人子宫内膜干细胞及其外泌体腹腔注射对自身免疫性卵巢早衰大鼠的治疗效果观察

目的观察人子宫内膜干细胞(EnSCs)及其外泌体腹腔注射对自身免疫性卵巢早衰(POF)大鼠的治疗效果。方法在女性健康志愿者的月经周期脱落子宫内膜混合物中分离培养EnSCs,分别在外泌体-free培养基中或加入50µmol/L二甲双胍的外泌体-free培养基中培养,在培养液上清中提取外泌体并进行鉴定,分别命名为EnSC-Exo、EnSCs-Met-Exo。取正常动情周期的4周龄SD雌性大鼠15只,随机分为Con组、POF组、POF-EnSCs组、POF-Exo组、POF-Met-Exo组,每组3只;除Con组外均采用腹腔皮下双点注射免疫试剂的方法建立自身免疫性POF大鼠模型,再分别给予生理盐水、PBS、EnSCs、EnSCs-Exo、EnSCs-Met-Exo腹腔注射。采用ELISA法检测各组大鼠血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH),取各组大鼠卵巢组织,观察外观后测算卵巢体积,HE染色后观察病理情况并记录原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、闭锁卵泡数量。结果与Con组比较,POF组大鼠血清E2水平、卵巢体积、初级卵泡和次级卵泡数量均降低,而血清FSH水平及闭锁卵泡数量均升高(P均<0.05);与POF模型组比较,POF-EnSCs组、POF-Exo组、POF-Met-Exo组大鼠血清FSH水平及闭锁卵泡数量均降低,POF-Met-Exo组血清E2水平及初级卵泡、次级卵泡数量均升高(P均<0.05)。各组原始卵泡数量比较差异无统计学意义(P>0.05)。Con组大鼠卵巢外观及病理结果均正常;POF组大鼠卵巢充血、表面塌陷、颗粒感不明显、呈萎缩状,卵巢组织出现间质纤维化,透明带扭曲,存在颗粒细胞和炎症细胞浸润;POF-EnSCs组、POF-Exo组和POF-Met-Exo组大鼠卵巢外观接近Con组,卵巢组织炎症细胞浸润和间质纤维化情况较POF组减轻。结论人EnSCs及其外泌体EnSCs-Exo、EnSCs-Met-Exo腹腔注射均可减轻自身免疫性POF大鼠的卵巢纤维化及炎症等病理改变、促进卵泡发育,其中EnSCs-Met-Exo的治疗效果更佳。

补肾调肝法对治疗自身免疫性卵巢早衰小鼠的实验研究

[目的]旨在探讨中医药在防治卵巢早衰时的思路和方法,以期给临床治疗提供强有力的依据。[方法]参照文献研究随机将60只小鼠分为6组制作免疫性小鼠卵巢早衰模型:造模成功后第6天开始各药物组灌胃给药。连续灌胃4周后摘眼球取血,处死小鼠,取组织待测。采用放免法测定小鼠血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)及雌二醇(E2)的含量。[结果]1)西药组灌胃4周后FSH、LH值明显降低,E2值明显升高,与中药各组有显著性差异(P<0.05)。2)中药大剂量组FSH、LH值降低幅度虽不及西药组,但FSH、LH与模型组比较结果有显著性差异,结果说明灌胃4周后中药大剂量组能恢复部分卵巢功能,且中药长期服用不良反应较西药明显减少,仍可说明其意义及可行性。[结论]补肾调肝中药方剂对自身免疫性卵巢早衰小鼠有一定的治疗作用,其治疗机制主要通过纠正紊乱的生殖内分泌轴,恢复部分的卵巢功能,改善临床症状,进一步对免疫性卵巢早衰起到一定的防治作用。

