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Wortmannin通过抑制癫痫大鼠海马自噬活性发挥神经保护作用 被引量:16
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作者 曹丽丽 董艳 +3 位作者 徐婧婧 林幽町 迟令懿 迟兆富 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1584-1588,共5页
目的:探讨癫痫大鼠海马自噬活性的变化及自噬抑制剂wortmannin(WM)对致痫大鼠海马神经元的保护作用。方法:实验大鼠分为对照组、致痫2 h、8 h、16 h、24 h、72 h组和WM干预组。应用HE染色和Nissl染色观察癫痫大鼠海马神经元损伤的变化... 目的:探讨癫痫大鼠海马自噬活性的变化及自噬抑制剂wortmannin(WM)对致痫大鼠海马神经元的保护作用。方法:实验大鼠分为对照组、致痫2 h、8 h、16 h、24 h、72 h组和WM干预组。应用HE染色和Nissl染色观察癫痫大鼠海马神经元损伤的变化。免疫印迹检测海马组织微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ的比值作为自噬活性的指标。结果:LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值在大鼠癫痫发作2 h时开始升高,24 h达到高峰,持续升高至少72 h。致痫24 h时海马CA1区出现明显神经元损伤和丢失。WM干预组CA1区存活神经元数目(100.88±18.73)显著高于癫痫组(70.16±5.09)(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值低于癫痫组(P<0.05)。结论:癫痫发作导致的海马损伤时存在自噬激活现象;WM通过抑制自噬活性减轻癫痫发作所致的海马损伤,具有神经保护作用。 展开更多
关键词 癫痫 自吞噬作用 微管相关蛋白1轻链3 海马 WORTMANNIN
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ROS介导的自噬及其在相关疾病中的作用 被引量:26
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作者 尤寿江 石际俊 +1 位作者 张艳林 刘春风 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期187-190,195,共5页
传统观念认为,活性氧类(reactive oxygen species,ROS)只是一类损伤细胞的毒性物质,近年的研究发现ROS作为一种信号分子参与细胞的增殖、分化及凋亡等多个生理过程。自噬是一种溶酶体依赖性的细胞内大分子物质和细胞器的降解过程。
关键词 自吞噬作用 活性氧 线粒体 自噬性细胞死亡
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自噬在熊果酸诱导的人脐静脉内皮细胞损伤中的作用 被引量:6
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作者 毕娟娟 何林 +2 位作者 余音 郭倩 叶秀峰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期601-607,共7页
目的:研究自噬在熊果酸诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HU-VECs)损伤中的作用。方法:体外培养HUVECs,运用不同浓度的熊果酸处理36 h,采用MTT法检测HUVECs增殖率的变化;透射电镜观察细胞超微结构的改变... 目的:研究自噬在熊果酸诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HU-VECs)损伤中的作用。方法:体外培养HUVECs,运用不同浓度的熊果酸处理36 h,采用MTT法检测HUVECs增殖率的变化;透射电镜观察细胞超微结构的改变;单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色观察熊果酸对HUVECs自噬表达水平的影响;Western blotting检测微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)及自噬相关蛋白Beclin-1的变化;RT-PCR检测LC3及Beclin-1 mRNA的变化;流式细胞术检测自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)抑制自噬前后经熊果酸处理的HUVECs凋亡率的变化。