全自动快速微生物质谱检测系统在流感嗜血杆菌快速鉴定中的应用价值

目的:分析全自动快速微生物质谱检测系统在流感嗜血杆菌快速鉴定中的应用价值。方法:选取2021年6月—2022年6月大理市第一人民医院检验科微生物室收集的呼吸道感染患者的痰液样本或咽拭子样本680份为研究对象,应用16SrDNA序列鉴定细菌种属,获得流感嗜血杆菌30株。比较全自动快速微生物质谱检测系统、常见微生物鉴定系统、M-H琼脂药敏试验对流感嗜血杆菌的鉴定能力及三种鉴定方法的临床应用特点。结果:全自动快速微生物质谱检测系统流感嗜血杆菌检出率高于M-H琼脂药敏试验,差异有统计学意义(P=0.020)。M-H琼脂药敏试验和常见微生物鉴定系统鉴定能力比较,差异无统计学意义(P=0.222)。全自动快速微生物质谱检测系统鉴定操作简单,用时更短,结果自动读取,经济性良好。结论:全自动快速微生物质谱检测系统可以在短时间内完成对流感嗜血杆菌的鉴定,检出率高、操作简便、经济性良好。

自动质谱退卷积定性系统(AMDIS)用于重叠农药峰的GC/MS质谱图退卷积处理

采用自动质谱退卷积定性系统(AMDIS)分别对4组具有不同重叠程度的农药质谱图进行了退卷积拆分处理,并调用拆分前后的谱图在NIST谱库中进行检索。通过对检索结果的分析,初步研究了AMDIS对不同重叠程度的农药质谱图的拆分能力,同时对拆分后新建质谱图中错误或丢失离子进行了分析。结果发现,AMDIS对于扫描数差距大于1的重叠农药峰有较好的拆分结果,可有效地排除重叠峰质谱图互相干扰,增加对目标农药定性的准确性,但同时也存在漏筛共存离子、灵敏度低等缺点。

全自动快速微生物质谱检测系统在流感嗜血杆菌快速鉴定中的价值分析

目的 分析全自动快速微生物质谱检测系统(MALDI-TOF)在鉴定流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)中的应用价值。方法 收集皖北煤电集团总医院2020年7月至2021年3月间住院患者1 135份痰液样本,提取来自不同患者的Hi 30株,分别采用MALDI-TOF、全自动细菌鉴定仪(Vitek)及M-H琼脂药敏试验对所有受检标本进行细菌种属鉴定,记录并比较3种方法对Hi菌株的鉴定结果。结果 MALDI-TOF对Hi菌株的检出率为96.67%,高于Vitek的86.67%,但差异无统计学意义(χ^(2)=1.333,P=0.248);也高于M-H琼脂试验的73.33%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.143,P=0.023)。3种方法检测用时分别为(0.15±0.01)h、(17.04±5.93)h和(36.78±9.58)h,差异有统计学意义(F=18.258,P<0.001);进一步用LSD-t检验对3种方法用时进行两两比较,差异均有统计学意义(P均<0.001)。结论 全自动快速微生物质谱检测系统可对Hi进行有效鉴定,具有成本低、准确率高、操作简便、检测用时短等明显优点,在临床Hi的鉴定中具有较高应用价值。

高原地区两种微生物鉴定系统对临床常见病原菌鉴定的一致性分析

目的比较MicroTyper MS微生物快速鉴定基质辅助激光解析飞行时间质谱和VITEK 2Compact全自动微生物分析系统对细菌的鉴定能力。方法950株临床分离的菌株,均采用MicroTyper MS和VITEK 2 Compact同时进行鉴定,以VITEK 2 Compact的结果为准,分析MicroTyper MS与VITEK 2Compact结果的一致性。结果同时鉴定950株细菌,与VITEK 2 Compact鉴定结果相比,MicroTyper MS可将841株(88.5%)鉴定至种,可将899株(94.6%)鉴定至属。鉴定不一致51株(5.4%)。MicroTyper MS与VITEK 2 Compact相比,鉴定至种的一致率为88.5%,鉴定至属的一致率为94.6%。695株革兰阴性细菌中,MicroTyper MS可将611株(87.9%)鉴定至种,可将649株(93.4%)鉴定至属。鉴定不一致46株(6.6%)。247株革兰阳性球菌中,MicroTyper MS可将222株(89.9%)鉴定至种,可将242株(98.0%)鉴定至属。鉴定不一致5株(2.0%)。8株酵母菌中,MicroTyper MS可将8株(100.0%)鉴定至种,鉴定不一致0株。结论MicroTyper MS与VITEK 2 Compact对临床常见细菌的鉴定结果具有较高的一致性,但MicroTyper MS相对VITEK 2 Compact来说具有耗时短、成本低等优点,提高了鉴定效率,为临床诊疗带来了便利。

