利用AutoMate Express^(TM)自动化法医DNA提取系统提取骨骼及牙齿DNA

目的探讨建立骨骼及牙齿DNA自动化提取的新方法。方法将33份骨骼及15份牙齿样本分别用冷冻研磨和手工处理两种方法研磨成粉,采用AutoMate ExpressTM自动化法医DNA提取系统提取DNA并定量。结果 AutoMate ExpressTM自动化法医DNA提取系统能够在3h左右完成骨骼、牙齿DNA的提取,两种方法处理的骨骼样本所得DNA质量浓度差异无统计学意义。冷冻研磨处理的骨骼和牙齿样本均获得了较好的STR分型结果,且牙齿样本所得DNA质量浓度高于手工提取所得。结论应用AutoMate ExpressTM自动化法医DNA提取系统是自动化提取骨骼、牙齿DNA的一种新方法,可应用于法医实际案件检验。

DNA提取自动化工作站在法医学领域的应用

自动化工作站是指运用生化技术对生物性检材进行批量处理分析的全自动化工作平台,它可在短时间内批量进行移液,加样,混合等操作,特别适合用于大量生物性检材的PCR模板的制备。本文仅对DNA提取自动化工作站的基本模式、基本方法、法医学应用等进行综述,以期使该技术在法医DNA分析中得到更广泛的应用。

磁珠DNA自动提取系统在法医检验中的应用

磁珠DNA自动提取系统是将磁珠分离技术与DNA自动提取工作站结合运用,以达到高效提取DNA的目的,它具有操作时间短、准确性高、检材用量少等特点,特别适用于大批量生物检材的快速提取,是目前主流的DNA自动化提取方法。本文对磁珠DNA自动提取系统的基本组成、工作原理、操作流程及其在法医检验领域中的应用等进行了综述,并对该系统的发展前景进行了展望。

应用自动化工作站提取常见生物样本DNA

目的建立使用自动化工作站提取法医案件生物样本DNA的方法。方法选用Biomek 3000自动化工作站,采用DNA IQTM系统及Chelex法对法医案件中常见生物样本进行DNA提取,荧光定量技术进行定量,PCR扩增16个STR基因座并与手工提取方法比较。结果与手工提取方法进行比较,选用自动化工作站结合使用DNAIQTM系统及Chelex法提取DNA可获得满意的STR检验结果。结论自动化工作站可用于法医案件中常见生物样本的DNA提取。

法医物证DNA自动化检验技术体系的研究

目的建立自动化工作站同步提取不同种类涉案法医生物检材DNA的新方法。方法选用TECAN Freedom EVO 100-4、75-2型自动化提取、加样工作站,采用磁珠法及Chelex-100法对各类涉案生物检材进行DNA提取、PCR扩增、毛细管电泳检测其STR分型,进行比较测试。在"全国公安机关DNA数据库应用系统"中建立并应用实验室信息管理系统(LIMS)模拟实施规范化DNA检案。结果1552份各类检材,采用工作站-磁珠法提取DNA效果最佳,STR检测成功率为95%,工作站-Chelex法为88%;二者分别与其手工提取法比较,成功率无明显差异。92个样本同期检测,自动化工作站较手工操作DNA检案时间可缩减1.25倍。结论工作站磁珠法提取涉案检材DNA,可获得满意的STR分型结果。应用LIMS管控,可有效防控污染,明显提高检案效率及鉴定质量。

接触性检材的DNA自动化提取

目的建立使用King Fisher磁珠纯化仪结合博坤超微量磁珠法提取试剂盒自动化提取接触性检材DNA的方法。方法进行不同起始量(0.1、0.15、0.2、0.25ng)的标准DNA回收、单枚指纹DNA提取、案件接触性检材检验三种实验。结果 10例0.1ng样本除2例外,其他浓度的标准DNA均检出完整分型。单枚指纹样本检出分型与被取样者分型比对,有效DNA检出率为57.2%。870例案件接触性检材检验结果,有效DNA检出率为71.5%。结论博坤超微量磁珠法提取试剂盒结合King Fisher磁珠纯化仪提取法医案件中常见生物样本的DNA,其产率和质量均能满足STR分型需要。

MP-120工作站批量提取法医样本DNA

本文运用MP-120自动化DNA提取仪对72份血斑检材进行DNA提取扩增,荧光检测信号均值在200-3000RFU之间,表明所建立的MP-120工作操作程序在血斑的批量提取方面具有较高的成功率、稳定性和均一性,适用于法医DNA数据库的建立和案件中血斑样本的批量提取。