结果:熊果酸抑制HUVECs增殖并呈剂量依赖性;熊果酸可诱导HUVECs产生自噬:透射电镜和MDC染色均显示HUVECs经熊果酸处理后自噬囊泡明显增加且自噬在基因及蛋白水平的表达均增加;3-MA与熊果酸联合作用于HUVECs时抑制了熊果酸诱导的HUVECs自噬空泡的积聚并且可明显促进HUVECs凋亡。结论:熊果酸抑制HUVECs增殖,并诱导其发生自噬,自噬在此过程中对HUVECs起保护作用。自噬抑制剂3-MA能够增强熊果酸诱导的HUVECs的增殖抑制作用并且促进HUVECs发生凋亡。 展开更多
关键词 熊果酸 内皮细胞 自吞噬作用 细胞凋亡
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自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤在H_2O_2引起的神经胶质瘤U251细胞损伤中的作用 被引量:6
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作者 孔晓霞 张宏宇 +2 位作者 钟加滕 康劲松 孙连坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期695-698,共4页
目的:探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)在H_2O_2诱导的神经胶质瘤U251细胞损伤过程中的作用。方法:实验分为4组:正常对照组、10mmol/L 3-MA组、1mmol/L H_2O_2组、1mmol/L H_2O_2+10mmol/L3-MA组。MTT法检测各组的U251细胞增殖率;MDC... 目的:探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)在H_2O_2诱导的神经胶质瘤U251细胞损伤过程中的作用。方法:实验分为4组:正常对照组、10mmol/L 3-MA组、1mmol/L H_2O_2组、1mmol/L H_2O_2+10mmol/L3-MA组。MTT法检测各组的U251细胞增殖率;MDC染色检测细胞自噬空泡的变化;Hoechst 33342染色检测细胞核染色质凝聚变化;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:与对照组相比,单独应用3-MA对U251细胞无明显影响。H_2O_2作用组U251细胞增殖率明显降低,细胞内出现自噬空泡,细胞核染色质凝聚,细胞凋亡率增加。3-MA与H_2O_2联合作用于U251细胞时,与单独应用H_2O_2组相比,抑制了H_2O_2引起的胞内自噬空泡的积聚,但细胞凋亡率明显增加。结论:自噬抑制剂3-MA能够-定程度地抑制H_2O_2诱导的U251细胞自噬,但促进了细胞凋亡,表明自噬在H_2O_2诱导的神经胶质瘤U251细胞损伤过程中很可能起到保护性作用。 展开更多
关键词 自吞噬作用 U251细胞 3-甲基腺嘌呤 过氧化氢
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西罗莫司对鱼藤酮诱导PC12细胞凋亡的抑制作用 被引量:1
5
作者 邓有才 赛燕 +1 位作者 董兆君 但国蓉 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期201-206,共6页
目的观察西罗莫司干预鱼藤酮诱导PC12细胞凋亡的作用,以探讨西罗莫司用于治疗帕金森病的可能性及机制。方法 PC12细胞处理分为正常对照组、鱼藤酮50nmol.L-1组和西罗莫司25,50,100和200μg.L-1组。PC12细胞加入西罗莫司25,50,100和200μ... 目的观察西罗莫司干预鱼藤酮诱导PC12细胞凋亡的作用,以探讨西罗莫司用于治疗帕金森病的可能性及机制。方法 PC12细胞处理分为正常对照组、鱼藤酮50nmol.L-1组和西罗莫司25,50,100和200μg.L-1组。PC12细胞加入西罗莫司25,50,100和200μg.L-1预处理12h后,再加入鱼藤酮50nmol.L-1作用24h。采用4′,6-二脒-2-苯基吲哚(DAPI)免疫荧光实验检测细胞凋亡形态变化;AnnexinⅤ-FITC/PI染色法检测细胞凋亡率;罗丹明123检测线粒体膜电位;吖啶橙荧光染色法检测自吞噬体形成;Western印迹法检测胱天蛋白酶3和微管相关蛋白轻链3(LC3)表达。