自噬相关基因Beclin-1在间歇期痛风性关节炎患者外周血单个核细胞中的表达变化及意义

目的探讨自噬相关基因Beclin-1在间歇期痛风性关节炎(IGA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达变化及意义。方法采集40例间歇期IGA男性患者(IGA组)、80例体检健康男性(正常对照组)外周静脉血,分离PBMC并进行培养。用实时荧光定量PCR、Western blotting技术分别检测PBMC中Beclin-1 mRNA、蛋白表达。随机抽取5例IGA患者外周静脉血20 m L,分为未刺激组及尿酸盐晶体(MSU)刺激1、3、6 h组并提取其PBMC,用Western blotting技术检测PBMC中Beclin-1蛋白表达。随机抽取5例IGA患者、5例体检健康者外周静脉血20 m L,将血液标本均随机分为空白对照组、雷帕霉素组、自噬抑制剂组。空白对照组不做干预,其他各组均加入相应试剂进行干预并提取PBMC,用Western blotting技术检测PBMC中Beclin-1蛋白表达;用酶联免疫吸附试验测定干预后IGA患者血浆IL-1β水平。结果与正常对照组比较,IGA组PBMC中Beclin-1 mRNA、蛋白相对表达量低(P均<0. 05)。MSU刺激1、3 h组PBMC中Beclin-1蛋白相对表达量较未刺激组高(P均<0. 05),而MSU刺激6 h组Beclin-1蛋白相对表达量较未刺激组低(P <0. 05)。IGA患者PBMC中Beclin-1蛋白相对表达量比较:雷帕霉素组较空白对照组低(P <0. 01),且自噬抑制剂组最高(P均<0. 05),恢复至空白对照组水平;体检健康者PBMC中Beclin-1蛋白相对表达量比较:空白对照组、MSU组、雷帕霉素组比较差异无统计学意义(P均> 0. 05),而自噬抑制剂组较其他组低(P均<0. 05)。IGA患者血浆IL-1β水平比较,MSU、雷帕霉素组较空白对照组高(P均<0. 05),雷帕霉素组较MSU组低(P <0. 05),自噬抑制剂组较空白对照组、MSU组高(P均<0. 05),自噬抑制剂组之间比较差异无统计学意义(P均> 0. 05)。结论自噬相关基因Beclin-1在间歇期IGA患者外周血PBMC中呈低表达,其可能在IGA发展过程中参与自噬途径并最终被自噬溶酶体降解。

细胞缝隙连接蛋白43、自噬相关基因Beclin-1表达水平与甲状腺癌患者TNM分期的相关性研究

目的探究细胞缝隙连接蛋白43(Cx43)、自噬相关基因Beclin-1表达水平与甲状腺癌患者TNM分期的相关性。方法选取2011年5月至2017年4月许昌市人民医院术后确诊的125例甲状腺癌患者,68例甲状腺良性疾病患者,因其他原因进行手术或甲状腺活检的42例甲状腺组织正常者,均行Cx43、Beclin-1免疫组化染色检测。比较不同甲状腺组织中Cx43、Beclin-1表达水平,并分析Cx43、Beclin-1表达水平与甲状腺癌患者TNM分期的相关性。结果甲状腺癌组织中Cx43、Beclin-1阳性表达率低于甲状腺良性病变组织、正常甲状腺组织,差异有统计学意义(P <0. 05)。甲状腺癌患者TNMⅠ+Ⅱ期Cx43阳性表达率高于Ⅲ+Ⅳ期,差异有统计学意义(P <0. 05)。Cx43与甲状腺癌患者TNM分期呈负相关(P <0. 05);自噬相关基因Beclin-1与甲状腺癌患者TNM分期无关(P> 0. 05)。结论 Cx43表达与甲状腺癌患者TNM分期呈负相关,自噬相关基因Beclin-1与甲状腺癌患者TNM分期无关。

