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液相色谱-串联质谱法检测干血点样本中25-羟基维生素D_2和25-羟基维生素D_3
被引量:
16
1
作者
韩吉春
王小臣
+2 位作者
李广林
赵雅君
骆亦奇
《分析化学》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期448-454,共7页
建立了一种高通量液相色谱-串联质谱技术检测干血点(DBS)样本中25-羟基维生素D_2[25(OH)D_2]和25-羟基维生素D_3[25(OH)D_3]的方法。以DBS为样本,以4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(PTAD)为试剂进行分析物衍生化,所需样本量仅约相当于6μ...
建立了一种高通量液相色谱-串联质谱技术检测干血点(DBS)样本中25-羟基维生素D_2[25(OH)D_2]和25-羟基维生素D_3[25(OH)D_3]的方法。以DBS为样本,以4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(PTAD)为试剂进行分析物衍生化,所需样本量仅约相当于6μL全血当量的DBS样本;使用甲醇直接超声提取分析物,避开了通常情况下DBS样本前处理中的全血复溶和蛋白质沉淀等繁琐步骤;整个前处理过程使用自动化液体处理平台实现自动化操作和高检测通量;以25(OH)D_2-D6和25(OH)D_3-D_3为同位素内标,消除基质效应的影响。前处理后的样本进行LC-MS/MS分析,使用C_(18)柱进行分离,流动相为甲醇(含5 mmol/L甲酸铵)-水(含5 mmol/L甲酸铵)(75∶25,V/V),洗脱时间为4 min,使用多反应监测模式(MRM)定量。结果表明:25(OH)D_2和25(OH)D_3的检出限为0.12 ng/m L(S/N=3),定量限为0.94 ng/m L(S/N=10)。25(OH)D_2和25(OH)D_3在0.94~120.00 ng/m L范围内线性关系良好,日内相对标准偏差(RSD)分别为1.4%~8.6%和3.7%~15.5%,日间RSD分别为4.0%~5.3%和3.8%~14.9%,平均回收率分别为91.7%±7.9%~108.5%±6.5%和94.8%±6.8%~101.3%±2.9%。DBS样本在不同温度(-20℃,22℃,37℃)下储存不同时间(0,1,2,3,5,7,14天)后的稳定性实验显示样本总体RSD<15%。以25(OH)D参考物质NIST SRM 972a中的Level 3制备标准DBS样本,25(OH)D_2和25(OH)D_3的回收率分别为110.3%和103.0%。
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关键词
液相色谱-串联质谱
25-羟基维生素D2
25-羟基维生素D3
自动化液体处理平台
干血点样本
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职称材料
题名
液相色谱-串联质谱法检测干血点样本中25-羟基维生素D_2和25-羟基维生素D_3
被引量:
16
1
作者
韩吉春
王小臣
李广林
赵雅君
骆亦奇
机构
杭州量康医学检验所
出处
《分析化学》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017年第3期448-454,共7页
文摘
建立了一种高通量液相色谱-串联质谱技术检测干血点(DBS)样本中25-羟基维生素D_2[25(OH)D_2]和25-羟基维生素D_3[25(OH)D_3]的方法。以DBS为样本,以4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(PTAD)为试剂进行分析物衍生化,所需样本量仅约相当于6μL全血当量的DBS样本;使用甲醇直接超声提取分析物,避开了通常情况下DBS样本前处理中的全血复溶和蛋白质沉淀等繁琐步骤;整个前处理过程使用自动化液体处理平台实现自动化操作和高检测通量;以25(OH)D_2-D6和25(OH)D_3-D_3为同位素内标,消除基质效应的影响。前处理后的样本进行LC-MS/MS分析,使用C_(18)柱进行分离,流动相为甲醇(含5 mmol/L甲酸铵)-水(含5 mmol/L甲酸铵)(75∶25,V/V),洗脱时间为4 min,使用多反应监测模式(MRM)定量。结果表明:25(OH)D_2和25(OH)D_3的检出限为0.12 ng/m L(S/N=3),定量限为0.94 ng/m L(S/N=10)。25(OH)D_2和25(OH)D_3在0.94~120.00 ng/m L范围内线性关系良好,日内相对标准偏差(RSD)分别为1.4%~8.6%和3.7%~15.5%,日间RSD分别为4.0%~5.3%和3.8%~14.9%,平均回收率分别为91.7%±7.9%~108.5%±6.5%和94.8%±6.8%~101.3%±2.9%。DBS样本在不同温度(-20℃,22℃,37℃)下储存不同时间(0,1,2,3,5,7,14天)后的稳定性实验显示样本总体RSD<15%。以25(OH)D参考物质NIST SRM 972a中的Level 3制备标准DBS样本,25(OH)D_2和25(OH)D_3的回收率分别为110.3%和103.0%。
关键词
液相色谱-串联质谱
25-羟基维生素D2
25-羟基维生素D3
自动化液体处理平台
干血点样本
Keywords
Liquid chromatography-tandem mass spectrometry
25-Hydroxyvitamin D2
25-Hydroxyvitamin D3
Automated liquid handling platform
Dried blood spots
分类号
R446.1 [医药卫生—诊断学]
O657.63 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
液相色谱-串联质谱法检测干血点样本中25-羟基维生素D_2和25-羟基维生素D_3
韩吉春
王小臣
李广林
赵雅君
骆亦奇
《分析化学》
SCIE
EI
CAS
CSCD
北大核心
2017
16
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