两种提取骨骼、牙齿DNA的方法

目的建立提取骨骼、牙齿DNA的新方法。方法收集380例骨骼、牙齿检材,其中347份为常规骨骼、牙齿(常规组),33份为陈旧骨骼、牙齿(疑难组)。常规组检材以Handy-Eco仪器、疑难组则用冷冻研磨仪研磨成粉,以Kingfisher自动化系统提取DNA,用Identifiler Plus进行STR分型检测。结果用HandyEco Kingfisher法(H-K法)成功提取345例常规骨骼、牙齿检材的DNA,成功率99.42%;用Freeze-mill Kingfisher法(FM-K法)成功获取32例疑难骨骼、牙齿检材的DNA,成功率96.97%。结论采用H-K法和FM-K法对骨骼和牙齿DNA的检验成功率较高,可选择应用于工作实践中。

FTA-DNA直接提取法的研究与应用

目的建立一种简约且易于自动化操作的Whatman FTA卡血样DNA提取方法。方法取直径1．2mm FTA卡血样，分别用FTA-DNA直接提取法及FTA常规提取方法提取DNA，AB-Identifiler^TM试剂盒分别进行10山和25山体系检测比较，并筛选批量grA卡血样DNA自动化提取程序。结果200份grA卡血样分别采用2种方法提取DNA模板，25μl体系PCR-STR检测，分型结果均良好。10μl体系检测，FTA-DNA直接提取法优于FTA常规提取方法，图谱RFU值为1000～2000，采用自动化工作站运行该提取程序较手工操作DNA分型图谱均衡性更佳；采用FTA常规提取方法检测，图谱RFU值100～2000，小片段优先扩增现象明显，且有19％的样本出现丢峰现象，采用自动化工作站运行该程序对其结果改善不明显。经工作站运行FTA-DNA直接提取法自动程序及10山体系检测本2万余份FTA卡采集的血样，均获得16个STR基因座DNA分型结果。结论本文建立的FTA-DNA直接提取法适用于FTA卡血样自动化DNA建库。

法医DNA检验的现状及发展

DNA检验自被作为证据引入法庭诉讼以来 ,随着科技的发展 ,其检验手段和方法不断更新和完善 ,经历了一个从小到大、从复杂到简单、从手工操作到仪器自动化的发展过程。本文综述了利用DNA推断年龄及DNA提取、检测等方面的新进展。

磁珠DNA自动提取系统在法医检验中的应用研究

磁珠DNA自动提取法不仅操作方法较简单,无需特殊设备,避免了大样品反复离心的损失,且实用范围较广,可应用于多种生物样本的提取,如唾液、汗斑、血斑、精斑等。目前已大量应用在法医检验中,对案件侦破效用极大。本文对磁珠DNA自动提取系统进行了概述,分析了其重要性及优势,简述了在法医检验中的应用及展望,报道如下。

两种提取系统对牙齿DNA检验效果比较

目的通过本次实验对比两种常用的DNA自动化提取系统对牙齿DNA纯化的效果。方法采用博坤微量生物物证DNA自动化提取系统(整合版)和Automate Express BTA自动化法医DNA提取系统分别对同一人的牙齿进行检验。结果经博坤微量生物物证DNA自动化提取系统(整合版)检验的牙齿DNA图谱峰高平均值约为Automate Express BTA自动化法医DNA提取系统的2倍;等位基因个数平均值约为1.5倍。结论博坤微量生物物证DNA自动化提取系统(整合版)代替传统手工提取方法检验牙齿,相较于Automate Express BTA自动化法医DNA提取系统提取效果更好,能满足实际检案的要求,可在法医学实践中选择使用。

TE-MAGS磁珠法提取效率定量研究

目的利用TE-MAGS在TECAN自动化工作站上结合磁珠试剂盒,定量研究微量DNA提取回收效率和纯化能力。方法 0.1~1ng9947A和混有6种常见PCR抑制剂的1ng9947A,经自动化提取后进行荧光定量和STR分型,定量分析回收效率和纯化能力。结果 0.1~1ng9947A提取后实际回收效率在38.92~60.01%之间,0.3ng以上9947A提取扩增后可以得到完整的STR图谱。胆汁酸盐、胶原质、尿素去除效率大于94.5%,血红素、黑色素、腐殖酸去除效率分别为97.5%、97.85%、82.14%。结论 TE-MAGS磁珠法对微量DNA回收效率较高,纯化能力较强,适合微量DNA提取。