FAS基因突变导致自身免疫性淋巴细胞增生综合征(ALPS)一例

目的探讨1例FAS基因突变导致ALPS的临床特征、基因变异及其蛋白表达水平。方法患儿为男性,婴幼儿期起病,慢性、非恶性淋巴结和肝脾肿大,伴自身免疫性溶血性贫血、血小板减少及粒细胞减少。采用流式细胞仪检测双阴性T淋巴细胞和FAS蛋白表达。采用PCR方法扩增患儿及父母FAS基因组DNA。采用RT-PCR扩增患儿及父母FAS mRNA。PCR产物直接进行双向序列测定及FAS突变基因表达频率测定。结果患儿CD3+CD4-CD8-TCRαβ+T细胞12.68%,T淋巴细胞上FAS蛋白的表达为9.96%,较正常对照降低。基因检测为患儿FAS基因4号外显子93位碱基错义突变(T>A),导致FAS蛋白第143位氨基酸由丝氨酸替换为半胱氨酸(Ser14Cys),其父为携带者。患儿FAS基因突变基因表达频率为95%,其父为60%。结论经临床、免疫学筛查和基因分析,患儿可诊为ALPS(g:18451T>A c:773T>A Ser143Cys),突变基因表达的频率可能影响疾病外显率。

自身免疫性淋巴细胞增生综合征1例并文献复习

报道2013年10月北京大学第一医院诊治的1例自身免疫性淋巴细胞增生综合征(autoimmune lymphoproliferative syndrome,ALPS)的临床诊疗过程,并复习国内外最新文献。该男性患儿就诊时为11个月,生后早期起病,病程中主要表现为淋巴结、肝脾肿大,伴溶血性贫血、慢性感染(巨细胞病毒、细小病毒B19感染以及慢性腹泻),外周血双阴性T细胞(double negative T cells,DNTs)明显升高(占淋巴细胞的27.18%,CD3+T淋巴细胞的35.16%),多种自身抗体阳性(包括抗核抗体、双链DNA、类风湿因子)以及高丙种球蛋白血症。父母双方均体健,否认自身免疫性疾病病史。经基因诊断提示存在FAS基因c.309A>C杂合突变,位于FAS基因3号外显子,导致FAS蛋白第103位氨基酸由精氨酸(R)突变为丝氨酸(S)。但基因结果仍需进一步验证父母双方基因及正常对照,明确是否为致病基因。该患儿临床经过糖皮质激素治疗,并在外院接受霉酚酸酯治疗,贫血改善,仍有反复感染,肝脾回缩但未至正常。ALPS的特征是编码细胞Fas/Fas L凋亡途径的基因发生突变引起的一组临床症候群,特点突出,早期容易误诊为其他疾病,需对外周血淋巴细胞进行分析,治疗手段主要依赖于免疫抑制剂治疗。

新生儿期发病的自身免疫性淋巴细胞增生综合征1例

本文报道1例新生儿期发病的自身免疫性淋巴细胞增生综合征患儿,主要表现为良性淋巴结病伴肝脾肿大、自身免疫性溶血性贫血、血小板减少,FAS基因3号外显子c.310T>A和9号外显子c.699-701del杂合变异。

自身免疫性淋巴细胞增生综合征的发病机制和诊断进展

自身免疫性淋巴细胞增生综合征（ALPS）是由于基因突变导致FAS介导凋亡途径存在缺陷引起的淋巴细胞内稳态失调所致。ALPSl临床上主要表现为血液和淋巴器官中双阴性T细胞增加，淋巴细胞增生，自身免疫性血细胞减少和肿瘤倾向。笔者就ALPS的发病机制、诊断标准、分类，以及鉴别诊断进行综述。