尿流式细胞术、MALDI-TOF MS及VITEK 2 XL全自动微生物鉴定系统联合试验对尿培养标本的药敏鉴定结果评价

目的评价尿流式细胞术、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和VITEK 2 XL全自动微生物鉴定系统联合试验对中段尿培养标本直接鉴定结果的可靠性。方法收集2021年1-10月于苏州市第九医院住院的296例泌尿系统感染患者送检的尿培养阳性标本。采用UF-1000i进行尿液标本菌量计数,选择中段尿菌量计数>10^(5)个/毫升的标本,使用MALDI-TOF MS技术进行直接鉴定;再将中段尿菌量计数>10^(5)个/毫升的标本进行稀释,使用VITEK 2 XL全自动微生物鉴定系统进行直接药敏试验,将联合试验结果与常规药敏试验结果进行比较,评价其可靠性。结果MALDI-TOF MS直接法鉴定结果中鉴定到种水平为93.9%,鉴定到属水平为97.6%,MALDI-TOF MS没有提供可靠的鉴定结果占2.3%。次代培养后VITEK 2 XL鉴定结果符合率为100.0%。联合试验鉴定结果与常规药敏试验结果差异无统计学意义(P>0.05)。革兰阴性菌直接药敏最合适的尿液菌量计数在500~1100个/微升。革兰阳性菌直接药敏最合适的尿液菌量计数在500~1500个/微升。结论联合试验进行阳性尿培养标本的直接鉴定与直接药敏试验可快速、准确地得到鉴定及药敏结果。

MALDI-TOF系统在鉴定流感嗜血杆菌中的应用价值

目的:探讨全自动快速微生物质谱检测系统(MALDI-TOF)对流感嗜血杆菌的鉴定价值。方法:随机选取2020年1—6月于医院住院或门诊就诊的呼吸系统感染患者的痰液标本或咽拭子标本1200份,分别采用MALDI-TOF检测系统、常规生化细菌鉴定系统、M-H琼脂药敏试验进行测定,比较三种方法对流感嗜血杆菌的检出率及检测时间。结果:MALDI-TOF检测系统对流感嗜血杆菌的检出率(97.78%)高于M-H琼脂药敏试验法(75.56%),差异有统计学意义(P<0.05),但与常规生化细菌鉴定系统检出率(88.89%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。三种检测方法检测流感嗜血杆菌所需时间显示:MALDI-TOF检测系统<常规生化细菌鉴定系统<M-H琼脂药敏试验法,差异有统计学意义(P<0.05)。MALDI-TOF检测系统对检测时间、检测流程、检测结果判读、检测成本的满意度最高,其次是常规生化细菌鉴定系统、M-H琼脂药敏试验法,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:全自动快速微生物质谱检测系统鉴定流感嗜血杆菌的应用价值高,检测时间短,检出率高。

程序升温大体积进样和解卷积气相色谱-质谱法测定蔬菜水果中32种农药残留量

建立了蔬菜、水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯等32种农药的气相色谱-质谱（GC-MS）检测方法。样品经乙腈提取,石墨碳黑串联丙氨基固相萃取柱净化,采用程序升温大体积进样,GC-MS全扫描模式采集,结合解卷积技术定性分析,内标法定量。分别对程序升温和大体积进样等条件进行了研究,并考察了方法选择性和耐用性。在最优条件下,32种农药的响应值与浓度呈良好的线性关系（r〉0.995）,各农药的方法检出限为2.0~5.0μg/kg,以菠菜、四季豆和黄瓜为代表基质,进行3个水平（0.010~0.50 mg/kg）的加标回收试验（n=6）,回收率为65.2%~120.3%,相对标准偏差（RSD）为4.1%~22.3%。该方法快速、灵敏、可靠、耐用,能满足蔬菜、水果中多类多残留痕量分析的要求。