自噬相关基因Beclin-1的克隆及原核表达载体的构建

目的克隆并构建自噬相关基因Beclin-1原核表达载体。方法根据Beclin-1鳊码区DNA序列设计引物，用前列腺癌细胞LNCaP作为模板进行RT—PCR，扩增Beclin-1编码区全基因片段，与pQE-80质粒连接后进行潮序鉴定。结果RT—PCR扩增出Beclin-1目的基因，限制性内切酶证实其已插入表达质粒中，DNA测序证实Beclin-1鳊码区全基因片段与GenBank公布的相应基因核苷酸序列的同源性为完全一致。结论成功克隆并构建了自噬相关基因Beclin-1原核表达载体，为研究Beclin-1蛋白的细胞自噬作用奠定了基础。

甲状腺癌组织自噬相关基因Beclin-1和LC3的蛋白表达及其临床病理学意义

目的探讨甲状腺癌中自噬相关基因Beclin-1和LC3的表达及意义。方法收集2013-2016年威海市市立医院甲状腺外科手术切除的甲状腺癌63例标本,以距肿瘤边缘5cm以上的组织定义为配对癌旁组织,并收集同期住院的甲状腺腺瘤(42例)和结节性甲状腺肿组织标本(31例)。采用免疫组织化学SP法检测上述标本中Beclin-1和LC3的表达情况及两者之间的相关性。结果各组织Beclin-1蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。甲状腺癌中Beclin-1的阳性表达率(39.68%,25/63)明显低于甲状腺腺瘤(69.05%,29/42)、结节性甲状腺肿(83.87%,26/31)和癌旁正常组织中(85.71%,54/63)的阳性表达率(P<0.05)。LC3蛋白在甲状腺癌的阳性表达率为25.40%(16/63),在甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、癌旁正常组织中的阳性表达率分别为40.48%(17/42)、38.72%(12/31)、42.86%(27/63)。在甲状腺癌中LC3表达低于以上正常的3种组织。4者比较LC3的表达差异有统计学意义(P<0.05)。Beclin-1蛋白的表达与颈部淋巴结转移有关(χ~2=8.433,P=0.000)。经Spearman相关性检验分析,在甲状腺癌中LC3与Beclin-1蛋白成正相关(r=0.272,P=0.031)。结论 Beclin-1、LC3在甲状腺癌中低表达,在甲状腺癌中Beclin-1与LC3的表达量呈正相关。

自噬相关基因微管相关蛋白1A/1B轻链3B在结肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨自噬相关基因微管相关蛋白1A/1B轻链3B(MAP1LC3B)在结肠癌中的表达及临床意义。方法:采用癌症基因组图谱(TCGA)数据库中提供的临床和RNA-seq数据,以预测MAP1LC3B水平与结肠癌的关系。再利用免疫组织化学染色(IHC)、Western印迹等技术对人群样本(结肠癌组织40例,癌旁组织20例)中MAP1LC3B表达情况进行检测,验证其表达情况与临床病理参数包括肝转移与否、淋巴结转移与否及组织分化等的关系。结果:MAP1LC3B在结肠癌组织中的表达阳性率为72.5%,明显高于癌旁组织组,差异具有统计学意义(P=0.001);在MAP1LC3B阳性组中,21例(72.41%)合并肝转移(P=0.001),且患者的TNM分期多为Ⅴ期患者,占79.31%,与MAP1LC3B阴性组比较差异具有统计学意义(P=0.001),但MAP1LC3B的表达与结肠癌组织的分化程度(P=0.056)和淋巴结转移情况比较,差异无统计学意义(P=0.265)。与TCGA数据库等分析结果有所差异,但Kaplan-Meier生存分析表明,MAP1LC3B高表达与预后不良显著相关,差异有统计学意义(P<0.01),且MAP1LC3B表达水平与CD8+T细胞的功能最为密切。结论:自噬相关基因MAP1LC3B在结肠癌组织中异常表达,并参与介导了肿瘤的恶性生物学行为,影响患者预后。