透明带3多肽诱导的免疫性卵巢早衰小鼠模型子宫组织中Ki-67、ER的表达

目的：以透明带3多肽（pZP3）诱导的免疫性卵巢早衰（POF）小鼠为研究对象，观察其子宫Ki-67、雌激素受体（ER）的表达，以进一步探讨免疫性卵巢早衰患者辅助生殖相关的子宫预处理方案。方法取7~8周龄的健康雌性BALB/c小鼠40只，随机分为对照组和模型组。通过阴道脱落细胞涂片、血清性激素、卵巢组织形态及抗卵巢ZP3抗体鉴定建模成功。检测两组小鼠子宫组织形态变化及子宫Ki-67、雌激素受体α亚型（ERα）及雌激素受体β亚型（ERβ）的表达。结果8周后80%小鼠建模成功。与对照组相比，模型组子宫萎缩，内膜变薄，单位面积内腺体数量减少。模型组子宫内膜上皮细胞、腺上皮细胞及间质细胞中Ki-67的表达较对照组减弱，且有胞核转位至胞浆现象。对照组小鼠子宫内膜上皮细胞、腺上皮细胞及间质细胞的胞浆强表达ERα，而模型组呈阴性表达。两组小鼠子宫内膜ERβ均呈阴性表达。结论 pZP3可以诱导小鼠成功构建免疫性卵巢早衰疾病模型，同时引起子宫内膜上皮细胞及间质细胞的增殖降低和ERα表达减弱。

归肾丸对免疫性卵巢早衰小鼠白细胞介素-17和白细胞介素-1β水平的影响

目的 探讨归肾丸对免疫性卵巢早衰（POF）小鼠血清白细胞介素-17（IL-17）和白介素-1p（IL-1β）水平的影响.方法 采用小鼠透明带多肽抗原免疫小鼠,建立免疫性（POF）小鼠模型.归肾丸灌胃干预4周,取小鼠血清用EHSA法检测IL-17;取卵巢组织,行HE染色,观察卵泡形态;用免疫组织化学方法检测卵巢IL-1β.结果 与模型组比较,正常对照组、戊酸雌二醇组（阳性对照）、归肾丸高、中和低剂量组小鼠卵母细胞内卵泡液IL-1β平均吸光度值均有显著减少（P＜0.01）;正常对照组和戊酸雌二醇组血清IL-17有显著减少（P＜0.01）,高、中和低剂量组血清IL-17有显著减少（P＜0.05）.与正常对照组比较,模型组卵母细胞内卵泡液IL-1β平均吸光度值呈显著增加（P＜0.01）,其他各组均无显著差异（P＞0.05）;模型组、戊酸雌二醇组、高剂量组、中剂量组和低剂量组颗粒细胞内卵泡液IL-1p平均光密度值均无显著性差异（P＞0.05）;模型组、戊酸雌二醇组、高剂量组、中剂量组和低剂量组血清IL-17均呈显著性增加（P＜0.01）.结论 归肾丸可能通过调节IL-1β和IL-17改善小鼠自身免疫紊乱,从而改善卵巢卵泡功能.

补肾调肝法对自身免疫性卵巢早衰小鼠卵巢促卵泡生成素受体mRNA表达的影响

目的旨在探讨补肾调肝法对自身免疫性卵巢早衰小鼠卵巢促卵泡生成素受体(FSHR)mRNA表达的影响。方法随机将60只小鼠分为6组,5组制作免疫性小鼠卵巢早衰模型(分别为模型组、西药组、中药高剂量组、中药中剂量组和中药低剂量组),另设1组为空白对照组。造模成功后第6天开始各药物组灌胃给药。连续灌胃4周后摘眼球取血,取卵巢组织待测。采用RT-PCR方法研究免疫性卵巢早衰小鼠的卵巢FSHR mRNA表达。结果卵巢FSHR mRNA表达模型组高于空白对照组,用药后表达均降低,总体趋势:中药高剂量组>西药组>中药中剂量组>中药低剂量组。结论补肾调肝方剂对自身免疫性卵巢早衰小鼠有一定的治疗作用,其治疗机理主要通过纠正紊乱的生殖内分泌轴,调动下丘脑—垂体—卵巢的生殖功能,改善临床症状,进一步对免疫性卵巢早衰起到一定的防治作用。

