自分泌运动因子抑制剂的研究进展

自分泌运动因子(ATX)是核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶家族(EPPs)中重要成员之一,负责将溶血磷脂胆碱(LPC)水解为具有生物活性的溶血磷脂酸(LPA),LPA与特异性G蛋白偶联受体作用调控细胞的转移、增殖等生命活动。近些年,研究者聚焦于肿瘤中ATX的过度表达,进而开发出一系列ATX抑制剂。本文对ATX抑制剂研究现况进行综述。

自分泌运动因子(ATX)抑制剂的3D-QSAR和分子对接研究

自分泌运动因子(ATX)在心血管疾病、炎症和肿瘤的病理过程中发挥重要作用。对具有抑制ATX活性的吲哚类化合物进行了三维定量构效关系(3D-QSAR)和分子对接研究。采用CoMFA和CoMSIA模型对40个ATX抑制剂构建3D-QSAR模型,阐明了抑制剂结构与生物活性之间的关系,同时利用Surflex-Dock进行分子对接,研究该类化合物与ATX蛋白的结合模式。CoMFA模型(q^(2)=0.668,r^(2)=0.992)和CoMSIA模型(q^(2)=0.727,r^(2)=0.988)表明其具有良好的预测能力和机制可解释能力,分子对接表明上述化合物与ATX均能很好地结合,Ser306、Glu232和His121是影响上述化合物与ATX结合的主要氨基酸残基。本研究为进一步设计合成ATX抑制剂提供理论依据,对开发高效ATX抑制剂具有指导意义。

分泌型白细胞蛋白酶抑制剂对急性肺损伤大鼠趋化因子fractalkine表达的影响

目的:探讨分泌型白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)对急性肺损伤新生大鼠肺组织中趋化因子fractalkine表达的影响。方法:利用内毒素(LPS)气管内滴入制备新生大鼠急性肺损伤的模型;设立SLPI治疗组、LPS组、生理盐水(NS)对照组。SLPI治疗组在气管内滴入LPS前预先滴入400μg SLPI。分别在6,12,24 h后取肺组织匀浆,用ELISA法分别测定各组趋化因子fractalkine蛋白水平。RT-PCR测定fractalkine的mRNA水平。结果:在各时间点,SLPI治疗组肺组织中Fractalkine蛋白水平及mRNA水平均显著低于LPS组。24 h时SLPI治疗组肺组织中fractalkine蛋白为(3 124.9±155.6)pg/ml,显著低于LPS组的(4 231.4±177.9)pg/ml和NS对照组的(4 412.4±201.5)pg/ml,F=42.8,P<0.05,差异有统计学意义。24 h时SLPI治疗组肺组织中fractalkine的mRNA相对水平为47.0±5.1,显著低于LPS组的87.3±8.2和NS对照组的81.1±9.9,F=33.2,P<0.05,差异有统计学意义。结论:SLPI能有效抑制新生大鼠急性肺损伤时肺组织中趋化因子fractalkine的表达。

不同程度肺炎患儿分泌型白细胞蛋白酶抑制剂与核因子-κB水平变化及临床意义

目的探讨不同程度肺炎患儿分泌型白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)与核因子-κB(NF-κB)水平变化及其临床意义。方法选择66例支气管肺炎患儿,分为普通肺炎组和重症肺炎组,分别在入院24h内(治疗前)和治疗5d后(治疗后)检测SLPI水平和NF-κB表达水平,同时选择20例健康儿童作为健康对照组。结果治疗前,重症肺炎组和普通肺炎组患儿SLPI水平明显低于健康对照组,NF-κB水平明显高于健康对照组(P<0.05)。治疗后,重症肺炎组和普通肺炎组SLPI水平较治疗前显著升高,NF-κB水平显著降低(P<0.05),但重症肺炎组的SLPI水平仍低于健康对照组,NF-κB水平仍高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),普通肺炎组的SLPI水平和NF-κB水平与健康对照组差异无统计学意义(P<0.05)。结论对肺炎患儿早期检测SLPI及NF-κB水平,有助于重症肺炎的早期诊断、治疗和预后。