LC-3、Beclin-1和P62表达与非小细胞肺癌临床病理特征的相关性

目的 探讨微管相关蛋白1轻链3(LC-3)、自噬调控因子Beclin-1和P62表达与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理特征的相关性。方法 回顾性分析93例NSCLC患者资料,比较癌组织和癌旁组织LC-3、Beclin-1和P62表达情况;比较LC-3、Beclin-1和P62不同表达情况患者临床病理特征差异。结果 癌组织LC-3、Beclin-1阳性率低于癌旁组织,P62表达阳性率高于癌旁组织(P<0.05)。LC-3、Beclin-1和P62不同表达情况患者肺癌病理类型、TNM分期以及分化程度差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 LC-3、Beclin-1和P62表达情况与NSCLC患者病理类型、TNM分期以及分化程度有密切联系。LC-3、Beclin-1表达降低及P62表达升高与肺癌的发生发展相关,可作为NSCLC患者早期评估的辅助指标。

中药调控Beclin-1基因干预自噬治疗类风湿性关节炎的研究进展

类风湿性关节炎是一种难以治愈的自身免疫性疾病,其病因复杂,基本的病理表现为软骨的破坏、血管翳的生成等。有效治疗和预防类风湿性关节炎的发生及提高患者的生活质量是亟待解决的问题。现阶段临床治疗方法存在着用药量大,毒副作用强等弊端,近年来,以精准调控为优势并基于Beclin-1为代表的基因调节自噬和线粒体从而治疗类风湿性关节炎的研究不断发展,目前受到国内外专家学者的关注,具有广阔的发展前景。本文系统阐述在治疗类风湿性关节炎中Beclin-1、自噬和线粒体的相关联性,并发现中药在调节Beclin-1、自噬和线粒体治疗类风湿性关节炎的巨大潜力,因此对中药调控Beclin-1干预自噬治疗类风湿性关节炎进行系统性综述,并为该领域提供一定的科学参考。

自噬相关基因16 L1与相关性疾病的研究进展

细胞自噬广泛存在于人体合成代谢和分解代谢的过程中,自噬相关基因16 L1(ATG16L1)位于2号染色体(2q37.1)的长臂上,是自噬过程中必不可少的大型蛋白质复合物的重要组成部分。研究发现,ATG16L1与炎症性肠病、细菌感染、肿瘤等的发生密切相关。现对ATG16L1与相关疾病的研究进展作一综述,从遗传方面揭示疾病的诱因并充分与自噬途径相结合,从新的角度为疾病的诊断及治疗提供了新的思路。

Beclin-1联合Cx43对甲状腺癌的诊断价值及与甲状腺细针穿刺诊断准确率对比

目的 探讨自噬相关基因Beclin-1联合细胞缝隙连接蛋白43(Cx43)对甲状腺癌的诊断价值,并分析两者联合与甲状腺细针穿刺诊断对甲状腺癌准确率差异。方法 选取医院2020年10月至2023年10月收治的80例甲状腺癌患者作为观察组,另取同期收治的80例甲状腺结节患者作为对照组,取所有患者术后病理组织进行免疫组化染色,qRT-PCR仪进行检测与扩增,采用2-△△α法计算Beclin-1、Cx43的相对表达量,并将两组患者Beclin-1、Cx43水平进行对比。采用Spearman相关分析法分析Beclin-1、Cx43和甲状腺癌的相关性,并使用受试者工作特征(ROC)曲线分析Beclin-1联合Cx43诊断甲状腺癌的效果,并对比两者联合与甲状腺细针穿刺对甲状腺癌的诊断价值。结果 经免疫组化结果显示,两组细胞质内均检测到Beclin-1、Cx43,且观察组的Beclin-1、Cx43相对表达量比对照组更少(P<0.05),而Beclin-1、Cx43阳性率也同样小于对照组(P<0.05);Spearman相关分析结果显示,Beclin-1、Cx43和甲状腺癌呈现负相关(P<0.05);Beclin-1对甲状腺癌的诊断曲线下面积为0.822,最佳阈值为13.52;Cx43诊断甲状腺癌的曲线下面积为0.875,最佳阈值为18.67,两者联合的曲线下面积为0.932;Beclin-1联合Cx43对甲状腺癌的诊断灵敏度与特异度明显高于单一指标(P<0.05);Beclin-1联合Cx43对甲状腺癌的诊断准确率为93.75%,甲状腺细针穿刺对甲状腺癌的诊断准确率为98.75%,两者对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论Beclin-1联合Cx43对甲状腺癌的诊断灵敏度与特异度较高,且两者联合与甲状腺细针穿刺诊断甲状腺癌准确率对比并无显著差异,可考虑将Beclin-1、Cx43两者作为甲状腺癌诊断及预后判断的重要标志物。