免疫性卵巢早衰模型鼠制备的时间

背景:研究已经证实抗透明带抗体可以加速卵母细胞的破坏和耗竭而致卵巢早衰。目的:探讨以透明带3多肽(pZP3)诱导BALB/c小鼠建立免疫性的卵巢早衰模型的时间。方法:6-8周龄的健康雌性BALB/c小鼠30只,随机分为免疫实验组(20只)和空白对照组(10只)。实验组小鼠首次免疫注射时间为0周,给予0.15 mL免疫试剂注射双足底及下腹部皮下,每日晨阴道脱落细胞涂片观察小鼠动情周期的变化;2周后给予0.15mL免疫强化试剂皮下注射相同部位,第4周和第6周的第1天,分别注射免疫试剂或免疫强化试剂各1次(交替注射)。在每次注射前采血用酶联免疫法测小鼠血清性激素;最后观察小鼠卵巢组织及子宫形态。结果与结论:①实验组小鼠初次免疫注射及注射后2周,2组间血清促卵泡生长激素及雌激素水平差异无显著性意义;注射后4周实验组血清雌激素水平明显低于对照组,但促卵泡生长激素水平差异无显著性意义;注射后6周实验组血清雌激素水平明显低于对照组(P<0.05),促卵泡生长激素水平明显高于对照组(P<0.01);②实验组小鼠卵巢间质纤维化程度较对照组明显,卵巢体积减小,子宫萎缩,小鼠原始卵泡、初级及次级卵泡数均显著低于对照组,闭锁卵泡数量高于对照组(P<0.05);③结论:75μg透明带3多肽诱导BALB/c小鼠,建立自身免疫性卵巢早衰疾病模型,免疫后6周即可达到良好的建模效果。

脐带间充质干细胞移植对免疫性卵巢早衰的影响

目的探讨脐带间充质干细胞(UCMSCs)移植对自身免疫性卵巢早衰小鼠卵巢结构、功能的影响。方法以透明带3(ZP3)作为免疫原建立小鼠自身免疫性卵巢早衰动物模型。实验分为4组:空白对照组、模型组、实验对照组及移植组。空白对照组不注射ZP3及UCMSCs;模型组建立动物模型,不予移植;实验对照组建模后,双卵巢内注射生理盐水;移植组在建模成功即予每侧卵巢约注射1×106个UCMSCs。于移植后15、30、45及60 d分批处死小鼠,收集血标本检测性激素[雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)]浓度;留取卵巢标本,荧光显微镜下观察有无绿色荧光及其分布,计数卵泡数目。结果 UCMSCs移植后15 d,移植组卵巢组织内可见到绿色荧光,且持续至移植后2个月。绿色荧光主要分布在卵巢的间质组织,而卵泡内则见不到绿色荧光的分布。移植组部分小鼠恢复正常的动情周期。移植后各个时间点内,移植组E2浓度高于模型组及实验对照组,FSH浓度则降低。移植45、60 d时,移植组的各级卵泡数目均高于模型组及实验对照组,但低于空白对照组。结论 UCMSCs可以在透明带抗原免疫损伤的小鼠卵巢组织内存活并迁移,但其分化为卵泡组分的可能性较小。UCMSCs移植可修复透明带免疫损伤的卵巢组织,从而部分改善其内分泌功能。

补肾活血法防治免疫性卵巢早衰的研究进展

卵巢早衰的发病机制与免疫密切相关,深入认识并早期发现免疫性卵巢早衰是防治此病的关键,目前西医激素治疗存在一系列的弊端,本文拟从中医"心—肾—子宫轴"整体性理论、"辨证论治"体系、"治未病"思想等角度,阐述补肾活血法防治免疫性卵巢早衰的进展情况。

