自养黄杆菌合成羟基丁酸和羟基戊酸共聚体的发酵研究

采用本实验室从土壤中分离到的一株自养黄杆菌进行了羟基丁酸和羟基戊酸共聚体〔P(HB-co-HV)〕的发酵试验。实验结果表明,该菌株是自养黄杆菌葡萄糖运输突变株,可以葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乙酸盐、乳酸盐和苹果酸盐作为唯一碳源,尤以葡萄糖和果糖效果最佳。硫酸铵、氯化铵和蛋白胨等不同氮源不影响其生长,却影响细胞中P(HB-co-HV)的含量和P(HB-co-HV)中HV/HB的比例。应用两阶段控制方式,经42h的补料分批发酵,细胞浓度达34.9g·L^(-1),P(HB-co-HV)浓度达25.28g·L^(-1)。细胞和P(HB-co-HV)生产速率系数分别为0.83g·L^(-1)”·h^(-1)和0.61g·L^(-1)·h^(-1)。以基质为基准的细胞得率系数(Yx/s)、产物得率系数(Yp/s)和以干细胞为基准的产物得率系数(Yp/x)分别为0.283(g/g)、0.174(g/g)和0.73(g/g)。改变培养基中碳氮源组分可将P(HB-co-HV)中HB的含量调节在24％～78％之间。

一种多聚羟基烷酸产生菌的诱变育种

以野生型自养黄杆菌为出发菌株，经亚硝酸、紫外线、60Coγ射线诱变处理选得三株性状优良的突变株（Uγ－、Uγ－17、Uγ－20）。Uγ－1突变株的菌落形态为菊花形，白色。Uγ-17和Uγ－20突变株的菌落形态均为圆凸光滑型，微黄色。40h的摇瓶发酵结果表明，Uγ－1、Uγ－17、Uγ－20突变株的干细胞产量分别为8．1g／1、11．2g／1、10．5g／1，其产物对干细胞的得率系数（yp/x）分别为0．74、0．75、0．79。与野生型菌株相比，这些突变株的干细胞产量yp/x分别增加了20％和7．2％以上。