自噬相关蛋白ATG5/BECLIN-1调控细胞自噬和凋亡的分子机理研究进展

ATG5和BECLIN-1(酵母ATG6同源物)是自噬体形成过程中所必需的两种自噬相关蛋白质,它们除了促进自噬体的形成,还能诱导细胞凋亡的发生,被认为是调控细胞自噬和凋亡的分子开关蛋白。前期研究揭示ATG5通过组成泛素化系统ATG5-ATG12-ATG16L介导自噬体的形成,而BECLIN-1通过组成磷脂酰肌醇3-激酶(PtdIns3KC3)复合体诱导细胞自噬,现在认为ATG5的氨基端截短分子tATG5-N和BECLIN-1的羧基端截短分子BECLIN-1-C能诱导细胞凋亡。本研究对近年来ATG5和BECLIN-1调控细胞自噬和凋亡的研究进展作一综述,为研究ATG5/BECLIN-1调控细胞自噬和凋亡的分子机理奠定基础。

微管相关蛋白1轻链3及Beclin-1在硅沉着病大鼠肺泡巨噬细胞中的表达

目的观察自噬相关蛋白——微管相关蛋白1轻链3(LC-3)、Beclin-1在硅沉着病大鼠肺泡巨噬细胞中的表达,从细胞自噬角度探讨硅沉着病形成的分子机制。方法 50只成年雄性SD大鼠随机分为2组(n=25):对照组和硅沉着病模型组,每组再分5个时相组。采用非暴露气管灌注二氧化硅(SiO2)粉尘混悬液法(50g/L)建立大鼠硅沉着病模型。分别于造模后1、3、7、14及28 d分批处死5只大鼠,进行原位支气管肺泡灌洗,获取肺泡巨噬细胞,进行培养纯化和富集后用于后续研究。HE染色及透射电子显微镜观察肺泡巨噬细胞形态学改变;免疫细胞化学法检测LC-3、Beclin-1的表达及分布;免疫印迹法检测LC-3、Beclin-1的蛋白表达量。结果与对照组相比模型组肺泡巨噬细胞体积较大,胞质丰富,部分细胞内可见硅沉着吞噬颗粒,电镜下可见自噬体形成;模型组LC-3、Beclin-1在各时间点的表达较对照组均增多(P<0.05),1 d即开始增多,随着时间的延长表达逐渐增多,至14 d时达高峰(P<0.05),28d时回落,但仍高于对照组的表达。结论在硅沉着病大鼠肺泡巨噬细胞中有自噬的激活,肺泡巨噬细胞自噬参与了大鼠硅沉着病的病理进程。

自噬相关基因Beclin1和MAPLC3在急性白血病骨髓单个核细胞中的表达及其意义

本研究旨在检测人急性白血病(AL)骨髓单个核细胞中自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白质轻链3(MAPLC3)的表达,并探讨其意义。采用透射电子显微镜(TEM)和RT-PCR方法检测初治、复发难治、完全缓解(CR)的急性白血病患者和正常人骨髓单个核细胞(BMMNC)中的自噬活性以及Beclin1、MAPLC3mRNA的表达。结果表明:急性白血病初治组骨髓单个核细胞自噬活性、Beclin1和MAPLC3mRNA表达分别为80%、0.68±0.18、0.24±0.06;在难治复发组分别为100%、0.79±0.09、0.30±0.07;在完全缓解组分别为40%、0.52±0.15、0.16±0.04;在正常对照组分别为20%、0.57±0.13、0.16±0.05。初治组和难治复发组自噬活性和Beclin1、MAPLC3mRNA的相对表达量均高于正常对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。完全缓解组和正常对照组之间比较差异无统计学意义(p>0.05)。结论 :初治组急性白血病骨髓单个核细胞中自噬活性和自噬相关基因Beclin1、MAPLC3mRNA的表达均上调,在难治复发组自噬活性和自噬相关基因Beclin1、MAPLC3mRNA的表达上调尤为明显,这可能与急性白血病的发生、发展及其耐药相关。

