衰老相关动物模型研究进展

人口老龄化是本世纪最艰巨的全球问题之一,据报道在人口总数达到21亿时,每3个人中就有1个老年人[1]。衰老是身体器官功能的衰退老化,是全身性进行性的退化过程。目前衰老相关的疾病,如心血管疾病、肿瘤以及一些神经退行性病变等呈明显增多趋势[2]。因此衰老相关研究逐渐得到重视,尤其是利用衰老相关动物模型进行衰老机制及衰老相关疾病的研究明显增多。

二至丸对自然衰老小鼠尿液代谢产物的影响

目的:研究长期给予滋阴药二至丸对小鼠内源性代谢产物的影响。方法:二至丸组自小鼠6月龄起按1.8g/kg给药,至18月龄时结束时收集尿液,经过液相色谱分离,三重四极杆质谱检测尿液中内源性代谢物信息,采用主成分分析法(Principalcomponent analysis,PCA)降维,正交信号校正偏最小二乘法判别分析法(Orthogonal signal correction-partial least square discriminate a-nalysis,OSC-PLS-DA),分析二至丸小鼠尿样的代谢组学特征及生物标记物。结果:二至丸组与空白对照组相比,小鼠尿液代谢物共有36种发生改变,其中与延缓衰老的药理作用有:Malonic acid(m/z105)、3-O-a-L-Fucopyranosyl-D-glucose(m/z327.1)、Cytosine(m/z243)、17a-Ethynylestradiol(m/z296.1)、inosinic acid(m/z348.2)、N-Acetylaspartylglutamate(m/z305.1)、(R)-3-Hydroxydodecanoic acid(m/z245)、Oleic acid(m/z283.1)、cholesterol esters(m/z701.5)。结论:二至丸长期给药对自然衰老小鼠的内源性物质有影响,可能能够从提高免疫力、调节神经功能、调整内分泌、促进物质代谢等方面延缓衰老,这为二至丸抗衰老的开发和利用提高基础。

基于代谢组学分析补益气血方剂对自然衰老小鼠的影响

目的:通过代谢组学的研究方法观察补气剂四君子汤、补血剂四物汤对自然衰老模型小鼠内源性代谢物的影响,分析补气剂、补血剂干预衰老的机制,比较气、血作用于模型小鼠的生物学靶点和代谢途径。方法:选取雌性自然哀老模型小鼠(20月龄)作为研究对象。经超高效液相色谱串联四极杆飞行时间高分辨率质谱法(UPLC-Q-TOF-MS)对小鼠血浆进行分析,流动相含有0.1%甲酸的乙腈溶液(A)-0.1%甲酸水溶液(B);梯度洗脱(0～15min,2%～100%A);选择主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)分析代谢标志物,同时归纳其代谢途径。结果:发现四君子汤、四物汤分别影响了小鼠体内10种不同的衰老相关代谢标志物,使其表达水平向3月龄小鼠靠拢。这其中有棕榈酸、花生四烯酸、N-乙酰、D-赤藓糖-4-磷酸、硬脂酸、脱氧羟丁赖氨酸、甘草次酸、可可碱,8种代谢物完全相同,且差异有统计学意义(P<0.05)。代谢标志物主要参与了氨基糖和核苷酸糖代谢、不饱和脂肪酸的生物合成、磷酸戊糖途径、脂肪酸的生物合成、咖啡因代谢、线粒体中的脂肪酸延长、脂肪酸代谢等代谢途径。结论:补气剂四君子汤、补血剂四物汤可以通过调节小鼠的氨基糖和核苷酸糖代谢、磷酸戊糖途径、脂肪酸代谢等途径起到延缓衰老的作用,同时发现气、血存在相同的干预靶点和代谢途径,为研究传统中医理论"气血同源"提供了生物学依据。

基于中医方证代谢组学分析四物汤对自然衰老小鼠的干预作用

目的:通过代谢组学的研究方法观察四物汤对自然衰老小鼠体内代谢物、代谢通路的影响,分析四物汤干预自然衰老小鼠的相关靶点和作用机制。方法:选取20月龄自然哀老模型小鼠(相当于人类60～65岁)作为实验对象,同时设立3月龄小鼠作为青年组。运用UPLC-Q-TOF-MS技术对小鼠血浆进行分析,流动相含0. 1%甲酸的乙腈溶液(A)-0. 1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0～15 min,2%～100%A),选择电喷雾离子源的正离子模式;采用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)研究代谢标志物,并归纳其代谢途径。结果:四物汤对16种衰老相关代谢物的表达水平有明显回调作用,其中9种代谢标志物存在极显著统计学意义(P <0. 01);主要影响了谷胱甘肽代谢、嘧啶代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、硒氨基酸代谢等代谢途径。结论:四物汤可影响20月龄自然衰老小鼠血浆中的代谢物,通过谷胱甘肽代谢、嘧啶代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等途径改善小鼠衰老过程中的代谢紊乱,可为该复方后续的干预衰老物质基础研究提供生物学信息。

绞股蓝总皂苷纳米乳的制备及其抗衰老作用研究

目的:研究绞股蓝总皂苷纳米乳的制备及其抗衰老作用。方法:通过对绞股蓝总皂苷溶解度试验和伪三元相图确定其最佳处方并制备出绞股蓝总皂苷纳米乳,用透射电镜和粒度分析仪分析其形态和对粒径进行鉴定。以皮下注射D-半乳糖复制亚急性衰老大鼠模型。30只SD大鼠均分为6组,即正常对照(2mL生理盐水)、亚急性衰老模型(2mL生理盐水)、绞股蓝水溶液(120mg.kg-1)和绞股蓝总皂苷纳米乳高、中、低剂量(180、120、60mg.kg-1)组;25只老年大鼠均分为5组,即自然衰老模型(2mL生理盐水)、绞股蓝水溶液(120mg.kg-1)和绞股蓝纳米乳高、中、低剂量(180、120、60mg.kg-1)组。灌胃给药,每天1次,连续30d。检测大鼠血清、下丘脑和心脏的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)水平。结果:绞股蓝总皂苷纳米乳最佳处方为聚氧乙烯氢化蓖麻油(RH40)/肉豆蔻酸异丙酮(IPM)/丙二醇/水,表面活性剂和助活性剂比例为3:1,平均粒径为35.8nm。与亚急性衰老模型和自然衰老模型组比较,绞股蓝总皂苷纳米乳高、中、低剂量组大鼠血清、心脏和下丘脑组织中的SOD、CAT、T-AOC、GSH-Px水平显著升高(P<0.05),而NO、MDA含量显著减少(P<0.05)。结论:绞股蓝总皂苷纳米乳有较好的抗衰老作用,且呈剂量依赖关系。