结果与鱼藤酮模型组比较,西罗莫司50,100和200μg.L-1组细胞凋亡率分别降低了20.6%,35.4%和40.2%(P<0.05,P<0.01);西罗莫司25,50,100和200μg.L-1组可以升高鱼藤酮导致的线粒体膜电位降低,分别为1.8,2.2,2.4和3.2倍。西罗莫司100μg.L-1预处理促使LC3由Ⅰ型向Ⅱ型转变,胱天蛋白酶3的20ku活性片段降低16.2%。结论西罗莫司通过增强失调线粒体的自吞噬降解作用,降低线粒体相关的促凋亡因子的释放和激活,进而抑制依赖胱天蛋白酶凋亡途径的激活而对鱼藤酮诱导的细胞凋亡具有保护作用,提示西罗莫司有治疗帕金森病的可能。 展开更多
关键词 西罗莫司 鱼藤酮 自吞噬作用 细胞凋亡 胱天蛋白酶3 微管相关蛋白轻链3
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自噬途径在人支气管上皮细胞恶性转化中的作用机制
6
作者 黎水容 张岚 《中国医学工程》 2014年第11期35-35,38,共2页
目的对自噬途径在人支气管上皮细胞恶性转化中的作用机制进行分析与探讨。方法利用激光共聚焦扫描显微镜成像和FRET技术,在活细胞中实时研究结晶型Nis与反式-BPDE恶性转化16HBE细胞中自噬途径的作用机制。结果正常细胞与恶性转化细胞相... 目的对自噬途径在人支气管上皮细胞恶性转化中的作用机制进行分析与探讨。方法利用激光共聚焦扫描显微镜成像和FRET技术,在活细胞中实时研究结晶型Nis与反式-BPDE恶性转化16HBE细胞中自噬途径的作用机制。结果正常细胞与恶性转化细胞相比,GEP-LC3蛋白的点状聚集明显减少,仅仅达到16HBE-N细胞的1/3,由此充分表明,蛋白质印迹法检测发现,自噬水平下降,m TOR激酶活性上升,Beclin1表达降低。结论研究表明,反式-BPDE会通过自噬途径参与诱导16HBE细胞恶性转化的癌变过程中,为肺癌的预防与治疗提供重要信息。 展开更多
关键词 自吞噬作用 肺肿瘤 细胞恶性转化 作用机制
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组蛋白脱乙酰基酶6在聚集小体和神经变性疾病中的作用 被引量:1
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作者 方韵 梁中琴 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期303-307,共5页
组蛋白脱乙酰基酶6(HDAC6)是主要存在于胞浆中的微管脱乙酰基酶,在体内参与多种重要的生物学过程。研究表明,错误折叠和聚集的蛋白质组成的聚集小体是神经变性疾病的主要病理特征,聚集小体在早期通过自吞噬作用,对细胞起着保护性作用,而... 组蛋白脱乙酰基酶6(HDAC6)是主要存在于胞浆中的微管脱乙酰基酶,在体内参与多种重要的生物学过程。研究表明,错误折叠和聚集的蛋白质组成的聚集小体是神经变性疾病的主要病理特征,聚集小体在早期通过自吞噬作用,对细胞起着保护性作用,而HDAC6能调节聚集小体的形成并且参与自噬性降解。本文综述了近几年HDAC6参与聚集小体以及神经变性疾病发生发展的研究进展,为神经变性疾病的治疗提供新的研究思路,并为新药研发提供更多的理论依据。 展开更多
关键词 组蛋白脱乙酰基酶6 聚集小体 神经变性疾病 自吞噬作用
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MicroRNA-30a调控Beclin-1对缺氧复氧乳鼠心肌细胞的保护效应 被引量:19
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作者 晏浩 徐建军 +4 位作者 李文林 朱书强 龙翔 车建鹏 陈立如 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期583-588,共6页