Beclin-1基因shRNA慢病毒载体的构建及其对B16F10细胞自噬及活力的影响

利用RNA干扰技术构建稳定沉默Beclin-l基因的B16F10小鼠黑色素瘤细胞系,分析稳转细胞系的自噬水平和活力,为探讨Beclin-1基因、自噬与肿瘤三者关系奠定基础。构建小鼠Beclin-l基因干扰载体,转染至293T细胞,获得慢病毒颗粒,将病毒颗粒感染B16F10细胞,通过加压筛选、有限稀释、细胞驯化得到稳定转染m-Beclin-1-shRNA1的B16F10细胞系。采用RT-PCR和免疫荧光技术检测对Beclin-l的干扰效果,Western blot和透射电镜分析稳转细胞系中自噬标志物LC3蛋白表达及自噬小体形成情况,CCK-8法检测稳转细胞系的活力。结果表明,成功构建了靶向抑制Beclin-l基因表达的shRNA,纯化的慢病毒滴度为1×10^(8) TU·mL^(-1),建立的细胞系中Beclin-1 mRNA和蛋白表达都受到不同程度的抑制,mRNA的沉默效率约为75%(P<0.01),发现干预Beclin-1表达能够抑制LC3-Ⅱ蛋白的表达及自噬小体的形成数量,降低B16F10细胞活力。以上结果表明,干扰Beclin-1表达能够有效降低B16F10细胞自噬活性,促进B16F10细胞死亡,这为探讨Beclin-1基因功能及自噬在抗肿瘤中的作用奠定重要基础。

过表达或抑制肿瘤相关巨噬细胞B7-H1基因对卵巢癌增殖侵袭的机制研究

目的:探讨过表达或抑制肿瘤相关巨噬细胞(TAM)B7-H1基因对卵巢癌增殖侵袭的影响及机制。方法:在体外刺激人单核THP-1细胞成为巨噬细胞,并诱导为TAM,通过腺病毒载体系统过表达(Ad-B7-H1)或抑制(Ad-si B7-H1)TAM中的B7-H1基因,通过Western blot检测转染后的TAM中的B7-H1表达;单独培养(Alone组)与过表达(si B7-H1-TAM组)或抑制(B7-H1-TAM组)B7-H1基因的TAM共培养后,CCK8法检测CAOV3细胞的活力。Transwell小室检测细胞的迁移能力;Western blot检测Ki67、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、磷酸化的蛋白酪氨酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化的信号转导与转录因子3(p-STAT3)。结果:Ad-si B7-H1组B7-H1的表达显著低于对照组,Ad-B7-H1组B7-H1的表达显著高于对照组(P<0.05);与单独培养组比较,TAM组细胞活力、细胞侵袭能力及Ki67、MMP-2、MMP-9、p-JAK2和p-STAT3的蛋白表达均显著升高(P<0.05),与RFP-TAM组比较,si B7-H1-TAM组的细胞活力、细胞侵袭能力及Ki67、MMP-2、MMP-9、pJAK2和p-STAT3的蛋白表达均显著降低,B7-H1-TAM组的细胞活力、细胞侵袭能力及Ki67、MMP-2、MMP-9、p-JAK2和pSTAT3的蛋白表达均显著升高(P<0.05)。结论:抑制肿瘤相关巨噬细胞B7-H1基因可抑制卵巢癌细胞活力及侵袭能力,下调JAK2/STAT3信号通路,过表达B7-H1基因反之。

自噬基因Beclin-1在急性淋巴细胞白血病中的表达及其意义

目的观察自噬基因Beclin-1在急性淋巴细胞白血病中的表达及其意义。方法选取2008年3月—2011年3月我院收治的急性淋巴细胞白血病76例作为试验组,同时选取健康人76例作为对照组,采用免疫组化技术检测两组外周血中有核细胞中Beclin-1的阳性表达率,并比较试验组中男性与女性及急性淋巴细胞白血病L1型与L2型Beclin-1阳性表达率的差异。结果试验组Beclin-1阳性表达率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组中男性与女性及急性淋巴细胞白血病L1型与L2型Beclin-1阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在急性淋巴细胞白血病患者外周血的有核细胞中自噬基因Beclin-1的阳性表达率要低于正常健康人群。