应用西罗莫司安全有效治疗并发血细胞减少的儿童自身免疫性淋巴细胞增生综合征——单中心、回顾性队列研究

目的:自身免疫性淋巴细胞增生综合征(ALPS)是一种常在幼年发病、并发免疫性血细胞减少而需要药物控制的遗传性免疫缺陷病。而糖皮质激素作为传统治疗药物将影响处于生长发育的患儿。西罗莫司通过精准抑制mTOR通路、诱导T细胞凋亡而成为治疗的新选择,但尚缺乏其安全性和有效性数据。本文旨在通过总结我中心伴发免疫性血细胞减少的ALPS患儿西罗莫司用药数据,为该药在ALPS患儿的应用提供数据。方法:单中心、回顾性队列研究,收集自2016年至今在我中心确诊并应用西罗莫司治疗超过1年的12例并发免疫性血细胞减少的ALPS患儿,对治疗的有效性和安全性进行评价。结果:12例患儿中位年龄3.5(110)岁,中位病程10个月(1个月3年)。12例(100%)均存在免疫性血小板减少:其中7例(58.33%)累及全血细胞,4例(33.33%)累及两系血细胞,1例(8.33%)仅累及免疫性血小板减少。12例(100%)存在中度以上脾肿大(3例达Ⅲ度),11例(91.67%)伴淋巴结肿大。疗效方面:(1)疗程3个月时,12例(100%)血细胞减少缓解,9例(75.00%)达完全缓解;10例(83.33%)淋巴组织增殖缓解,3例(25.00%)达完全缓解。(2)疗程12个月时,12例(100%)血细胞减少缓解,11例(91.67%)达完全缓解;12例(100%)淋巴组织增殖缓解,8例(66.67%)达完全缓解。(3)患儿血细胞减少先于淋巴增殖缓解:血细胞减少中位达完全缓解时间3周(150周)。(4)缓解相关因素:ALPS-FAS及ALPS-FASLG突变患儿于3个月评估点均达血常规及淋巴增殖缓解,时间早于其余ALPS患儿。应用3个月、6个月达完全缓解者病初双阴性T细胞比例明显增高。安全性方面:1例患儿服药期间谷丙转氨酶升高,2例口腔溃疡,尚无患儿因服药继发感染。结论:西罗莫司治疗儿童期并发血细胞减少的ALPS起效快、缓解率高:疗程1年时血细胞减少及淋巴增殖总有效率高达100%(血细胞减少完全缓解率91.67%、淋巴增殖完全缓解率66.67%)。患儿血细胞减少缓解早于淋巴组织增殖。ALPS-FAS及ALPS-FASLG突变患儿及用药前双阴性T细胞比例明显增高可能是更快达完全缓解的预测指标。西罗莫司不良反应较轻微,可耐受。提示西罗莫司有望成为诊断明确伴免疫性血细胞减少的ALPS患儿的首选治疗药物。

自身免疫性淋巴细胞增生综合征的研究进展

自身免疫性淋巴细胞增生综合征（ALPS）是一种因Fas介导的细胞凋亡缺陷，导致淋巴细胞自身稳态和正常免疫耐受障碍的少见疾病，其临床特征表现为淋巴结病、脾大、自身免疫性疾病、恶性肿瘤等。笔者拟对ALPS的发病机制、临床表现、诊断及治疗进展进行综述如下。

自身免疫性淋巴细胞增生综合征发病机制的研究进展

自身免疫性淋巴细胞增生综合征（ALPS）是一种常染色体显性遗传的淋巴细胞障碍性疾病,患者以淋巴结和（或）脾脏肿大为主要表现,易并发淋巴瘤,但若能对其早期干预、定期随访,患者一般预后较好.该病主要由介导T淋巴细胞凋亡的FAS等相关基因突变所致,同时增强的细胞增殖信号如PI3K-AKT-mTOR途径也发挥重要作用,共同导致以双阴性T细胞（DNT）为代表的免疫细胞和以白细胞介素10（IL-10）为代表的细胞因子相继发生变化而致病.近年国内外对ALPS的发病机制,尤其是遗传学和免疫学方面进行了深入的研究,取得了一定的进展,这对指导临床诊疗十分重要.