CDK4/6抑制剂联合内分泌药物治疗HR阳性/HER2阴性乳腺癌疗效与安全性的Meta分析

目的 评价4种周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂(达尔西利、阿贝西利、瑞波西利、哌柏西利)联合内分泌药物治疗激素受体(HR)阳性/人表皮生长因子受体2(HER2)阴性乳腺癌的疗效和安全性。方法 计算机检索PubMed、the Cochrane Library、Web of Science、Embase、中国知网、万方数据、维普网,收集CDK4/6抑制剂联合内分泌药物(试验组)对比单用内分泌药物或联用安慰剂(对照组)的随机对照试验(RCT),检索时限为建库至2023年4月。筛选文献、数据提取和质量评价后,采用RevMan 5.4.1软件进行Meta分析。结果 共纳入22篇文献,涉及15项RCT,合计18 574例患者。Meta分析结果显示,试验组患者的无进展生存期[HR=0.77,95%CI(0.74,0.79),P<0.000 01]、总生存期[HR=0.91,95%CI(0.87,0.94),P<0.000 01]、客观缓解率[OR=1.71,95%CI(1.51,1.93),P<0.000 01]、临床获益率[OR=1.73,95%CI(1.52,1.95),P<0.000 01]均显著优于对照组。试验组患者的≥3级不良反应[OR=10.28,95%CI(6.97,15.17),P<0.000 01]、中性粒细胞减少[OR=65.09,95%CI(36.43,116.31),P<0.000 01]、白细胞减少[OR=22.90,95%CI(15.40,34.04),P<0.000 01]、贫血[OR=5.71,95%CI(4.51,7.22),P<0.000 01]、腹泻[OR=3.00,95%CI(1.19,7.51),P<0.05]、恶心[OR=1.99,95%CI(1.52,2.60),P<0.00001]发生率均显著高于对照组。结论CDK4/6抑制剂联合内分泌药物治疗HR阳性/HER2阴性乳腺癌的疗效显著,不良反应发生率较高,尤其是血液毒性反应。

信号转导抑制剂对囊素刺激杂交瘤细胞抗体分泌及其mRNA表达的影响

以杂交瘤细胞为模型 ,在培养液中加入不同的信号转导抑制剂和囊素 ,用间接ELISA法测定抗体分泌水平 ,用定量RT PCR法检测抗体mRNA的表达水平。结果表明 ,加入Gα 蛋白选择性抑制剂NF 0 2 3、蛋白激酶C抑制剂GF10 92 0 3X、磷脂酰肌醇 3激酶抑制剂heparin、Ca2 + /calmodulin依赖蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN 6 2、磷脂酶C抑制剂U 7312 2和蛋白激酶G抑制剂后 ,囊素对杂交瘤细胞抗体分泌速度的影响明显 (P <0 0 1)。而加入蛋白激酶A抑制剂 4 Cyano 3 M thylisoquinoline、酪氨酸蛋白激酶抑制剂 genistein和丝裂原活化的蛋白激酶抑制剂PD 980 5 9后 ,囊素对杂交瘤细胞抗体分泌速度的影响不明显 (P >0 0 5 ) ,这 3种抑制剂对杂交瘤细胞抗体分泌速度的抑制率分别为 74 5 5 % ,91 13%和80 6 9%。加入 4 Cyano 3 M thylisoquinoline、genistein和PD 980 5 9后 ,囊素处理组与对照组γ1mRNA的表达水平差异不显著 (P >0 0 5 ) ,说明这 3种抑制剂阻断了囊素刺激的杂交瘤细胞抗体mRNA的表达。以上结果表明 ,蛋白激酶A、酪氨酸蛋白激酶和丝裂原活化的蛋白激酶参与了囊素在杂交瘤细胞中的信号转导。

γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch通路并纠正脑卒中后抑郁大鼠Th17/Treg失衡

目的:探究γ-分泌酶抑制剂DAPT对Notch信号通路和脑卒中后抑郁(PSD)大鼠辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)失衡的影响。方法:SD大鼠采用线栓法结合慢性不可预知性温和应激(CUMS)刺激及孤养建立PSD模型,随机分为PSD组(等量生理盐水)和DAPT组(5 mg/kg DAPT),假手术(sham)组(等量生理盐水)为对照,每组10只。各组大鼠分别于术前(0 d)及术后7、14、21和28 d进行体重检测、敞箱实验(OFT)及蔗糖偏爱实验(SPT)。干预结束后,采用RT-qPCR和Western blot分别检测脑组织海马Notch1和Hes1 mRNA及蛋白表达水平,流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中Th17和Treg细胞比例,ELISA法检测血清白细胞介素17(IL-17)和IL-10水平。结果:术后7、14、21和28 d,与sham组比较,PSD组大鼠体重、水平运动评分、垂直运动评分和糖水消耗比例均显著降低(P<0.05),其中7和14 d PSD组与DAPT组大鼠体重、水平运动评分、垂直运动评分和糖水消耗比例差异无统计学意义(P>0.05);与PSD组比较,21和28 d DAPT组大鼠体重、水平运动评分、垂直运动评分和糖水消耗比例显著增加(P<0.05)。干预结束后,与sham组比较,PSD组大鼠海马Notch1和Hes1 mRNA及蛋白表达水平,PBMC中Th17细胞比例和Th17/Treg比值,以及血清IL-17水平显著升高(P<0.05),Treg细胞比例和血清IL-10水平显著降低(P<0.05);与PSD组比较,DAPT组大鼠海马Notch1和Hes1 mRNA及蛋白表达水平,PBMC中Th17细胞比例和Th17/Treg比值,以及血清IL-17水平显著降低(P<0.05),Treg细胞比例和血清IL-10水平显著升高(P<0.05)。结论:DAPT可阻断Notch信号通路并减轻PSD大鼠抑郁样症状,其机制可能与调节Th17/Treg失衡及炎症因子分泌有关。

