细胞自噬调控宫颈癌发生和发展的研究进展

自噬指细胞利用溶酶体分解细胞内老化的细胞器和不正确折叠的蛋白质等,再利用降解物质和细胞内的有害物质,为细胞提供所需能量。正常情况下,自噬水平较低,但当细胞遭受损害时,自噬机制被触发。自噬相关蛋白,如自噬效应蛋白1(Beclin1)、微管相关蛋白轻链3(LC3)和泛素结合蛋白(p62)等,在宫颈癌中的表达受到抑制,这在宫颈癌的形成和进展中发挥了关键作用。本文就自噬调控宫颈癌的发生和发展展开综述,为宫颈癌治疗提供新的靶点。

心衰宁合剂对慢性心力衰竭大鼠心肌自噬相关蛋白表达的影响

目的探讨心衰宁合剂(XSNM)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌自噬效应蛋白(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链(LC)3-Ⅱ表达的影响。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照(卡托普利组,10 mg/kg),XSNM低、中、高剂量组(15.6、31.2、62.4 g/kg),采用阿霉素(ADR,2.5 mg/kg)腹腔注射复制CHF大鼠模型,空白组注射等量生理盐水,每周1次,造模6 w。模型复制结束后各组按剂量灌胃,空白组及模型组灌胃生理盐水,灌胃4 w。采用超声心动图检测大鼠心功能;苏木素-伊红(HE)及Masson染色观察大鼠心肌病理学变化情况;透射电镜观察大鼠心肌组织超微结构;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肌酸激酶同工酶(CK)-MB含量;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、Western印迹检测大鼠心肌Beclin1、LC3-Ⅱ基因及蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)均显著增加(P<0.01),左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短分率(LVFS)显著降低(P<0.01),血清CK-MB明显升高(P<0.01),Beclin1、LC3-Ⅱ基因及蛋白表达较空白组明显升高(P<0.01);与模型组比较,XSNM各剂量组和卡托普利组LVEDD、LVESD均降低,LVEF、LVFS均升高,除XSNM低剂量组LVEDD外,差异均有统计学意义(P<0.01),XSNM显著降低血清CK-MB水平(P<0.01),XSNM各剂量组均降低Beclin1、LC3-Ⅱ基因及蛋白表达水平(P<0.01)。电镜结果显示模型组亚细胞结构损伤较重,XSNM有一定的改善作用,自噬小体数量有减少。结论XSNM可以改善CHF大鼠心脏功能,降低血清CK-MB含量,其机制可能与调节心肌细胞自噬有关。

细胞自噬在激素性股骨头缺血坏死大鼠发病中的作用

目的 探索细胞自噬在激素性股骨头缺血坏死(SANFH)大鼠发病机制中的作用。方法 24只无特定病原体(SPF级)SD大鼠(雄鼠各半),随机抽样分为:正常(C)组、模型(T1)组、自噬阻断(T2)组、自噬激动(T3)组,每组雌、雄各3只。C组给予生理盐水,T1、T2、T3组分别给予甲泼尼龙、甲泼尼龙+3-甲基腺嘌呤(MA)、甲泼尼龙+雷帕霉素。8 w后处死,取后肢股骨头并测量坏死面积,采用免疫组化、Western印迹检测坏死股骨头组织中微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/Ⅰ、自噬效应蛋白(Beclin)1及p62蛋白的表达情况。结果 T1、T2、T3组经甲泼尼龙干预8 w后,至少一侧股骨头坏死率分别为83.33%、16.67%、100.00%,T1、T2、T3组与C组比较均具有统计学差异(均P<0.05),且T1组、T3组股骨头坏死面积均显著大于C组和T2组(均P<0.05)。免疫组化染色和Western印迹检测LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1、p62蛋白结果显示,T1、T3组股骨头组织中LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1的表达量显著高于C组、T2组(均P<0.05),但p62在C组、T2组中表达量明显较低(均P<0.05)。结论 短期、大剂量激素能诱导股骨头发生坏死,其作用机制可能与激素诱发骨组织细胞自噬活性增强,进而导致细胞出现过度自噬性死亡有关。

活血解毒中药配伍抑制心肌细胞自噬改善大鼠冠脉无复流的作用机制研究

目的探讨活血解毒中药配伍改善大鼠冠脉无复流所致心肌损伤的作用机制。方法选择96只8~10周龄SPF级雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组、冠脉无复流模型组、阳性药对照组、活血解毒中药低、中、高剂量组。假手术组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,阳性药物组给予等体积阿司匹林灌胃,活血解毒中药低、中、高剂量组给予相应剂量的中药灌胃。干预14天后结扎大鼠冠状动脉左前降支4小时,再灌注8小时,建立冠脉无复流心肌损伤模型。腹主动脉取血,测定血清肌酸激酶同工酶-MB(creatine kinase-MB,CK-MB)和肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)的含量;硝基四氮唑蓝染色测量心肌梗死面积、硫磺素S染色测量心肌无复流面积;Q-PCR和Western blot检测心肌组织中微管相关蛋白轻链3(microtubule associated protein light chain 3,LC3)、自噬效应蛋白Beclin-1、B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl 2)基因和蛋白的表达。结果与模型组相比,活血解毒中药低、中、高剂量组大鼠血清CK-MB、心肌梗死面积、心肌无复流面积均显著减少(P<0.01);活血解毒中药低、中、高剂量组大鼠心肌组织中自噬相关基因及蛋白LC3、Beclin-1表达显著降低(P<0.01)、Bcl2表达显著增加(P<0.01)。结论活血解毒中药配伍能够减轻大鼠冠脉无复流导致的心肌损伤,其机制与抑制心肌细胞的过度自噬有关。

依达拉奉对间歇低氧损伤后大鼠脑组织自噬及凋亡的影响

目的探讨依达拉奉对间歇低氧损伤后大鼠脑组织自噬及凋亡的影响。方法采用随机数字表法将96只Wistar大鼠分为对照组、5%间歇低氧(IH)组及依达拉奉(ED)组,每组又分为1 d、3 d、7 d、14 d 4个时间点,每个时间大鼠8只。透射电镜观察大鼠海马CA1区神经细胞的超微结构;免疫组织化学法观察大鼠神经细胞自噬效应蛋白(beclin)-1、微管相关蛋白1轻链(LC)3-Ⅱ蛋白的表达;原位末端标记法记录大鼠神经细胞的凋亡情况。结果电镜下对照组神经细胞形态正常,染色质均匀,线粒体、高尔基体等细胞器结构正常;与对照组比较,5%IH组从间歇低氧损伤3 d开始逐渐出现神经元变形肿胀,核膜模糊,染色质密度欠均匀,线粒体空泡化、嵴出现断裂,激活溶酶体,出现自噬小体,随着低氧时间的延长,损伤越重;与5%IH组比较,ED组各个时间点神经元超微结构损伤减轻,自噬小体数目增多。对照组神经细胞beclin-1、LC3-Ⅱ的表达较少,各个时间点差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,5%IH组及ED组各个时间点beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白的表达显著增多(P<0.05);与5%IH组比较,ED组各个时间点beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白的表达显著增多(P<0.05)。对照组神经细胞凋亡较少,各个时间点细胞凋亡指数无差异(P>0.05);与对照组比较,5%IH组及ED组各个时间点细凋亡指数显著增加(P>0.05);与5%IH组比较,ED组各个时间点凋亡指数显著下降(P>0.05)。结论依达拉奉可提高早期间歇低氧大鼠神经细胞的自噬水平,进而减少神经细胞的凋亡,发挥神经保护作用。