目的:观察microRNA-30a(miR-30a)在原代心肌细胞缺氧复氧中的作用,探讨miR-30a保护缺血再灌注心肌的分子机制。方法:重组构建慢病毒miR-30a表达载体(LV-GFP-miR-30a)感染原代乳鼠心肌细胞,构建缺氧复氧损伤模型。实验分为正常培养组、... 目的:观察microRNA-30a(miR-30a)在原代心肌细胞缺氧复氧中的作用,探讨miR-30a保护缺血再灌注心肌的分子机制。方法:重组构建慢病毒miR-30a表达载体(LV-GFP-miR-30a)感染原代乳鼠心肌细胞,构建缺氧复氧损伤模型。实验分为正常培养组、单纯缺氧复氧组、LV-GFP加缺氧复氧组、LV-miR-30a-GFP加缺氧复氧组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)加缺氧复氧组。Real-time PCR检测缺氧复氧和慢病毒感染对miR-30a的表达影响,Western blotting检测LC3和Beclin-1蛋白表达变化,TUNEL和PI染色检测缺氧复氧后心肌细胞死亡情况。结果:(1)缺氧复氧后心肌miR-30a表达水平下调(P<0.05);(2)慢病毒miR-30a表达载体高效感染后心肌细胞miR-30a表达水平上调(P<0.05),心肌过表达miR-30a下调Beclin-1蛋白表达(P<0.05);(3)心肌过表达miR-30a抑制缺氧复氧后Beclin-1表达(P<0.05);3-MA处理减少缺氧复氧后心肌Be-clin-1表达,减少缺氧复氧后LC3-Ⅰ转化为LC3-Ⅱ(P<0.05);(4)过表达miR-30a和3-MA处理减少缺氧复氧后心肌细胞凋亡(P<0.05)。结论:心肌细胞过表达miR-30a显著下调Beclin-1;抑制自噬可以减少缺氧复氧后心肌细胞死亡。 展开更多
关键词 缺血再灌注 细胞凋亡 微小RNA 自吞噬作用
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细胞自噬与肿瘤 被引量:28
9
作者 杜海磊 邱伟华 杨卫平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期401-404,共4页
Autophagy is a vacuolar process of cytoplasmic degradation by lysosome which ubiquitously occurring in all eukaryotic cells. The researches of autophagy have made great progress with the development of the yeast model... Autophagy is a vacuolar process of cytoplasmic degradation by lysosome which ubiquitously occurring in all eukaryotic cells. The researches of autophagy have made great progress with the development of the yeast model and genetic technology. This review will summarize the determination of autophagy,its relationship with apoptosis and its role in the tumor treatment in order to give a comprehensive understanding of the function of autophagy. 展开更多
关键词 自吞噬作用 细胞凋亡 溶酶体 肿瘤 信号转导
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自噬的抑制影响长春新碱诱导的肝癌细胞自噬性凋亡 被引量:14
10
作者 彭心昭 陈英 朴英杰 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期32-34,共3页
目的 研究自噬特异性抑制剂 3 甲基腺嘌呤 (3 methyladenine ,3MA)对长春新碱 (vincristine,VCR)诱导的肝癌细胞系HepG2细胞自噬性凋亡的影响。 方法 利用已建立的VCR诱导HepG2细胞自噬性凋亡之模型 ,采用monodansylcadaverin(MDC)染... 目的 研究自噬特异性抑制剂 3 甲基腺嘌呤 (3 methyladenine ,3MA)对长春新碱 (vincristine,VCR)诱导的肝癌细胞系HepG2细胞自噬性凋亡的影响。 方法 利用已建立的VCR诱导HepG2细胞自噬性凋亡之模型 ,采用monodansylcadaverin(MDC)染色及流式细胞术荧光强度测定方法对自噬进行定量研究 ,采用流式细胞术及DNA电泳检测细胞凋亡。结果  3MA可以特异性地阻止自噬泡形成 ,还可以部分地抑制HepG2细胞自噬性凋亡。 结论 自噬是VCR诱导的HepG2细胞自噬性凋亡所必需的。 展开更多