自身免疫性肝病合并干燥综合征一例报道

自身免疫性肝病是因体内免疫功能紊乱引起的一组特殊类型的慢性肝病,包括自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis, AIH)、原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis, PBC)、原发性硬化性胆管炎(primary sclerosing cholangitis, PSC)以及PBC、PSC和AIH相互重叠的重叠综合征(overlap syndromes, OS)[1]。原发性干燥综合征(Primary Sjogren syndrome,p SS)是一种系统性自身免疫性疾病,组织学特征是大量淋巴细胞浸润于唾液和泪腺,主要浸润细胞为T细胞和B细胞[2]。

淋巴细胞亚群在鉴别低增生性骨髓增生异常综合征和再生障碍性贫血中的价值(英文)

目的:探讨低增生性骨髓增生异常综合征(hypo-MDS)和再生障碍性贫血(AA)外周血淋巴细胞亚群及其他临床指标的差异。方法:应用流式细胞术检测hypo-MDS(n=25)和AA(n=33)患者的淋巴细胞亚群,同时分析两组间外周血象、生化指标、骨髓各细胞组分以及异常染色体的差异。结果:AA组CD8^(+)T细胞比例明显高于hypo-MDS组(P=0.001),而CD4^(+)T细胞比例和CD4^(+)/CD8^(+)比率明显低于hypo-MDS组(P=0.015;P=0.001)。与hypo-MDS组相比,AA组CD4^(+)、CD8^(+)活化T(TA)细胞及记忆Treg比例均明显下降(P=0.043;P=0.015;P=0.024),而AA组CD8^(+)初始T(TN)细胞比例较高(P=0.044)。与AA组相比,Hypo-MDS组外周血淋巴细胞数明显降低(P=0.025),总胆红素(TBil)、乳酸脱氢酶(LDH)、维生素B12水平及骨髓原始细胞比例均明显升高(P=0.019;P=0.023;P=0.027;P=0.045)。结论:AA组和hypo-MDS组CD4^(+)和CD8^(+)TA细胞、记忆Treg细胞及CD8^(+)TN细胞比例差异明显,可为鉴别这两种疾病提供重要依据。

自身免疫性肝病重叠综合征患者外周血中调节性T淋巴细胞水平研究

目的:观察自身免疫性肝炎-原发性胆汁性胆管炎重叠综合征(AIH-PBC OS)患者外周血中调节性T淋巴细胞分布特点。方法:回顾性分析2013年1月~2018年1月我科就诊的AIH-PBC OS患者23例,自身免疫性肝炎(AIH)94例,予肝功能、凝血项、免疫球蛋白G、自身免疫抗体和调节性T淋巴细胞(Tregs细胞)水平检测,同时选取健康人20例,予调节性T淋巴细胞检测。结果:OS组患者γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶和免疫球蛋白G水平(分别为166.7±135.6U/L、261.1±201.7 U/L和24.1±10.7g/L)显著高于AIH组(104.1±83.8U/L,149.2±125.6U/L和18.7±6.4g/L)(均P<0.05);OS组、AIH组患者Treg细胞/辅助性T细胞比值(5.7±2.5%vs.5.7±2.4%)无显著性差异(P>0.05),但低于健康对照组(7.4±1.4%)。结论 :AIH-PBC OS与AIH患者均有Tregs细胞比例的下降,可能是AIH-PBC OS免疫发病机制之一。

抗人T-淋巴细胞兔免疫球蛋白治疗骨髓异常增生综合征患者的护理

采用抗人T-淋巴细胞兔免疫球蛋白(ATG)对6例骨髓异常增生综合征(MDS)患者进行1个疗程治疗。结果用药过程中2例出现血清病,3例出现出血症状,1例出现静脉炎,经对症治疗护理后好转。治疗后3周至半年,2例患者血常规指标改善,3例患者由血制品依赖输注改善为不依赖输注。提出在治疗过程中加强对药物不良反应的观察护理,可有效减少药物不良反应的发生,有助于保证ATG治疗效果。

