大肠埃希菌内锌离子对断裂内含肽Npu DnaE自剪接作用的抑制效应

内含肽是前体未成熟蛋白质中的一段具有自我剪接功能的序列,其活性受多种因素影响,如锌离子浓度的控制。为了在大肠埃希菌胞内实现天然断裂型内含肽Npu DnaE"自剪接"作用可控,表达了Npu DnaE内含肽C-末端和人Ig G1抗体Fc段融合蛋白,及Npu DnaE内含肽N-末端和铜绿假单胞菌外毒素(PE)截短型融合蛋白,并加入浓度由1 mmol/L增加至2.5 mmol/L的锌离子。结果大肠埃希菌的生长没有受到影响,Fc蛋白和PE蛋白的单独表达没有受影响,而内含肽N-末端和C-末端发生剪接作用后,外显肽Fc和PE融合蛋白的表达量显著降低。上述结果表明,在大肠埃希菌表达富含半胱氨酸目的蛋白时添加锌离子,可以有效地抑制胞内Npu DnaE内含肽的"自剪接"作用,为拓展内含肽在生物药物生产中的应用提供了试验依据。

内含肽的功能与研究进展

蛋白质内含肽自剪接现象的发现对生物化学、生物物理学及蛋白质工程等领域产生一定的影响。本文综述了内含肽的结构组成,并且对内含肽的自剪接功能、归巢内切酶活性、温度敏感性等功能特性进行介绍,对内含肽的研究应用也作了相应的阐述。为内含肽在蛋白质领域、基因领域、疾病治疗领域的进一步开发应用提供理论基础。

酶性核糖核酸

核酸(脱氧核糖核酸(DNA )及核糖核酸(RNA))和蛋白质都是重要的生命基础物质,是维持生命机器正常运转的最重要的物质基础。核酸是信息分子,担负着遗传信息的贮存、传递及表达等基本生物功能。蛋白质是功能分子.表现遗传性状、执行各种生物机能;特别是生物细胞内的各种化学过程,只有依靠蛋白质(酶)

Ribozyme译名及与酶的关系

1978年,耶鲁大学教授阿尔特曼(Altman)领导的实验室从纯化的RNasap中分离出一种蛋白质和一种RNA(MRNA),他们的实验结果表明;这种蛋白质和MRNA单独存在时都不具有催化活性,但将二者混合后又可以恢复RNasap的活力。至1983年,他们的研究取得了重大突破,阿尔特曼证明,在较高浓度的镁离子存在的条件下,单独的MRNA具有RNasap的活力,即催化tRNA前体的成熟,而单独的蛋白质却无论如何也不具备这种能力,实验结果只能得出这样的结论:在tRNA前体成熟的过程中,蛋白质对于RNasap来说只是一种辅基,真正起催化作用的是RNA。几乎在阿尔特曼研究RNasap的同时,克罗拉多大学教授切克(Cech)领导的实验室发现四膜虫26SYRNA前体中含有居间序列。