基因剪刀——核酶

阐述了核酶的主要功能及结构特点 。

Ribozyme及其在医学上的应用前景

本文简要介绍了各类Ribozyme的催化机制,Ribozyme的人工设计及其在医学上的应用前景。

大肠杆菌(Escherichia coli)LexA蛋白的结构与功能

LexA蛋白首先在大肠杆菌(Escherichia coli)中作为SOS反应的重要调节因子之一被发现.LexA蛋白含有202个氨基酸,由N端DNA结合结构域和C端催化核心结构域构成.细胞中LexA蛋白大都以二聚体形式存在,并且有可切割和不可切割两种构象.在正常生理条件下,LexA特异性结合16 bp的保守序列5'-CTGTN8ACAG-3',即SOS盒,抑制约50个基因的表达.当发生DNA损伤时,活化的RecA蛋白通过稳定LexA蛋白可切割构象,促进LexA蛋白Ala84-Gly85间肽键的切割,产生的C端LexA85-202和N端LexA1-84被蛋白酶ClpXP和Lon快速降解.LexA蛋白切割后,SOS基因以一定的顺序开始表达,并且完成DNA损伤修复.本文回顾和总结了LexA蛋白分子结构,自我切割分子机制和影响因素,以及在SOS反应中的作用等方面的研究进展.同时,也讨论了LexA蛋白在原核细胞中的进化保守性.

重组猪促肾上腺皮质激素在大肠埃希菌中的高效表达与分离纯化

本研究建立了一种以大肠埃希菌作为宿主,表达重组猪促肾上腺皮质激素(pig adrenocorticotropic hormone,pACTH)的新方法。pACTH在N末端与经典猪瘟病毒N末端自切蛋白酶Npro突变体EDDIE融合,然后在大肠埃希菌胞浆中以包涵体形式表达,包涵体约占菌体湿重的36.2%。经过复性后的包涵体可以促使EDDIE自酶切,从而获得pACTH。通过优化复性条件,EDDIE-pACTH蛋白的自切率从25%提高至60%。复性液通过酸沉淀,能够去除杂蛋白,经反相色谱纯化后获得纯度为99.56%的pACTH。