3种鉴定系统在微生物室间质量评价中的应用和比较

目的评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)、Vitek 2 Compact全自动微生物鉴定系统(简称Vitek 2 Compact)和MicroScan WalkAway 96 plus全自动微生物鉴定系统(简称MicroScan WalkAway 96 plus)在质量控制中的鉴定应用价值。方法采用MALDI-TOF MS、Vitek 2 Compact和MicroScan WalkAway 96 plus同时对61株不同批次的质控菌株进行鉴定并作比较。结果 MALDI-TOF MS、Vitek 2Compact和MicroScan WalkAway 96 plus对26株革兰阴性杆菌的鉴定准确率分别为88.4%、100.0%和84.6%,对15株革兰阳性球菌的鉴定准确率分别为100.0%、100.0%和86.7%,对8株酵母样真菌的鉴定准确率分别为100.0%、100.0%和87.5%,对12株其他细菌的鉴定准确率分别为100.0%、83.3%和41.7%。结论 MALDI-TOF MS、Vitek 2 Compact和MicroScan WalkAway 96 plus 3个鉴定系统对常见的革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌、酵母样真菌的鉴定准确性较好。在苛养菌和革兰阳性杆菌方面,MALDI-TOF MS和Vitek 2 Compact的鉴定准确性较MicroScan WalkAway 96 plus好。

VITEK2 Compact与VITEK MS系统对细菌鉴定结果的比较研究

目的比较VITEK 2 compact和ⅥTEK MS两套系统对细菌鉴定的符合率。方法 分别应用VTEK 2 compact和VITEK MS对289株临床分离菌株、室间质评菌株和标准菌株同时进行鉴定,采用测序技术对两者鉴定结果不一致的菌株进行确认。结果 VITEK 2 compact对细菌"种"和"属"鉴定符合率分别为88.58%(256/289)和100%(289/289),VITEKMS对细菌"种"和"属"鉴定符合率分别为88.93%(257/289)和100%(289/289)。结论 VITEK MS对细菌"种"鉴定符合率高于VITEK 2 compact,且具有操作简便和检测快速等优势,使细菌鉴定更准确、快速和高效,可用于临床微生物实验室的细菌常规快速鉴定。

优化AMDIS软件建库自动筛选常见有机毒物

目的优化AMDIS软件,建立常见有机毒物的GC/MS自动筛选方法。方法建立信息型中文常见毒物的质谱库,优化分离条件并测定多种毒物的保留时间,优化检索条件并测定多种毒物的检测限。结果建立含2344种常见药毒物的中文质谱库;测定了162种药毒物的保留时间及检测限。结论优化的AMDIS自动筛选常见药毒物,快速、灵敏、可靠,完全满足可疑含毒检材中毒物排查的要求。

GC-MS结合自动质谱退卷积鉴定系统和保留指数用于毒芹子挥发油的定性分析

目的分析食药同源药物毒芹子的挥发油化学成分。方法采用GC-MS结合化学计量学方法对毒芹子挥发油进行定性分析,色谱图中重叠峰采用自动质谱退卷积鉴定系统(AMDIS)进行识别,同时计算各组分的保留指数,以质谱库对解析后的纯组分进行定性。结果定性分析出31个成分,主要为烃类、醛类和醇类化合物,其中含量最高的是γ-松油烯(66.29%)。结论本法能更真实、全面地反映毒芹子中的挥发油成分,为毒芹子开发利用和质量控制提供依据。

应用自动质谱退卷积定性系统拆分中药挥发油总离子流谱图中的重叠峰--以青皮为例

研究如何应用自动质谱退卷积定性系统(automated mass spectral deconvolution&identification system,AMDIS)拆分中药挥发油总离子流谱图中的重叠峰。通过水蒸气蒸馏法提取挥发油,GC-MS测定得到总离子流谱图,AMDIS对重叠峰进行解析。AMDIS能够初步分析总离子流谱图中大约含有多少化合物。而后,通过分析待鉴定化合物对应扫描点的提纯质谱图及该处原始质谱图与参考谱库中的各匹配项,可准确的对化合物进行定性或否定某些实际并不存在的化合物。进一步分析各化合物特征性碎片离子峰的变化规律,可确认之前的结果。研究结果表明AMDIS通过对待鉴定化合物对应扫描点谱图的提纯,可以有效的对重叠峰进行拆分,进而准确的定性。