关键词 长春新碱 诱导 肝癌细胞 自噬性凋亡 自吞噬作用 3-甲基腺嘌呤
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尘粒对巨噬细胞自噬的影响 被引量:10
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作者 王海杰 谭玉珍 +1 位作者 何韬 俞彰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1524-1528,共5页
目的:研究巨噬细胞吞噬尘粒后的自噬变化,探讨尘粒引起巨噬细胞自噬的机理。方法:利用从肺部手术病人切除的支气管肺淋巴结,做石蜡切片和Wilder染色,观察组织结构变化。从大鼠腹膜腔取巨噬细胞,用碳粒处理,观察碳粒对巨噬细胞自噬功能... 目的:研究巨噬细胞吞噬尘粒后的自噬变化,探讨尘粒引起巨噬细胞自噬的机理。方法:利用从肺部手术病人切除的支气管肺淋巴结,做石蜡切片和Wilder染色,观察组织结构变化。从大鼠腹膜腔取巨噬细胞,用碳粒处理,观察碳粒对巨噬细胞自噬功能的影响。将淋巴结和吞噬碳粒后的细胞做超薄切片,观察巨噬细胞内的吞噬体、自噬体和溶酶体的结构和分布。利用透射电镜和TUNEL染色法观察淋巴结尘细胞和吞噬碳粒细胞中的凋亡细胞。结果:在成人淋巴结,巨噬细胞内的尘粒明显沉积,胶原纤维增生,微血管密度增加。在尘细胞和吞噬碳粒细胞内,除含有吞噬体外还含有较多的自噬前体、自噬体和自噬溶酶体。在自噬体内常含有线粒体、尘粒或碳粒。在尘细胞和吞噬碳粒后的细胞中都可见到TUNEL染色阳性细胞。透射电镜下可见凋亡细胞的核固缩或凋亡小体。结论:尘粒沉积可引起巨噬细胞的自噬功能增强,并可出现凋亡。自噬对于巨噬细胞清除尘粒和损伤的线粒体具有重要作用。 展开更多
关键词 自吞噬作用 细胞凋亡 尘粒 巨噬细胞 淋巴结
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紫杉醇诱导子宫颈癌H eLa细胞自噬性凋亡的观察 被引量:5
12
作者 程静 刘飞 +1 位作者 胡琴 吉兆宁 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2010年第3期268-272,共5页
目的观察紫杉醇对体外培养的子宫颈癌HeLa细胞自噬性凋亡的影响,并初步探讨其可能的机制。方法不同浓度(1.2、6、12、24、36 mg/L)的紫杉醇处理体外子宫颈癌HeLa细胞6、12、24、48、72小时后,用MTT法测定其生长抑制率,倒置显微镜及透视... 目的观察紫杉醇对体外培养的子宫颈癌HeLa细胞自噬性凋亡的影响,并初步探讨其可能的机制。方法不同浓度(1.2、6、12、24、36 mg/L)的紫杉醇处理体外子宫颈癌HeLa细胞6、12、24、48、72小时后,用MTT法测定其生长抑制率,倒置显微镜及透视电镜观察细胞形态学变化,通过流式细胞术分别测定细胞凋亡率、细胞周期分布,RT-PCR检测自噬基因Beclin1表达的变化情况。结果紫杉醇呈剂量和时间依赖性抑制子宫颈癌HeLa细胞增殖;紫杉醇12 mg/L处理的HeLa细胞,早期(24小时内)可出现明显的细胞自噬性变化,细胞凋亡数明显增加,G2/M期阻滞,且自噬基因Beclin1的表达明显增高。结论紫杉醇具有抑制子宫颈癌HeLa细胞增殖、诱导细胞自噬性凋亡等作用,诱导子宫颈癌HeLa细胞发生自噬性凋亡,其机制可能与上调自噬基因Beclin1的表达水平有关。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 紫杉醇 自吞噬作用 细胞凋亡 基因 Beclin1 肿瘤细胞 培养的
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RNAi沉默Beclin 1基因对维生素K_3损伤人肝癌细胞SMMC-7721的影响 被引量:3
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作者 杨闯 张宏宇 +2 位作者 孔晓霞 王广义 孙连坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1288-1291,共4页
