高浓度c-Myc羧基端的体外自身二聚体化活性

将编码人c myc羧基端bHLH/LZ结构域的 92个氨基酸的cDNA片段 (c myc c92 )对框插入 pGEX 2T原核表达载体中 ,使之与谷胱甘肽转移酶 (GST)编码基因融合 ,并将重组质粒导入大肠杆菌BL2 1(DE3)中 ,由IPTG诱导融合基因高效表达 ,并用GlutathioneSepharose 4B亲和柱纯化融合蛋白GST c Myc c92 ,凝胶阻滞 (EMSA)分析显示该纯化蛋白能与CACGTG序列特异结合 ,并且只有高浓度的GST c Myc c92才能与探针结合 .结果表明在体外情况下高浓度c Myc羧基端能自身二聚体化 ,此发现丰富了Myc Max Mad的调控网络 ,并为进一步研究c myc的功能和调控提供了一定的线索 .