蛇龙珠与卡曼娜葡萄酒主要呈香物质鉴定

利用自动质谱图解卷积和鉴定系统并结合标样和保留指数定性在蛇龙珠和卡曼娜葡萄酒中鉴定出116种挥发性风味物质,并根据定量结果和各物质的感官阈值对每种物质的香气活性值(OAV)进行计算,寻找出2种葡萄酒中的主要呈香物质并根据OAV值对这2种葡萄酒的香气轮廓进行了模拟计算。研究发现我国河西走廊的蛇龙珠葡萄酒和智利莫莱山谷的卡曼娜葡萄酒总体香气轮廓较为相似,蛇龙珠中的C6醇类、脂肪酸乙酯、脂肪酸、醛、萜烯、降异戊二烯和内酯类物质含量较高,而卡曼娜中的乙酸酯、高级醇和酮类物质含量较高。蛇龙珠的花香、焦糖味和橡木味相对较强,β-大马士酮、左旋-2,3-丁二醇、苯乙醛和己酸乙酯、己酸、异丁醇、异戊醇7种物质是2种葡萄酒共同的主要呈香物质。

气相色谱-质谱联用分析5种有机磷农药时氢气代替氦气作为载气的可行性考察

迄今为止,氦气几乎是气相色谱-质谱联用仪运行中唯一可选的载气。本文使用气相色谱-质谱联用仪考察了氢气和氦气分别作为载气时,对5种有机磷农药混合标准溶液的检测,以确定氢气代替氦气作为气相色谱-质谱联用仪载气用于有机磷农药分析的可行性。用工作站自带解卷积软件(自动质谱解卷积鉴定系统,AMDIS32),结合自建"有机农药质谱库"对结果进行了解析,而后用SPSS统计软件对数据进行了聚类分析。结果发现,以氢气为载气时虽然出峰稍快,但色谱峰分离度较低,解良度较低,且待测物信号不稳定,测定准确度较低,有些化合物甚至检测不到。因此以氢气为载气分析有机磷农药时应对测定准确度、信号稳定性、安全性等诸多因素进行慎重考虑。

遗传算法-反向传播神经网络优化气相色谱质谱联用法测定香蕉挥发性组分

目的应用反向传播(back propagation,BP)神经网络结合遗传算法(genetic algorithm,GA)优化固相微萃取(solid phase microextraction,SPME)条件,建立更优的测定香蕉果肉挥发性组分的气相色谱质谱联用法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)和组分定性方法。方法通过正交实验优化SPME提取参数:超声时间、样品量和萃取温度,在正交实验基础上,运用BP神经网络结合GA寻找SPME最佳的萃取参数,应用GC-MS对香蕉果肉挥发性组分进行定性和定量分析。结果根据GA-BP神经网络寻优得到萃取参数:超声时间25.0 min、样品量2.9 g、萃取温度49.0℃。在此最佳萃取参数条件下测定香蕉果肉的挥发性化合物,共鉴定出香蕉果肉63个挥发性组分,主要以酯类为主(占相对总含量的75.75%),相对含量最大的组分是乙酸异戊酯(1281.26μg/kg)。结论本研究通过GA-BP神经网络优化SPME条件,再通过解卷积软件处理原始质谱图,提高了香蕉挥发性组分鉴定的可靠性和鉴定组分数量,为测定果蔬等农产品的挥发性组分与评价其品质提供参考。