目的:探讨应用RNAi技术沉默Beclin1基因对维生素(vitamin K3,VitK3)引起的人肝癌SMMC-7721细胞损伤的影响。方法:应用真核细胞转染技术将Psilencer3.1-siRNA-Beclin1重组质粒转入人肝癌SMMC-7721细胞,同时分别设立转染空质粒阴性对照组... 目的:探讨应用RNAi技术沉默Beclin1基因对维生素(vitamin K3,VitK3)引起的人肝癌SMMC-7721细胞损伤的影响。方法:应用真核细胞转染技术将Psilencer3.1-siRNA-Beclin1重组质粒转入人肝癌SMMC-7721细胞,同时分别设立转染空质粒阴性对照组和转染试剂阴性对照。于48h后收集细胞,分别提取细胞总RNA及总蛋白,通过RT-PCR和Western blotting检测Beclin1基因表达。应用40μmol/LVitK3作用Beclin1-siRNA细胞株,Hoechst33342染色检测细胞凋亡率。结果:与对照组相比,siRNA重组质粒明显降低Beclin1 mRNA水平,抑制其蛋白表达。40μmol/LVitK3作用人肝癌SMMC-7721细胞Beclin1 mRNA表达明显高于对照组,细胞凋亡率增加(P<0.01);而Beclin1-siRNA细胞株,Beclin1 mRNA表达显著低于对照组,与40μmol/LVitK3作用组相比细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论:Psilencer3.1-siRNA-Beclin1转染人肝癌SMMC-7721细胞后,可有效抑制Beclin-1 mRNA和蛋白的表达,抑制VitK3引起的Beclin1依赖性细胞自噬信号通路的激活,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 RNA干扰 基因 BECLIN 1 自吞噬作用 细胞凋亡 维生素K3 SMMC-7721细胞
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谷氨酸致原代培养皮层神经元损伤中自噬的激活 被引量:3
14
作者 陈兆耀 陈茂刚 +3 位作者 卢婷婷 倪冠中 刘新峰 徐格林 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期62-66,共5页
目的:体外观察谷氨酸介导的神经元氧化性损伤中自噬的激活,以及抑制自噬对谷氨酸致神经元毒性损伤的保护作用。方法:体外培养皮层神经元,给予谷氨酸以及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤干预,MTT法检测细胞活力,透射电镜观察自噬泡的产生,激光共... 目的:体外观察谷氨酸介导的神经元氧化性损伤中自噬的激活,以及抑制自噬对谷氨酸致神经元毒性损伤的保护作用。方法:体外培养皮层神经元,给予谷氨酸以及自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤干预,MTT法检测细胞活力,透射电镜观察自噬泡的产生,激光共聚焦显微镜观察自噬特异性蛋白LC3的表达。结果:给予谷氨酸干预后皮层神经元细胞存活率下降,自噬体数目明显增加,自噬标志性蛋白LC3表达增加。给予3-甲基腺嘌呤后,神经元细胞存活率增加,细胞自噬水平下降。结论:谷氨酸诱导的神经元毒性损伤中存在自噬相关性细胞死亡,抑制自噬可能对谷氨酸毒性损伤有抑制作用,自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤具有一定的神经保护作用。 展开更多
关键词 自吞噬作用 3-甲基腺嘌呤 神经元 谷氨酸
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PM_(2.5)对大鼠气管上皮细胞氧化应激及自噬的影响 被引量:7
15
作者 李东繁 杜旭升 刘安 《陕西医学杂志》 CAS 2017年第1期3-4,12,共3页
目的:探讨PM_(2.5)对RTE大鼠气管上皮细胞的氧化应激及自噬的影响。方法:采集制备不同浓度的PM_(2.5)来处理RTE细胞,用MTT比色法测定细胞增值率,流式细胞术检测细胞内活性氧类(ROS)自由基生成,Western Blot检测微管相关蛋白1轻链3I蛋白(... 目的:探讨PM_(2.5)对RTE大鼠气管上皮细胞的氧化应激及自噬的影响。方法:采集制备不同浓度的PM_(2.5)来处理RTE细胞,用MTT比色法测定细胞增值率,流式细胞术检测细胞内活性氧类(ROS)自由基生成,Western Blot检测微管相关蛋白1轻链3I蛋白(LC3I)和LC3II表达。结果:PM_(2.5)100mg/L和200mg/L处理后细胞存活率均明显降低,并呈浓度和时间依赖性。不同浓度PM_(2.5)可升高胞内ROS水平及增加LC3II蛋白表达,亦呈浓度和时间依赖性。结论:PM_(2.5)通过诱发氧化应激及自噬对气道上皮起到损害作用,其中氧化应激促进细胞过度自噬的发生。 展开更多