COPD患者急性加重期呼吸道分泌性白细胞蛋白酶抑制剂含量调节机制研究进展

慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者稳定期呼吸道内分泌性白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)含量增加,急性加重期反而下降,这种现象以蛋白酶的反向调节、TGF-β1/Smads信号通路的下调、病原体多种机制参与SLPI含量的调控等假说为主,但确切机制尚未完全阐明。

神经内分泌激素拮抗剂对心肌梗死患者运动耐量和血浆激素的影响

目的:评价神经内分泌激素拮抗剂对心肌梗死患者运动耐量以及血浆内分泌激素的影响。方法:急性心肌梗死患者39例,随机分组为厄贝沙坦与卡维地洛联合使用组以及血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensinconvertingenzymein-hibitors,ACEI)与美托洛尔联合使用组。各组分别在治疗前后6个月测量6min行走试验以及血浆内分泌激素。结果:与治疗前比较,治疗后6个月厄贝沙坦与卡维地洛联合使用组以及ACEI与美托洛尔联合使用组患者血浆肾素和血管紧张素均减少(t=3.21～3.80,P<0.01);可以使6min行走距离增加,与治疗前比较,差异有显著性意义(t=-7.90,5.72,P<0.01)。结论:血管紧张素受体抑制剂与第3代β受体阻滞剂联合使用以及A-CEI与第2代β受体阻滞剂联合使用都可以降低急性心肌梗死患者血浆内分泌激素,改善患者的心功能状态,提高运动耐量。

分泌型白细胞蛋白酶抑制剂对内毒素致新生大鼠急性肺损伤的抗感染作用

目的探讨分泌型白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)对内毒素(LPS)致新生大鼠急性肺损伤(ALI)的抗感染作用。方法利用LPS气管内滴入制备新生大鼠ALI模型,设立SLPI治疗组、LPS组、生理盐水(NS)对照组。SLPI治疗组在气管内滴入LPS前30 min预先滴入400μg SLPI。4 h后取各组大鼠肺组织匀浆,用琼脂扩散法、ELISA法分别测定中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性和TNFα-水平。结果LPS组肺组织NE活性、TNFα-及总蛋白水平均显著高于SLPI治疗组和对照组,3组比较差异有显著性(F=1475.28,35.8,21.6 P均<0.01);SLPI治疗组肺组织NE活性、TNF-α及总蛋白水平均显著低于LPS组,差异有显著性(q=66.14,7.02,5.60 P均<0.01);但高于对照组,亦有显著性差异(q=22.18,5.07,3.77 P<0.01,0.05)。结论SLPI对LPS致新生大鼠急性肺损伤有抗感染作用。