自噬相关基因Beclin1在外阴鳞癌中的表达及临床意义

目的:探讨自噬相关基因Beclin1在外阴鳞癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学的方法检测Beclin1蛋白在50例外阴鳞癌、30例外阴上皮内瘤变及10例正常外阴组织中的表达情况,RT-PCR的方法检测25例外阴鳞癌、13例外阴上皮内瘤变及10例正常外阴组织中Beclin1 mRNA的表达情况。结果:Beclin1蛋白在外阴癌、外阴上皮内瘤变、正常外阴组织中阳性率分别为52.0%、8 6.6%、9 0.0%,Beclin1蛋白在外阴癌组织中的表达明显低于外阴上皮内瘤变及正常外阴组织,具有统计学差异(P<0.05)。Beclin1 mRNA在外阴癌中的相对表达量为(0.318±0.031),显著低于外阴上皮内瘤变(0.634±0.037)及正常外阴组织(0.702±0.042)。Beclin1蛋白在外阴鳞癌中的表达与肿瘤临床分期、分化程度、有无淋巴结转移有关(P<0.05),与患者年龄无关(P>0.05)。结论:Beclin1在外阴鳞癌组织中表达下调,提示自噬活性的改变可能对外阴鳞癌的发生、发展起一定的作用。

自噬相关基因Beclin 1和微管相关蛋白轻链3在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探究Beclin-1及LC3蛋白在胃癌组织中的表达水平,并分析其临床病理意义。方法选取2015年3月—2016年3月我院收治的患者146例,收集其胃癌组织标本及癌旁组织标本,并采集146例健康黏膜组织作为对照组,利用SP方法检测Beclin-1和LC3的表达,并分析其表达与临床病理特征的关系。结果 Beclin-1及LC3在健康黏膜组织的表达最高,在胃癌组织中的表达最低,此外,上述两组蛋白在不同的性别、年龄及发病部位无明显差异,但在T3~T4分期、高、中分化程度及有淋巴结转移的胃癌组织中表达率显著降低。结论胃癌组织中的Beclin-1及LC3蛋白的表达量显著低于正常组织及癌旁组织,提示与胃癌的发生及发展密切相关,本研究为胃癌的诊断、预防及治疗提供了新的思路。

失血性休克患者外周血自噬标志基因表达水平与合并脏器损伤的相关性

目的研究失血性休克患者外周血自噬标志基因表达水平与合并脏器损伤的相关性。方法选择失血性休克患者128例作为失血性休克组,创伤出血且无休克患者54例作为创伤出血对照组、体检的健康志愿者150例作为健康对照组。所有受试者检测外周血Beclin-1、自噬相关蛋白5(autophagy protein 5,Atg5)蛋白表达水平。比较是否发生急性心力衰竭、急性肝损伤、急性肾损伤的失血性休克患者Beclin-1、Atg5蛋白表达水平。分析失血性休克患者Beclin-1、Atg5蛋白与损伤严重度评分、急性生理和慢性健康评分Ⅱ、序贯器官衰竭评分、N末端B型利钠肽原、总胆红素、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、血肌酐、血尿素氮、左心室射血分数的相关性。结果失血性休克组患者外周血中自噬标志基因Beclin-1、Atg5的蛋白表达水平高于创伤出血对照组和健康对照组(P<0.05)。失血性休克组中入院后发生心力衰竭、肾损伤、肝损伤的患者入院时外周血中自噬标志基因Beclin-1、Atg5的蛋白表达水平低于未发生心力衰竭、肾损伤、肝损伤的患者(P<0.05)。失血性休克组患者入院时外周血中自噬标志基因Beclin-1、Atg5的蛋白表达水平与损伤严重度评分、急性生理和慢性健康评分Ⅱ、序贯器官衰竭评分、N末端B型利钠肽原、总胆红素、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、血肌酐、血尿素氮呈负相关,与左心室射血分数呈正相关(P<0.05)。结论失血性休克患者外周血中自噬标志基因表达增加能够起到代偿性的保护作用,与病情加重、脏器损伤程度均呈负相关。