MIF和HLA-DR表达在自身免疫性卵巢早衰患者临床意义

目的探讨巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和人类白细胞DR抗原(HLA-DR)表达在自身免疫性卵巢早衰(APOF)患者的表达及其临床意义。方法选择深圳市宝安区人民医院2016年1月至2018年1月诊治的60例卵巢早衰患者,年龄21~39岁,平均年龄32.58岁。根据病因分为:观察组30例,诊断为APOF;对照组30例,诊断为非APOF。另选取30例健康绝经妇女作为绝经组(年龄59~67岁,平均年龄63.26岁)。检测并比较3组外周血抗卵巢抗体(AOAb)、抗透明带抗体、抗核抗体(ANA)、MIF和淋巴细胞HLA-DR表达水平。采用Pearson相关分析评估血清MIF与HLA-DR间的相关性。根据年龄(> 30岁组和≤30岁组)和病程(> 3年组和≤3年组)进行分组,比较血清MIF与HLA-DR水平的差异。应用多元Logistic回归分析上述各临床指标与APOF发病的相关性。绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估血清MIF与HLA-DR水平对APOF患者的临床诊断价值。结果观察组与对照组患者的AOAb、抗透明带抗体、ANA水平差异无统计学意义(P> 0.05),但均高于绝经组(P <0.05);观察组血清MIF和HLA-DR水平最高,对照组次之,绝经组最低(P <0.05)。观察组中年龄> 30岁组MIF水平明显高于年龄≤30岁组(P <0.05);但在年龄亚组中HLA-DR水平未见差异(P> 0.05)。病程> 3年组MIF和HLA-DR水平明显高于病程≤3年组(P <0.05)。Pearson相关分析显示APOF患者血清MIF与HLA-DR呈负相关(P <0.05)。多元Logistic回归分析显示,血清MIF、HLA-DR+CD3、HLA-DR+CD19为APOF的危险因素(OR=2.135,P=0.030;OR=2.867,P=0.024;OR=2.779,P=0.036)。血清MIF及HLA-DR联合,诊断APOF的AUC最大为0.878,P值为0.028,其灵敏度84.5%,特异度86.7%。结论 APOF患者外周血存在MIF和HLA-DR高水平,在一定程度上反映卵巢早衰患者存在免疫紊乱,可作为临床早期诊断的主要参考指标。

金匮温经汤对肾虚血瘀型免疫性卵巢早衰患者性激素水平及临床证候积分的影响

目的:探讨金匮温经汤对肾虚血瘀型免疫性卵巢早衰患者性激素水平及临床证候积分的影响。方法:纳入124例肾虚血瘀型免疫性卵巢早衰患者为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和研究组,各62例,对照组采用雌二醇环丙孕酮片治疗,研究组在对照组基础上加服金匮温经汤,连续治疗3个月,采用化学发光法检测患者卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E_(2))、黄体生成激素(LH)和抗缪勒管激素(AMH)水平,记录患者肝肾功能、大便常规、尿常规、血常规检查结果,按照中医症状评分标准评定患者临床证候积分,治疗过程中记录患者月经周期和月经量,并记录治疗效果。结果:治疗前,2组AMH、E_(2)、LH、FSH水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组FSH水平均下降,且研究组FSH水平低于对照组,E_(2)水平均升高,且研究组E_(2)水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,研究组LH水平下降,且低于对照组,AMH水平升高,且高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组治疗前后LH、AMH水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前,2组临床证候积分、月经周期及月经量比较,差异无统计学意义(P>0.05),经过治疗,2组月经周期均下降,且研究组短于对照组,月经量均增加,且研究组多于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后研究组临床证候积分低于治疗前,且低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前后对照组临床证候积分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。研究组总有效率93.55%,高于对照组的77.42%,差异有统计学意义(P<0.05)。2组无不良反应发生。结论:金匮温经汤能够明显改善肾虚血瘀型免疫性卵巢早衰患者性激素水平,降低临床证候积分,提高治疗效果。

