医疗机构多组学自制试剂实验室的建设实践与思考

实验室自制试剂(laboratory-developed test,LDT)是指由实验室内部开发使用、不需要经过商业注册的体外诊断试剂(in vitro diagnostic medical devices,IVDs)。自制试剂涉及技术广泛,如高通量测序技术、质谱技术、流式细胞分析技术等,能够结合基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学等多种组学技术,成为研究遗传病生理病理机制的重要技术方法。中日友好医院被指定为我国10家自行研制使用体外诊断试剂的试点医疗机构之一,率先开展多组学自制试剂实验室建设。本文对医疗机构建设多组学自制试剂实验室的必要性、建设实践和运行风险等进行阐述。

国内外医疗机构自制试剂监管政策发展历史与借鉴

本文对比我国、欧盟、美国医疗机构自制试剂监管历史及现行监管政策,从产品管理和使用管理两个不同角度分析国内外相关监管制度沿革,为行业人员系统了解国内外医疗机构自制试剂监管历史和现状提供索引,为我国正在制定的相关管理规定提供研究基础和参考。

医疗机构实验室自制体外诊断试剂质量评价体系建立的探讨

目的:为医疗机构建立和运行与开展自制诊断试剂研究项目相适应的质量评价体系提供参考,为监管部门提供科学监管的方法工具,从而更好地提高患者生命和健康质量。方法:通过梳理新版《医疗器械监督管理条例》及体外诊断试剂产品监管的法规要求,结合自制诊断试剂的特点和应用现状,探讨自制诊断试剂质量评价体系的建立和运行及生产体系质量管理关键要点,分析存在的监管问题,并提出针对性建议。结果与结论:自制诊断试剂是典型的集设计开发、生产转化、临床应用于一体的体外诊断试剂产品。质量评价体系的建立和运行是自制诊断试剂产品质量稳定的有力保证,建立原材料质量评价标准,是研制单位和使用单位对自制诊断试剂实施质量监控和评价的有效手段。目前其监管存在法规要求不明确、临床应用风险高、临床性能验证难度大、质量评价体系不完善以及生产体系质量控制经验不足等问题。建议明确自制诊断试剂的界定;探索自制诊断试剂准入监管模式,开展质量评价标准化体系研究,促进临床转化;加强质量管理,提出明确的原材料质控要求和成品及留样质控要求。建立科学、规范的自制诊断试剂质量评价体系是科学监管的需要,是激发产学研检用协同创新的有效探索,有助于促进医学检验的发展。

自制间接法猪瘟抗体ELISA检测试剂盒性能研究

为了评价实验室自行研发的间接法猪瘟抗体ELISA检测试剂盒的性能,我们用调试后的ELISA试剂盒和两个进口试剂盒(法国LSI公司及美国IDEXX公司产品),分别对184份临床样品进行了检测。结果显示:实验室初步建立的检测体系与LSI公司试剂盒符合率为83.6%、特异性100%、敏感性80.6%,与IDEXX公司试剂盒符合率为76.7%、特异性62%、敏感性93%。

自制试剂盒在基因突变检测中的应用

利用自制试剂盒,在ABI 310型遗传分析仪上建立了单链构象多态性分析、单链构象多态性/杂合分析及SNaPshot分析的基因突变检测方法,并将其应用于31例大肠癌病人P53基因外显子7-8和k-ras基因外显子1的突变筛查。结果表明,在各自的优化条件下,用自制试剂盒比用商品化的试剂盒分析时间更短,分离性能更好。对实际样品的检测结果表明,P53基因外显子7-8和k-ras基因外显子1在被检测人群中的突变频率分别为24％和26％,均为单点突变,其中大部分样品的突变发生在单个基因,只有一例样品同时在两个基因发生突变,这说明肿瘤的发生发展有多种途径,而且与多个基因的突变相关。

通过自制PCR试剂盒确诊雏鹅细小病毒感染

通过 PCR条件选择 ,组装了可用于确诊鹅细小病毒 (goose parvovirus,GPV)感染的试剂盒。首先根据 Gen Bank中已发表的鹅细小病毒不同株的核苷酸序列 ,设计并合成了 GPV特异性简并引物 ,利用该引物确定 PCR扩增条件 ,并鉴定了扩增产物的特异性。根据上述扩增条件 ,组装 GPV诊断试剂盒。试剂盒共有 3个反应管 ,贮于 - 2 0℃ ,应用时取 1号管 ,加入煮沸的肝脏悬液上清 ,2、3号管分别为阴性和阳性对照。按固定条件扩增 ,结果显示 ,待检病料的检出率在 96 %以上。该试剂盒操作简单 ,效果稳定 ,可用于