关键词 上皮细胞/生理学 氧化性应激 自吞噬作用 @PM2. 5
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丙戊酸诱导胶质瘤细胞自噬及其机制研究 被引量:3
16
作者 付军 邵翠杰 +1 位作者 陈芙蓉 陈忠平 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2008年第5期460-464,共5页
目的对丙戊酸诱导胶质瘤细胞发生自噬性死亡的过程进行观察,并初步探讨其可能的机制。方法丙戊酸处理人脑胶质瘤细胞系U87、T98G和SF295,台盼蓝染色检测细胞活性并计算细胞存活率;流式细胞仪测定细胞周期,透射电子显微镜和荧光测定仪观... 目的对丙戊酸诱导胶质瘤细胞发生自噬性死亡的过程进行观察,并初步探讨其可能的机制。方法丙戊酸处理人脑胶质瘤细胞系U87、T98G和SF295,台盼蓝染色检测细胞活性并计算细胞存活率;流式细胞仪测定细胞周期,透射电子显微镜和荧光测定仪观察细胞超微结构及自噬水平,West-ern blotting检测经丙戊酸处理后细胞内LC3-Ⅱ、Beclin-1、p-Akt和p-p70S6K等蛋白质的表达水平。结果经不同浓度丙戊酸处理后,人脑胶质瘤细胞系U87、T98G和SF295细胞活性明显受到抑制,其胶质瘤细胞半数抑制浓度分别为(2.45±0.32)、(4.78±0.62)和(6.62±0.95)mmol/L,其中丙戊酸对人脑胶质瘤细胞系U87具有较明显的杀伤作用(P<0.05)。透射电子显微镜观察可见人脑胶质瘤细胞系U87细胞胞质内有大量自噬体和自噬溶酶体,其自噬水平随丙戊酸浓度的升高而逐渐增强。经丙戊酸处理后,人脑胶质瘤细胞系U87细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和Beclin-1表达水平明显升高,而p-Akt和p-p70S6K表达水平明显降低。结论丙戊酸可诱导胶质瘤细胞发生自噬,其诱导胶质瘤细胞发生自噬的机制可能与阻断Akt信号转导通路有关。 展开更多
关键词 丙戊酸 细胞 自吞噬作用 神经胶质瘤
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子宫内膜癌发生过程中自噬活性改变的初步探讨 被引量:12
17
作者 钱学茜 万小云 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2008年第7期517-519,共3页
目的:探讨正常子宫内膜、子宫内膜增生以及子宫内膜腺癌中自噬活性的变化。方法:收集2004年1月至2005年3月行子宫切除或诊断性刮宫的组织标本135例,其中正常子宫内膜43例,子宫内膜单纯性增生及复合性增生27例,子宫内膜不典型增生26例,... 目的:探讨正常子宫内膜、子宫内膜增生以及子宫内膜腺癌中自噬活性的变化。方法:收集2004年1月至2005年3月行子宫切除或诊断性刮宫的组织标本135例,其中正常子宫内膜43例,子宫内膜单纯性增生及复合性增生27例,子宫内膜不典型增生26例,子宫内膜腺癌39例。用免疫组化法检测全部组织中的Cathepsin-D和Rab7的表达。结果:(1)Cathepsin-D表达在正常子宫内膜增生期明显高于分泌期(0.244±0.091 vs 0.141±0.071,P<0.05);Rab7表达呈同一趋势(0.197±0.084 vs 0.114±0.060,P<0.05);(2)子宫内膜单纯性、复合性增生组的Cathepsin-D表达明显高于子宫内膜不典型增生组,子宫内膜腺癌细胞中Cathepsin-D表达则明显减弱(0.561±0.168 vs0.311±0.089 vs 0.055±0.044,P<0.001);Rab7的表达呈现与Cathepsin-D同一趋势(0.508±0.152 vs 0.281±0.076 vs 0.026±0.019,P<0.001)。结论:正常增生期子宫内膜细胞的自噬活性比分泌期子宫内膜细胞明显增强,子宫内膜增生的自噬活性比正常子宫内膜强,而子宫内膜腺癌细胞自噬活性明显减弱,提示自噬活性的改变可能参与了子宫内膜样腺癌的发生。 展开更多
关键词 子宫内膜 子宫内膜肿瘤 自吞噬作用 组织蛋白酶D
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姜黄素抑制K562细胞增殖的机制 被引量:1