γ分泌酶抑制剂联合BMSC对小鼠急性移植物抗宿主病的影响

目的:建立aGVHD小鼠模型,探讨低剂量γ分泌酶抑制剂(GSI)联合BMSC对小鼠aGVHD的调控作用及其机制。方法:选择C57BL/6(H-2b)→BALB/c(H-2d)作为异基因移植供、受体,建立aGVHD模型。BALB/c受鼠随机分为6组,分别为照射后输注骨髓细胞组(BM),照射后输注骨髓细胞与脾细胞组(BM+SC),照射后输注骨髓细胞与脾细胞+DMSO组(BM+SC+DMSO)(移植对照组),照射后输注骨髓细胞与脾细胞+GSI组(BM+SC+GSI),照射后输注骨髓细胞与脾细胞及骨髓基质细胞组(BM+SC+BMSC),照射后输注骨髓细胞与脾细胞及骨髓基质细胞+GSI组(BM+SC+BMSC+GSI)。含GSI的两组小鼠在移植后1、2、3 d以腹腔注射GSI 5μmol/kg,以DMSO为对照。观察小鼠一般状况、生存时间及造血恢复情况,ELISA法测定细胞因子,免疫组化检测病理组织学改变等,研究其对allo-BMT后造血重建和a GVHD发生发展的影响。结果:BMSC与GSI联合组的小鼠在观察期内存活率80%,明显高于其他各组小鼠, BMSC、GSI或者两者联合治疗组在移植后21 d以上时,a GVHD的发生率均降低。GSI部分促进白细胞恢复,且对血小板的恢复无明显延迟作用。同时,BMSC与GSI联合组小鼠的外周血清中Th1型细胞因子(IFN-γ)含量明显低于GSI组小鼠(P<0.01),联合组Th2型细胞因子(IL-4)含量明显高于GSI组小鼠(P<0.01),IL-17含量显著低于相应对照组(P<0.001)。结论:低剂量GSI联合BMSC促进造血重建并调节细胞因子IFN-γ、IL-4及IL-17的分泌。GSI联合BMSC达到协同抑制aGVHD发生及进展的目的。

核因子κB抑制剂与紫杉烷类联合应用于未分化甲状腺癌转移灶动物模型的研究

背景与目的甲状腺肿瘤是最常见的内分泌系统肿瘤,未分化甲状腺癌（anaplastic thyroid cancer,ATC）是甲状腺癌中恶性程度最高的一种,致死率极高且经常发生转移,目前尚无特效的治疗方案。在针对ATC有效诊疗手段的研究中，分子靶向性化疗有着重要的意义。

γ-分泌酶抑制剂在肺纤维化上皮间质转化中的作用

目的检测体外转化生长因子(TGF)-β1诱导肺纤维化上皮间质转化(EMT)的形成情况并检测Notch信号特异性抑制剂γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对其影响及可能机制。方法将A549细胞分成对照组(RPMI 1640完全培养基培养)、TGF-β1组(在含有10μg/L TGF-β1的RPMI 1640培养基中培养)、TGF-β1+DAPT组(在含有10μg/L TGF-β1和2μmol DAPT的RPMI 1640培养基中培养)、DAPT组(在含有2μmol DAPT的RPMI 1640培养基中培养)。通过倒置显微镜观察细胞形态,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测肺泡上皮细胞特异性蛋白E-钙黏合素以及间质细胞特异性蛋白α-肌动蛋白(α-SMA)mRNA相对表达水平,Western blot检测E-钙黏合素以及α-SMA蛋白表达水平。结果倒置显微镜检查示,对照组细胞呈多边形,铺路石样,细胞间连接紧密;TGF-β1组细胞呈梭行,纺锤状,细胞间连接减少;TGF-β1+DAPT组仅有少量细胞呈梭形,多数细胞形态与对照组相似;DAPT组细胞形态大致同对照组。与对照组相比,TGF-β1组α-SMA蛋白及mRNA表达增加,而E-钙黏合素蛋白及mRNA表达减弱(P<0.05);与TGF-β1组比较,TGF-β1+DAPT组α-SMA蛋白及mRNA表达水平降低,而E-钙黏合素蛋白及mRNA表达水平增加(P<0.05);DAPT组与对照组2指标的蛋白与mRNA相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论TGF-β1可诱导肺上皮间质转化,而Notch信号抑制剂DAPT能够阻断、部分或全部逆转这一过程。

环氧化酶抑制剂对急性不完全脊髓损伤核转录因子κB及CD4^+/CD8^+的影响

背景:塞来昔布治疗急性大鼠脊髓损伤,较目前通用的甲强龙具有不良反应少、价格低廉等优点,但是剂量尚无法准确把握。目的:探讨不同剂量环氧化酶抑制剂对急性不完全脊髓损伤核转录因子κB及CD4^+/CD8^+的影响。方法:采用改良Allen方法建立大鼠T_8及T_9段脊髓不完全损伤模型。将60只造模成功的大鼠随机等分为4组:单纯损伤组,不使用任何药物;塞来昔布小、中、大剂量组,分别于脊髓损伤30 min后灌胃塞来昔布25,50,100 mg/kg。结果与结论:塞来昔布治疗后,脊髓损伤大鼠神经功能明显改善,脊髓中核转录因子κB表达水平明显降低,外周血中CD4^+和CD8^+T细胞数量明显减少,且小剂量的效果更佳。提示不同剂量的塞来昔布均可治疗急性创伤性脊髓损伤,且小剂量(25 mg/kg)的效果更佳。