不同方法鉴定临床分离株有β溶血环的葡萄球菌的效果评价

目的评估VITEK-2 compact全自动微生物鉴定系统(VITEK-2 compact)、国产基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱系统Clin-TOF-Ⅱ型仪器及其搭载的Bio Explorer V2.1鉴定数据库(Clin-TOF质谱系统)和乳胶凝集法鉴定临床分离株有β溶血环的葡萄球菌的临床应用性能。方法采用VITEK-2 compact、Clin-TOF质谱系统和乳胶凝集法分别鉴定193株临床分离株有β溶血环的葡萄球菌,其中103株为金黄色葡萄球菌,90株为溶血葡萄球菌,评价三种方法的鉴定性能。三种方法结果不一致时,采用16Sr DNA扩增测序进行结果验证。结果 VITEK-2 compact、Clin-TOF质谱系统和乳胶凝集法鉴定对103株金黄色葡萄球菌鉴定准确率、特异性和假阴性率分别为100%(103/103)、99.03%(102/103)、96.12%(99/103),100%、100%、100%和0、0.97%、3.74%。VITEK-2 compact、Clin-TOF质谱系统对90株溶血葡萄球菌鉴定结果正确率均为100%,而乳胶凝集法鉴定结果均为非金黄色葡萄球菌。VITEK-2 Compact、Clin-TOF MS和LAT与参考方法的比较,差异无统计学意义(P>0.05)。VITEK-2 compact鉴定时间为4.58±0.23h,而Clin-TOF MS系统和乳胶凝集法鉴定时间分别为27.84±1.96min和2.22±0.51min。通过方差分析,三种检测方法时间有统计学意义(P<0.05)。结论三种方法对临床分离株有β溶血环的葡萄球菌鉴定准确率和特异度均较好。与VITEK-2 compact相比,Clin-TOF质谱系统,检测速度快,通量高,可作为临床微生物实验室鉴定有β溶血环的葡萄球菌的常规方法。而乳胶凝集法成本低、时效快,适用于临床微生物实验室金黄色葡萄球菌的筛查鉴定。

基于16S rDNA序列、MALDI-TOF-MS和VITEK的沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的鉴定

沙门氏菌和金黄色葡萄球菌广泛存在于食品及环境中,对食品安全造成一定的威胁。在食源性致病菌检测过程中,选择合适的方法不仅可以缩短时间,节省人力物力,还能更好地溯源。选取210株沙门氏菌和18株金黄色葡萄球菌,使用16S rDNA序列测定、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和VITEK全自动细菌鉴定系统对其鉴定,使用R软件包(v3.6.1)对鉴定结果进行统计和相关性分析,比较3种方法的鉴定水平和效率。结果表明:3种方法均可将210株沙门氏菌(100.0%)鉴定到属水平;16S rDNA序列测定方法可将18株(100.0%)金黄色葡萄球菌鉴定到属水平,可将其中15株(83.3%)菌鉴定到种水平;MALDI-TOF-MS和VITEK可将18株金黄色葡萄球菌(100.0%)鉴定到种水平。除16S rDNA序列测定方法外,其余2种方法对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的鉴定水平相同,而MALDI-TOF-MS鉴定所需时间最短、效率最高。

16S rRNA在鉴定害肺戴阿里斯特杆菌中的应用

目的:评估Vitek-2 Compac全自动微生物鉴定系统、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和16S核糖体RNA(16S rRNA)对害肺戴阿里斯特杆菌(Dialister pneumosintes)的鉴定能力。方法:分别用Vitek-2 Compact全自动微生物鉴定仪、MALDI-TOF MS以及16S rRNA测序对害肺戴阿里斯特杆菌进行鉴定。结果:16S rRNA测序鉴定出该致病菌为害肺戴阿里斯特杆菌,而Vitek-2 Compact全自动微生物鉴定仪和MALDI-TOF MS均无法鉴定。结论:对于害肺戴阿里斯特杆菌,16S rRNA的鉴定方法具有优势。

GC-MS结合化学计量学方法用于缬草挥发性成分的定性研究

目的：研究缬草挥发性成分。方法：采用：以《药典（一部）》附录XD甲的标准方法提取缬草挥发性成分，采用GC－MS结合化学计量学方法对缬草挥发性成分进行定性分析。色谱柱：5 HP－MS；载气：He；流速：1．0mL／min；进样量：1μL；分流比：1∶100。质谱条件：电子轰击（ EI）离子源，辅助线温度280℃，离子源温度230℃，四级杆温度150℃；质量扫描范围：m／z 50～550。采用Chemstation和Nist 08谱库检索。结果：共鉴定出30种成分，占总含量的94％。结论：共鉴定出成分，与传统定性分析方法相比，GC－MS结合化学计量学方法具有较高的灵敏度和准确度，有效增加鉴定的成分，可用于缬草挥发性成分的定性分析。