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作者 潘红宁 侍杏华 +2 位作者 高薇 郑丹 朱慧 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第41期95-96,共2页
用不同浓度的姜黄素处理人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞,采用MTT法测定姜黄素对K562细胞增殖的抑制作用,应用MDC荧光染色观察自噬的发生,免疫组化法观察自噬特异性蛋白LC3的表达,流式细胞仪观察细胞线粒体膜电位变化。发现姜黄素可... 用不同浓度的姜黄素处理人慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞,采用MTT法测定姜黄素对K562细胞增殖的抑制作用,应用MDC荧光染色观察自噬的发生,免疫组化法观察自噬特异性蛋白LC3的表达,流式细胞仪观察细胞线粒体膜电位变化。发现姜黄素可显著抑制K562生长,且此作用呈明显的时间剂量依赖性和一定的剂量依赖性;姜黄素给药后3 h可诱导K562细胞发生自噬。认为自噬特异性蛋白LC3表达增加和细胞线粒体膜电位下降可能是姜黄素诱导K562细胞自噬的重要途径。 展开更多
关键词 姜黄素 白血病 自吞噬作用 微管相关蛋白质类 线粒体
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脑损伤中的自噬现象 被引量:4
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作者 汤宏 刘家传 《中国微侵袭神经外科杂志》 CAS 北大核心 2009年第11期526-528,共3页
自噬(autophagy)是细胞的一种高度保守降解途径,其将细胞内无用的大分子(如长寿命蛋白质、细胞器等)运送至溶酶体,降解成有生物活性的小分子,并将这些小分子重新利用,以维持细胞内环境稳定。脑损伤早期,神经元和星形胶质细胞的自噬作用... 自噬(autophagy)是细胞的一种高度保守降解途径,其将细胞内无用的大分子(如长寿命蛋白质、细胞器等)运送至溶酶体,降解成有生物活性的小分子,并将这些小分子重新利用,以维持细胞内环境稳定。脑损伤早期,神经元和星形胶质细胞的自噬作用明显增强。本文对自噬的定义、分类、形态学特征、分子基础、检测及与脑损伤的相关进展等进行概述,为临床治疗脑损伤提供理论基础。 展开更多
关键词 自吞噬作用 脑损伤 溶酶体 自噬基因 BECLIN 1基因 微管相关蛋白质类
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3-甲基腺嘌呤对Aβ(25-35)引起的海马神经元凋亡的影响 被引量:1
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作者 郭燕君 徐营 +3 位作者 沈忠飞 曾宪智 郭连军 叶先才 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1736-1740,共5页
目的:探讨阿尔茨海默病(AD)大鼠海马神经元自噬对凋亡的影响。方法:SD大鼠随机分成模型组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理组和对照组。模型组大鼠用立体定位技术对海马CA1区微量注射Aβ(25-35)造成AD模型;3-MA预处理组大鼠在注射A... 目的:探讨阿尔茨海默病(AD)大鼠海马神经元自噬对凋亡的影响。方法:SD大鼠随机分成模型组、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理组和对照组。模型组大鼠用立体定位技术对海马CA1区微量注射Aβ(25-35)造成AD模型;3-MA预处理组大鼠在注射Aβ(25-35)之前对海马CA1区微量注射3-MA。Morris水迷宫检测大鼠记忆水平;行为学测试后,观察海马神经元超微结构变化、自噬泡的形成、beclin-1的表达以及细胞凋亡情况。结果:3-MA预处理组与模型组比较,大鼠学习记忆能力显著下降(P<0.05),海马神经元凋亡率显著增加(P<0.05),而beclin-1的表达量减少;模型组海马神经元可见双层膜包裹形成的自噬泡,神经元破坏程度明显轻于3-MA预处理组。结论:抑制神经元自噬水平增加神经元凋亡;诱导神经元自噬可能是防治阿尔茨海默病的一个潜在方法。 展开更多
关键词 自吞噬作用 阿尔茨海默病 海马 神经元 细胞凋亡 Β淀粉样肽
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