两种免疫性卵巢早衰大鼠模型的构建与比较

目的比较顺铂和雷公藤多苷两种药物制作的免疫性卵巢早衰大鼠模型。方法顺铂模型组按2 mg/kg大鼠体重连续腹腔注射7 d,雷公藤模型组按0.75 mg/kg大鼠体重连续灌胃14 d,补佳乐按0.15 mg/kg连续灌胃21 d进行治疗,观察各组大鼠一般情况、动情周期、性激素水平、卵巢脏器指数、卵巢HE染色和免疫组化。结果末次体重顺铂模型组和顺铂模型治疗组体重低于正常组(P<0.05,n=8);顺铂模型组和雷公藤多苷模型组大鼠动情周期紊乱,顺铂模型治疗组大鼠动情周期为5~8 d/次;顺铂模型组和雷公藤多苷模型组血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)高于正常组,雌激素(E2)低于正常组(P<0.05,n=8);顺铂模型治疗组LH低于顺铂模型组,E2高于顺铂模型组但仍低于正常组(P<0.05,n=8);雷公藤多苷模型治疗组FSH、LH低于雷公藤多苷模型组,E2高于雷公藤多苷模型组(P<0.05,n=8);顺铂模型组、顺铂模型治疗组、雷公藤多苷模型组和雷公藤多苷模型治疗组卵巢脏器指数均低于正常组(P<0.05,n=8);顺铂模型治疗组卵巢指数高于顺铂模型组,雷公藤多苷模型治疗组卵巢指数高于雷公藤多苷模型组(P<0.05,n=8);顺铂模型组和雷公藤多苷模型组卵巢组织HE染色出现闭锁卵泡增多,未见成熟卵泡,顺铂模型治疗组可见卵泡数增多,未见成熟卵泡,雷公藤多苷模型治疗组可见卵泡数增多和成熟卵泡;免疫组化显示顺铂模型组、雷公藤多苷模型组的磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和雷帕霉素的哺乳动物靶标(mTOR)的阳性细胞计数高于正常组(P<0.05,n=8);顺铂模型治疗组mTOR阳性细胞计数低于顺铂模型组(P<0.05,n=8),雷公藤多苷模型治疗组PI3K、pAKT和mTOR的阳性细胞计数低于雷公藤多苷模型组(P<0.05,n=8)。结论两种药物均可制作免疫性卵巢早衰大鼠模型,本次试验雷公藤多苷制作的模型更适合用于药物筛选。

左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠卵巢GDF-9、BMP-15表达的影响

目的明确促卵泡发育的卵巢卵母细胞自分泌因子生长分化因子-9(GDF-9)、骨形态发生蛋白-15(BMP-15)的表达不足在免疫性卵巢早衰发病中的重要作用,进一步阐明补肾活血中药复方左归丸通过调节卵母细胞自分泌因子的表达,对卵巢起到保护作用。方法建立小鼠免疫性卵巢早衰模型:以小鼠透明带3所合成透明带多肽为免疫原。以出现动情周期紊乱、卵巢细胞受损,表示造模成功。然后将造模成功的小鼠随机分为模型组、左归丸高、低剂量组,强的松组、己烯雌酚组和对照组,共灌胃给药4周。免疫组化法检测GDF-9、BMP-15蛋白的表达。结果模型组与空白对照组相比,GDF-9蛋白表达水平下降,差异显著(P<0.05),左归丸低、高剂量组及己烯雌酚组与模型组相比,GDF-9蛋白表达水平增加,差异显著(P<0.05),与空白对照组相比,无显著差异。左归丸高剂量组GDF-9蛋白表达水平也较强的松组增加,差异显著(P<0.05)。模型组BMP-15蛋白表达水平较其余各组减少,但各组相比均无显著性差异(P>0.05)。结论左归丸对卵巢具有保护作用,能促进卵巢GDF-9蛋白的表达,从而促进卵泡的发育。

基于雌激素受体途径探讨补肾活血汤干预免疫性卵巢早衰小鼠模型机制研究

目的:以透明带3多肽(pZP3)诱导的免疫性卵巢早衰(POF)小鼠为研究对象,观察其血清性激素水平及卵巢组织中雌激素受体(ER)表达情况,探讨免疫性卵巢早衰可能的发生机制及补肾活血汤的潜在治疗途径。方法:将40只雌性B6AF1小鼠随机分为空白组、模型组、补佳乐组及补肾活血汤组。除空白组外,各组小鼠第1天、第14天两次予pZP3联合弗氏佐剂皮下注射造模,空白组同期予0.9%氯化钠溶液皮下注射;建模成功后空白组、模型组、补佳乐组及补肾活血汤组分别予以等体积0.9%氯化钠溶液、戊酸雌二醇及补肾活血汤灌胃,每天2次。灌胃28 d后处死小鼠,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E_(2))、抗缪勒氏管激素(AMH)水平;采用HE染色和免疫组化方法检测卵巢组织病理变化及雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)的表达情况。结果:①与空白组相比,模型组小鼠呈现出典型的低雌激素高促性腺激素表型(P<0.01);经补佳乐及补肾活血汤灌胃治疗后,小鼠血清E_(2)、AMH水平上升,FSH水平下降(P<0.05或P<0.01),补佳乐组雌激素上升水平更加显著(P<0.05)。②模型组中,小鼠卵巢中卵泡数目减少,闭锁卵泡增多,ER表达与E_(2)水平下降呈现平行趋势(P<0.01);予补佳乐及补肾活血汤灌胃后,小鼠卵巢中各级卵泡恢复发育,雌激素受体表达明显上调(P<0.01),补肾活血汤组小鼠卵巢中ERα的表达上调较补佳乐组更加显著(P<0.05)。结论:pZP3造模可有效构建POF模型,补肾活血汤的治疗机制可能是通过提高卵巢雌激素受体表达,从而增强雌激素的生物学效应的发挥,介导疾病恢复过程。

