不同类型白内障晶体中自由基信号及强度的ESR研究

采用冷冻干燥法处理样品后，用电子自旋共振（ＥＳＲ）技术对５０日龄大鼠３种不同类型实验白内障晶体中自由基信号及强度进行了检测，发现：正常晶体内含２个自由基峰，其中１个峰属于超氧自由基类，另１峰性质未定；仔１代和仔２代先天性白内障晶体中，超氧自由基峰明显低平，另１峰强度也低于正常组，而在硒性和半乳糖性白内障晶体内，超氧自由基峰消失，另１峰强度明显低于正常组，这些结果与已有报道有所不同，其中对先天性白内障晶体的检测在国内外尚属首次。

脑创伤后单唾液酸四己糖神经节苷脂对氧自由基线粒体信号通路的影响

目的探讨脑创伤后单唾液酸四己糖神经节苷脂对氧自由基线粒体信号通路的影响。方法采用改进的Marmarou's法建立大鼠中度闭合性弥漫性颅脑损伤模型。应用免疫组化、TUNEL法对大鼠伤后皮质细胞色素c、凋亡细胞数进行动态观察。硫代巴比妥酸法测量丙二醛。结果伤后给予Edaravone进行干预自由基水平明显减少,细胞色素c表达和神经元细胞凋亡数降低;依达拉奉与单唾液酸四己糖神经节苷脂联合干预效果更为明显。结论颅脑创伤后单唾液酸神经节苷脂具有脑保护作用,其可能的机制之一是调节氧自由基线粒体信号通路而发挥作用。

ESR法测定肝纤维化小鼠自由基的样品处理方法比较

目的利用电子自旋共振(electron spin resonance,ESR)波谱仪检测肝纤维化过程中血清、血浆以及肝脏中分别产生的自由基信号,寻找检测自由基的样品前处理最佳方案。方法采用传统的四氯化碳法造模,造模1周后通过不同的处理方法,利用ESR检测小鼠肝脏、血清和血浆的自由基信号。结果通过利用ESR技术,在小鼠肝脏、血清及血浆中均检测到了自由基信号,并且在处死小鼠后加入电子捕获剂(DMPO)所测得的自由基信号更加明显。结论通过以上对比发现,样品加DMPO的生理盐水组测出的自由基信号相较于其他处理方法而言更为明显。

氧自由基-线粒体信号通路在Edaravone治疗创伤性脑创伤中的作用

目的探讨创伤性脑损伤（traumatic brain injury，TBI）后在抗氧化剂Edaravone干预下大鼠大脑皮质凋亡相关蛋白表达改变情况并探讨氧自由基一线粒体信号通路在Edaravone治疗创伤性脑创伤中的作用。方法成年雄性sD大鼠180只随机分为TBI组、Edaravone治疗组和对照组。每组设伤后1，3，6，24，48，72h6个时相点。Edaravone治疗组给予Edaravone（10mg／kg），对照组、TBI组给予等量等渗盐水。HE染色观察大鼠TBI后皮层神经元的病理改变。免疫组化和TUNEL法以及硫代巴比妥酸缩合法观察不同时相点大鼠皮层Cyt—c、Bcl-2和Bax的表达情况，细胞凋亡和丙二醛（MDA）变化情况。结果HE染色可见创伤后6h大脑皮质出现散在变性坏死神经元，伤后24h达高峰。Edaravone治疗组伤后6h即可检测到自由基中间产物丙二醛（MDA）的升高，与对照组相比，48h达高峰。与TBI组相比，MDA含量各时相点均降低，其中在24，48和72h差异有统计学意义（P〈0．05）。与对照组相比，TBI组Cytc阳性细胞免疫反应6h增强，24h达高峰，在3，6，24，48和72h差异有统计学意义（P〈0．05）。与TBI组相比，Edaravone治疗组Ctyc阳性细胞免疫反应在24，48和72h降低。Bcl-2表达在伤后应激性增高，于3h达高峰，以后逐渐下降。Bax在伤后表达逐渐增高，于48h达高峰，Bax／Bcl-2于48h达高峰。TBI后，TUNEL阳性细胞数逐渐增多，24h以前以TUNELI型细胞为主，24h后以Ⅱ型细胞为主，并于48h达高峰。结论大鼠TBI后皮质神经细胞死亡存在坏死和凋亡两种方式，以凋亡为主。氧自由基-线粒体是TBI后神经细胞凋亡的信号转导通路中的一条。Edaravone对TBI有治疗作用。

虾青素调控氧自由基/JNK信号通路介导脊髓损伤小鼠神经凋亡的研究

目的探讨虾青素(Astaxanthin,AST)调控氧自由基/JNK信号通路对脊髓损伤处神经细胞的保护作用。方法采用高空坠物法的方法制备脊髓损伤小鼠模型。将造模成功的小鼠随机分为SCI组与虾青素组(灌胃给予25 mg/kg的AST),另取正常C57BL/6小鼠作为假手术组。评价各组小鼠后肢功能;检测各组小鼠脊髓含水量;HE染色观测各组小鼠脊髓损伤情况;TUNEL检测各组小鼠脊髓损伤处神经细胞的凋亡情况;免疫荧光检测脊髓组织ROS;Western blot法检测JNK、p-JNK蛋白表达。结果虾青素可以改善SCI小鼠后肢功能,降低脊髓含水量,凋亡细胞数显著降低,抑制线粒体中ROS产生,减轻线粒体肿胀,降低p-JNK蛋白水平。结论虾青素可抑制ROS/JNK通路,改善脊髓损伤中神经细胞的凋亡。