酸分泌抑制剂以外的内科疗法

随着社会、经济的飞速发展，人们的生活模式发生了时代性转变──人口老龄化、饮食西化、肥胖者增加。随之而来的消化系统疾病，特别是食管领域疾病，越来越受到人们的瞩目。其中尤其胃食管反流病大有发病增多之势，值得引起各科医生的关注。面对这一新动向，本刊选译了２００１年第５０卷第７期《综合临床》杂志特集──胃食道逆流症ＧＥＲＤ，全集共载文２６篇。全集系统地、全面地讲述了胃食道反流病的病因、病理、诊断、治疗及其与各科的关连。本专辑全部由哈尔滨医科大学附属第二医院内科医生翻译，姚桢教授主审，颇值得临床一线的医生一读。

BACE1抑制剂分子水平高通量筛选体系的建立

目的建立体外分子水平β-分泌酶(BACE1)抑制剂高通量筛选体系。方法采用均相时间分辨荧光法(HTRF),通过优化反应时间、酶浓度、检测仪器等实验条件,建立BACE1抑制剂高通量筛选体系,根据待测样品对BACE1活性抑制程度筛选其抑制剂。结果采用HTRF法建立了BACE1抑制剂高通量筛选体系,其中反应时间确定为6h、BACE1浓度为670U/L,采用VICTOR3酶标仪测得信噪比为649.6,信背比为44.6,Z′因子为0.91,变异系数小于10%,并筛选到一系列IC50小于10-6mol/L的化合物。结论采用HTRF法建立的BACE1抑制剂筛选体系灵敏度高、特异性和稳定性好,可用于BACE1抑制剂的高通量筛选。

血清及下呼吸道分泌物SLPI水平在ICU重症肺炎中的评估价值

目的探讨血清及下呼吸道分泌物中分泌型白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)在重症肺炎中的评估价值。方法选取合肥市第三人民医院重症医学科(ICU)90例重症肺炎患者的临床资料,根据28 d生存情况分为存活组与死亡组,比较两组基线资料和入ICU及治疗24 h后的血清及下呼吸道分泌物SLPI、血清肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)及白细胞介素⁃8(IL⁃8)水平;分析血清SLPI与下呼吸道分泌物SLPI、TNF⁃α、IL⁃8的相关性;进行二分类logistic回归分析影响重症肺炎预后的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清及下呼吸道分泌物SLPI对重症肺炎预后的评估价值。结果死亡组机械通气时间长于存活组,余基线资料均差异无统计学意义(P>0.05)。治疗24 h后,两组血清及下呼吸道分泌物SLPI均较治疗前升高,血清TNF⁃α、IL⁃8均较治疗前降低(P<0.05)。存活组治疗后血清及下呼吸道分泌物SLPI均高于死亡组,血清TNF⁃α、IL⁃8均低于死亡组,(P<0.05)。Spearman相关性分析发现,血清SLPI与TNF⁃α、IL⁃8呈负相关(r=-0.583、-0.672,P<0.001);而与下呼吸道分泌物SLPI呈正相关(r=0.527,P<0.001)。二分类logistic回归分析显示血清及下呼吸道分泌物SLPI是重症肺炎28 d死亡的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示治疗后血清及下呼吸道分泌物SLPI的曲线下面积(AUC)分别为0.953、0.968,血清SLPI<87.59 ng/mL、下呼吸道分泌物SLPI<835.68 ng/mL时患者预后差(P<0.05);二者联合预测效能高于单独指标,AUC为0.991(P<0.05)。结论SLPI是重症肺炎的保护因素,血清及下呼吸道分泌物SLPI或可作为重症肺炎治疗及预后评估的有效指标。

海滨疗养因子结合运动对糖尿病患者血清MMP-9和TIMP-1的影响

目的研究青岛海滨疗养因子结合运动疗法对糖尿病患者血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)水平的影响。方法选择77例2型糖尿病患者给予青岛海滨疗养因子结合运动疗法6周,检测并比较此疗法治疗前后血糖、血清MMP-9和TIMP-1水平,并与40名健康对照组比较。结果糖尿病患者治疗前血清MMP-9水平明显高于对照组(P<0.05);TIMP-1明显低于对照组(P<0.05)。治疗后患者血清MMP-9水平从(216.4±12.6)ng/ml降至(185.8±12.3)mg/ml(P<0.05),而血清TIMP-1水平从(193.8±20.1)ng/ml升至(211.5±17.4)ng/ml(P<0.05)。结论青岛疗养因子结合运动疗法不仅可以降低糖尿病患者血糖水平,还可通过抑制血管细胞外基质的降解、促进MMPs和TIMPs之间平衡,而有可能影响糖尿病血管病变的发生发展。