中药复方对免疫性卵巢早衰的实验研究进展

目前卵巢早衰的确切病因及机制尚不明确,已公认的与其发病密切相关的因素有医源性因素、自身免疫性因素、代谢障碍、遗传因素、感染因素、心理应激等。近年来免疫相关因素导致的卵巢早衰临床较为常见,对该病免疫机制的深入研究是早期干预此病发生发展的关键。免疫性卵巢早衰动物模型已较成熟,中医药治疗免疫性卵巢早衰具有独特优势,故拟从中医药多靶点、多环节调节免疫的角度,阐述中药复方治疗免疫性卵巢早衰实验的进展情况。

免疫性卵巢早衰小鼠卵巢组织中Cx43、Bcl-2表达的研究

目的:检测免疫性卵巢早衰(POF)小鼠卵巢组织中缝隙链接蛋白43(Cx43)和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)的m RNA及蛋白水平,以探讨其在免疫性POF发病中的作用。方法:建立免疫性POF小鼠模型并选择同期佐剂对照组及正常对照组,分别于2周、4周、6周观察各组小鼠双侧卵巢组织学变化。ELISA法测定各组小鼠血清FSH水平。免疫组化法检测各组小鼠卵巢组织中Cx43和Bcl-2蛋白相对表达量,PCR法检测Cx43和Bcl-2 m RNA水平。结果:POF组4周及6周Cx43蛋白、Bcl-2蛋白相对表达量显著低于正常对照组和佐剂对照组(P<0.05);POF组4周及6周Cx43蛋白、Bcl-2蛋白相对表达量较POF组2周降低(P<0.05)。POF组4周及6周Cx43 m RNA、Bcl-2 m RNA表达水平显著低于正常对照组佐剂对照组(P<0.05);POF组4周及6周Cx43 m RNA、Bcl-2 m RNA表达水平较POF组2周降低(P<0.05)。结论:在免疫性POF小鼠卵巢组织中Cx43和Bcl-2蛋白及m RNA表达均下调,可能与在免疫性POF的发生发展有关。

左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠血清性激素及IL-6、IL-17水平的影响

目的:探讨左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠血清性激素及IL-6、IL-17水平的影响。方法:SPF级雌性小鼠60只随机分为对照组、模型组、西药组及左归丸组,除对照组外,所有雌鼠足底、腹部多点皮下注射免疫试剂0.15 m L,14 d后再次皮下注射免疫强化试剂0.15 m L,建立免疫性卵巢早衰模型;造模成功第6天,西药组灌胃补佳乐0.15 mg/kg,左归丸组灌胃31.5 g/kg左归丸,对照组和模型组灌胃等量的蒸馏水;各组雌鼠灌胃8周时,取清晨空腹静脉血,ELISA法检测血清中雌激素、卵泡刺激素、黄体生成素,及抗苗勒管激素、抗透明带抗体、基础抑制素B,及IL-6、IL-17水平;摘取雌鼠卵巢及子宫秤取湿重,计算小鼠卵巢系数、子宫系数。结果:与对照组比较,模型组卵巢系数、子宫系数及血清雌激素、抗苗勒管激素、基础抑制素B水平明显降低(P<0.01),卵泡刺激素、黄体生成素及抗透明带抗体、IL-6及IL-17水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,西药组及左归丸组卵巢系数、子宫系数及血清雌激素、抗苗勒管激素、基础抑制素B水平明显升高(P<0.01),卵泡刺激素、黄体生成素及抗透明带抗体、IL-6及IL-17水平明显降低(P<0.01);左归丸组上述指标优于西药组(P<0.01)。结论:左归丸有效下调免疫性卵巢早衰小鼠IL-6、IL-17水平,增加生殖器官重量、改善激素水平,从而保护卵巢功能。

