗效

本研究探讨混合造血干细胞移植(mix-HSCT)后给予单倍体相合供体淋巴细胞输注(hiDLI)加白介素2(IL-2)对急性髓系白血病(AML)患者的疗效。mix-HSCT即自体外周血造血干细胞与单倍体相合异体骨髓造血干细胞混合移植,49例AML患者在完全缓解期采用全身照射加VEMAC预处理方案后,接受了mix-HSCT。所有患者均经过化疗加G-CSF方法动员自体外周血造血干细胞,或供者骨髓造血干细胞未经过G-CSF动员。试验组33例患者在造血恢复后给予hiDLI+IL-2治疗1-8次。对照组16例患者造血恢复后未做特殊治疗。随访时间>3年。结果表明:所有患者均获得造血重建,无1例发生移植物抗宿主病(GVHD)。两组患者中性粒细胞≥0.5×109/L的中位时间分别为14(12-18)d和14(11-16)d,白细胞数≥4.0×108/L的中位时间分别为17(16-22)d和18(16-20)d,血小板数≥50×108/L的中位时间分别为25(24-29)d和25(23-26)d。移植后16-21 d时显示恢复期骨髓象。试验组有9例形成混合嵌合体(46XX/46XY),持续存在时间3-12个月,随访显示存活21例,长期无病存活率为63.6%。对照组中有3例形成混合嵌合体(46XX/46XY),持续存在时间3-6个月,随访显示存活7例,长期无病存活率为50.0%。结论:mix-HSCT后应用hiDLI+IL-2治疗对AML患者的造血功能恢复正常、长期无病生存可能有积极作用。

自体造血干细胞移植治疗恶性淋巴瘤后大剂量白细胞介素2过继免疫对长期生存的影响

背景:过继免疫治疗是目前肿瘤免疫治疗的热点,白细胞介素2是一种具有多种生物学活性的细胞因子,在机体的抗肿瘤免疫中起到重要作用。目的:评价比较淋巴瘤自体造血干细胞移植治疗后应用与不应用大剂量白介素2行免疫治疗的临床疗效。方法:回顾分析30例恶性淋巴瘤患者(治疗组)自体造血干细胞移植后行大剂量白细胞介素2治疗,与随机挑选30例患者(对照组)自体造血干细胞移植后未行白细胞介素2治疗进行对比,检测两组患者外周血T淋巴细胞亚群,观察两组免疫功能的变化,并对所有患者进行随访观察。结果与结论:自体造血干细胞移植后白细胞介素2治疗组外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平明显提升。随访结束时统计复发率:治疗组13.3%,对照组26.7%;中位生存期:治疗组14～98(42±2)个月,对照组8～78(28±2)个月。提示恶性淋巴瘤自体造血干细胞移植后行大剂量白细胞介素2治疗能提高患者的免疫功能,减少移植后复发率,并有望延长生存期。

过继免疫治疗在肝细胞性肝癌术后的应用

早期诊断技术及手术技巧等的提高使得肝细胞性肝癌术后生存率显著提高,但是术后复发及转移仍威胁着患者的生命。肝细胞性肝癌术后辅助过继免疫治疗是众多辅助治疗中的一种,可明显降低肝癌根治性术后复发率,但对总生存率影响不大。肝细胞性肝癌术后开始过继免疫治疗的时间、使用剂量、治疗次数及间隔时间没有形成统一意见是其临床上应用不多的原因。

T细胞过继免疫治疗恶性实体肿瘤研究进展

过继细胞免疫治疗（adoptive cellular immunotherapy，ACI）在血液系统疾病的临床应用已获得广泛认可，尤其在目前疫苗免疫治疗还存在着不能有效抑制微小残留肿瘤生长等多种因素而限制了其临床应用的前提下，ACI在恶性实体肿瘤治疗中的应用研究也引起了人们的普遍关注。