GLI1介导的巨噬细胞极化调控缺氧性肺动脉高压的作用及机制

目的:探讨神经胶质瘤相关癌基因家族锌指1(GLI1)对缺氧诱导大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)发生M1表型转化的作用机制及对肺动脉高压(PH)进展的影响。方法:将15只成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组、缺氧PH模型组和缺氧PH加GANT61给药处理组,每组5只。小动物超声、右心导管实验检测大鼠PH相关指标,确定GLI1特异性抑制剂GANT61对PH进程的影响。HE染色检测肺动脉壁厚度。免疫组化检测α-SMA及M1型极化标志物TNF-α和IL-1β蛋白表达。免疫荧光检测M1型极化标志物CD86及TNF-α表达。Western blot检测GLI1及NF-κB蛋白表达。qRT-PCR检测M1型极化标志物iNOS、CD86、TNF-α、IL-1β及IL-12 mRNA表达。CHIP-PCR验证GLI1调控NF-κB启动子活性。ELISA检测IL-12含量。CCK-8检测大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖。结果:GLI1抑制剂GANT61可缓解缺氧大鼠PH(P<0.05)。与缺氧组相比,抑制GLI1可降低大鼠肺组织TNF-α和IL-1β表达(P<0.05)。细胞实验中,缺氧通过上调GLI1激活NF-κB通路诱导NR8383 M1型极化,GLI1过表达促进M1型巨噬细胞相关标志物iNOS、CD86、TNF-α、IL-1β及IL-12表达(P<0.05)。NR8383培养上清可刺激肺动脉平滑肌细胞增殖(P<0.05),参与PH。结论:缺氧通过上调GLI1激活NF-κB通路诱导巨噬细胞发生M1型极化参与PH发生。

慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者CGRP、Msr1与肺功能、血气指标的相关性

目的 探究血清降钙素基因相关肽(CGRP)、巨噬细胞清除受体1(Msr1)表达水平与慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者肺功能、血气指标的相关性。方法 选取2019年6月至2021年6月在本院就诊的慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者114例作为研究对象,其中AECOPD患者47例,作为AECOPD组,病情稳定患者67例作为COPD稳定组。收集整理患者性别、体重指数(BMI)、年龄、吸烟史、白细胞计数(WBC)、肺功能指标[第1秒用力呼气容积与用力肺活量的比值(FEV_(1)/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV_(1)%pred)]及血气指标[动脉血氧分压(PaO_(2))、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))]等基本资料,选取同期于本院进行体检的健康志愿者114例作为对照组。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清CGRP、Msr1水平;分析AECOPD患者血清中CGRP、Msr1表达水平与肺功能及血气指标间的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析CGRP、Msr1表达水平对AECOPD的诊断价值;采用多因素Logistic回归分析AECOPD发生的影响因素。结果 AECOPD组吸烟史比例、WBC、PaCO_(2)水平均高于COPD稳定组及对照组,PaO_(2)、FEV_(1)/FVC及FEV_(1)%pred水平均低于COPD稳定组及对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组、COPD稳定组、AECOPD组血清CGRP、Msr1表达水平依次升高,差异有统计学意义(P<0.05);AECOPD患者血清CGRP、Msr1表达水平均与吸烟史、WBC及PaCO_(2)呈正相关(P<0.05),与PaO_(2)、FEV_(1)/FVC、FEV_(1)%pred呈负相关(P<0.05);CGRP、Msr1二者联合诊断AECOPD的曲线下面积(AUC)为0.927(95%CI:0.863~0.967),明显高于二者单独诊断(Z_(联合诊断vs. CGRP)=2.417、P=0.016;Z_(联合诊断vs. Msr1)=2.384、P=0.017);吸烟史、CGRP、Msr1是COPD患者发生AECOPD的危险因素(P<0.05),FEV_(1)/FVC及FEV_(1)%pred是保护因素(P<0.05)。结论 CGRP、Msr1水平在AECOPD患者血清中呈高表达,二者均与患者肺功能及血气指标密切相关,对临床诊断AECOPD具有一定的价值。