IL-2、IL-6在自身免疫性卵巢早衰患者中的表达及临床意义

目的探讨IL-2、IL-6在自身免疫性卵巢早衰患者中的表达及临床意义。方法选取62例自身免疫性卵巢早衰患者作为POF组,分别测定其常规对症治疗前后IL-2、IL-6浓度水平,另择62例同期体检卵巢功能正常女性作为健康对照组,测定其IL-2、IL-6浓度水平,然后分别进行比较。结果 POF组治疗前血清IL-2、IL-6浓度水平均显著高于治疗后和健康对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论自身免疫性卵巢早衰的发生发展过程与IL-2、IL-6的表达具有相关性,监测血清中IL-2、IL-6的浓度变化能协助自身免疫性卵巢早衰患者的临床诊治,因此具有较大的推广价值。

不同浓度弗氏佐剂对B6AF1小鼠免疫性卵巢早衰模型建立的影响

目的观察不同浓度弗氏佐剂对透明带3多肽(pZP3)诱导的B6AF1小鼠免疫性卵巢早衰(POF)模型的影响。方法取6~8周龄雌性B6AF1小鼠80只,随机分为空白组、不完全弗氏佐剂组、完全弗氏佐剂组[含结核分枝杆菌(TB)1 mg/mL)和不完全弗氏佐剂+TB(3.3 mg/mL)组,应用HE染色法比较不同注射量的弗氏佐剂对POF模型小鼠免疫效果的影响。结果免疫后模型组小鼠卵巢体积萎缩,闭锁卵泡增多,卵泡周围见间质淋巴细胞浸润。不完全弗氏佐剂+TB(3.3 mg/mL)组免疫效果最好,完全弗氏佐剂组次之。结论不同浓度弗氏佐剂联合pZP3均可诱导B6AF1小鼠成功构建POF疾病模型,引起免疫性卵巢炎;含高浓度TB造模效果较好。

外周血巨噬细胞移动抑制因子、人类白细胞DR抗原表达对自身免疫性卵巢早衰的诊断价值

目的探讨外周血巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、人类白细胞DR抗原(HLA-DR)诊断自身免疫性卵巢早衰(APOF)的价值。方法选择2018年6月至2020年6月成都市新都区中医医院(以下简称“我院”)收治124例POF患者。根据APOF诊断标准将患者分为APOF组(45例),NAPOF组(79例),另选择同期我院妇产科门诊体检的60名健康女性为对照组。检测外周血MIF、HLA-DR+CD3+、HLA-DR+CD19+、抗卵巢抗体(AOAb)、抗透明带抗体(AZpAb)、抗核抗体(ANA)表达。分析上述指标与APOF发病的关系以及诊断APOF的价值。结果APOF组AOAb、AZpAb、ANA阳性占比及MIF、HLA-DR+CD3+、HLA-DR+CD19+水平高于NAPOF组和对照组(P<0.05);NAPOF组MIF、HLA-DR+CD3+、HLA-DR+CD19+水平高于对照组(P<0.05)。合并自身免疫性疾病、AOAb阳性、AZpAb阳性、ANA阳性APOF患者MIF、HLA-DR+CD3+、HLA-DR+CD19+水平高于未合并自身免疫性疾病、AOAb阴性、AZpAb阴性、ANA阴性患者(P<0.05)。合并自身免疫性疾病,高MIF、HLA-DR+CD3+、HLA-DR+CD19+水平是APOF发病的危险因素(OR>1,P<0.05)。MIF、HLA-DR+CD3+、HLA-DR+CD19+、联合MIF和HLA-DR+CD3+、HLA-DR+CD19+诊断APOF的曲线下面积分别为0.717、0.736、0.705、0.934。结论APOF患者外周血MIF、HLA-DR+CD3+、HLA-DR+CD19+水平升高,高MIF、HLA-DR+CD3+、HLA-DR+CD19+水平与APOF发病密切相关,可为APOF诊断提供参考。