一种总磷分析仪试剂在煤化工废水监测中的应用研究

IL500P自动总磷分析仪测定煤化工废水磷酸盐含量时,所用进口试剂价格昂贵,因此开发了一种适用于该仪器的自制试剂。介绍了自制试剂的配制方法和过程,对自制试剂进行了标准曲线线性回归、方法检出限和测定下限确定及准确度分析,对比了自制试剂和原装进口试剂测定煤化工废水中磷酸盐含量的检测结果。应用表明:自制试剂标准曲线的线性相关系数为0.9997,方法检出限为0.02 mg/L,相对标准偏差为0.68%~1.02%;使用自制试剂与原装进口试剂分别测定煤化工废水实际水样相对误差范围为-2.83%~1.73%。

自制液体组织凝血活酶试剂与进口组织凝血活酶试剂在COACHROMEIV血凝仪上的应用探讨

目的 探讨自制液体组织凝血活酶试剂与进口组织凝血活酶试剂对凝血酶原时间 (PT)检测结果的比较。方法 用已知ISI的进口组织凝血活酶试剂 ,标定未知ISI的自制液体组织凝血活酶试剂 ,并用两组试剂进行对比检测。结果 自制液体组织凝血活酶试剂的ISI值高于进口组织凝血活酶试剂的ISI值 ,但两组试剂的PT结果 (INR值 )相关性良好 (r =0 .97985 ,P <0 .0 0 0 1) ,重复性稳定性结果近似 ,差异较小。

快速消解分光光度法测定工业废水COD试剂探讨

快速消解分光光度法[1]测定污水中COD是一种快速高效的分析方法,文章详细介绍了分别用快速消解仪专用试剂和自制试剂测定工业废水中的COD.结果表明,在COD值在40～1200 mg/L范围内,两种试剂测定的结果的线性关系几乎相同,相关系数都能达到1.000,同时都还具有很好的精密度和准确度.

自动滴定仪测定血清钙实验评价

本文采用自动滴定仪(CUrning 940 Calcium Analyzcr.U.S.A.)为测定血清钙的主要工具。并用自制试剂与康龄(Corning)试剂作了比较。自制试剂批内平均精密度为0.91％,批间平均精密度2.06％,平均回收率102.5％,均在该仪器所定范围以内。自制试剂与Corning试剂所测100例样本的相关分析(r=0.9835),回归方程(y=0.022+0.984x),获较满意的结果。自动滴定在精密度、准确度、滴定终点的判断等都显著优于手动滴定法。

全自动血细胞分析仪RBC/PLT稀释液的研制与应用

目的研制ADVIA2120/2120i血细胞分析仪红细胞/血小板(RBC/PLT)稀释液配制方法,并应用于临床。方法对自制试剂与原装试剂分别进行pH、电导率、渗透压等理化参数测试,并在ADVIA 2120/2120i五分类血细胞分析仪上进行空白及100例临床标本对比测试,同时进行精密度、准确度、稳定性试验,对自制试剂与原装试剂两种试剂各测试指标进行比较,对所测得的数据用配对t检验进行统计学处理。结果自制试剂与原装试剂主要理化参数(pH、电导率、渗透压)比对基本一致。自制试剂与进口试剂对100例血样标本各测试参数比较,其差异无统计学意义(P>0.05)。结论自制ADVIA2120/2120i血细胞分析仪RBC/PLT稀释液与原装试剂比较,各项参数均符合要求,可以取代进口试剂。

分光光度法测定工业生产用水中化学需氧量方法优化

文章通过对外购化学需氧量(COD)光度法测定专用试剂进行分析、试验,探讨了自制COD光度法专用试剂的配制方法,并对分析方法进行优化,缩短分析时间、提高分析效率,方法准确、可靠,可用于大型企业内部水质COD的快速测定。

氨基酸分析仪法测定竹笋中游离氨基酸

建立了一种用自制试剂代替进口配套试剂由氨基酸分析仪测定竹笋中游离氨基酸的分析方法,方法的仪器分离度R>1.5,精密度与重现性RSD均小于5%,氨基酸标样线性良好(R2>0.999),方法回收率83.3%～105.2%,以信噪比S/N=10确定方法的定量下限(LOQ)为0.720～39.448nmol/mL,以信噪比S/N=3确定方法的最低检出限(LOD)为0.240～13.249nmol/mL。对实际竹笋样品进行测定,结果满意。该方法前处理简便,准确、灵敏,适合竹笋中游离氨基酸的测定。