骨髓增生异常综合征患者淋巴细胞绝对值计数与地西他滨治疗反应的关系

目的探计第1疗程地西他滨(DAC)治疗后骨髓增生异常综合征(MDS)患者淋巴细胞计数与患者对DAC治疗反应的关系。方法研究对象为2014年1月-2016年12月在河北大学附属医院血液科接受过DAC治疗的MDS和MDS继发的急性髓系白血病(AML)患者35例。根据第1个疗程DAC治疗后28~35d血常规中的淋巴细胞计数,将患者分为高淋巴细胞组(H-Lym组,淋巴细胞计数≥1.2×10~9/L)和低淋巴细胞组(L-Lym组,淋巴细胞计数<1.2×10~9/L)。采用Pearsonχ2检验分析两组患者基线资料的差异,采用t检验分析两组患者第1疗程DAC治疗前后淋巴细胞计数的变化,采用Kaplan-Meier法绘制无进展生存期(PFS)曲线并进行log-rank检验对两组累积生存率进行比较。结果 35例患者中H-Lym组15例,L-Lym组20例,两组基线淋巴细胞水平差异无统计学意义(P>0.05),两组基线资料中仅骨髓原始细胞≥10%的患者比例的差异有统计学意义(P<0.05)。H-Lym组患者在第1疗程DAC治疗后淋巴细胞计数较诊断时升高,但差异无统计学意义(P>0.05),而L-Lym组则明显低于诊断时的水平(P<0.05)。H-Lym组总反应率(80.0%)明显高于L-Lym组(40.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。H-Lym组的中位PFS为10个月,L-Lym组为7.6个月,两组差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示,淋巴细胞计数绝对值低是MDS疾病进展的预后因素(P<0.05)。结论第1疗程DAC治疗后淋巴细胞计数≥1.2×10~9/L的患者具有较高的总反应率和较长的无进展生存期。

地西他滨治疗后28 d的淋巴细胞预测骨髓增生异常综合征患者的治疗反应

目的:探索能够早期预测地西他滨(DAC)在骨髓增生异常综合征(MDS)中治疗反应的临床指标。方法:对55例MDS患者DAC治疗效果进行回顾性分析,根据患者DAC首次治疗后28天的淋巴细胞水平将患者分为高淋巴细胞组(H-Lym≥1. 2×109/L)和低淋巴细胞组(L-Lym <1. 2×109/L),比较两组的总反应率(ORR)、无进展生存期(PFS)之间的差异。结果:55例患者中,H-Lym组ORR为76. 0%,L-Lym组ORR为50. 0%,二者之间统计学差异显著(P <0. 05); H-Lym组中血小板≥100×109/L比例非常显著高于L-Lym组(72. 0%vs 20. 0%)(P<0. 01)。H-Lym组患者的中位PFS时间15. 7个月,L-Lym组的中位PFS 8. 5个月,二者之间统计学差异显著(P<0. 05),L-Lym组患者疾病进展的风险非常显著高于H-Lym组,为H-Lym组的4. 45 (95%CI:1. 58-12. 59)(P<0. 01)。结论:DAC首次治疗后28 d淋巴细胞≥1. 2×109/L的患者具有较高的总反应率和较长的无进展生存期,可作为预测地西他滨治疗反应的早期临床指标。

环孢素A治疗再障和骨髓增生异常综合征T淋巴细胞异常激活的变化

研究再生障碍性贫血(AA)用环孢素A(CsA)治疗前后和骨髓增生异常综合征(MDS)患者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞培养前后早期激活标志CD69的表达及其意义。将外周血在PHA20μg/ml条件下进行全血细胞培养,于0h和4h分别用双色免疫荧光标记流式细胞仪对CD4+、CD8+T淋巴细胞CD69的表达进行分析。发现PHA刺激前初治SAA和MDS-RA+MDS-RAS患者CD4+、CD8+细胞CD69的表达率增高,CAA与RAEB+RAEB-T患者CD8+细胞CD69的表达率增高;PHA刺激后AA与MDS患者CD4+、CD8+细胞表达CD69明显增强,AA患者CD4+细胞CD69的表达率高于CD8+细胞。CsA治疗后SAA患者PHA刺激前CD4+、CD8+细胞CD69的表达率较治疗前明显减低,CAA患者CD8+细胞CD69的表达率较治疗前明显减低。治疗后AA患者PHA刺激后CD4+、CD8+细胞CD69的表达率较治疗前明显减低。CsA治疗有效的AA患者治疗前PHA刺激前后CD4+、CD8+细胞CD69的表达率明显增高,治疗后明显减低。初治AA患者PHA刺激前后CD4+细胞CD69的表达率均明显高于MDS患者。说明T细胞早期活化及其活化潜能增强,以及产生针对自身造血干/祖细胞的细胞毒效应在AA和MDS发病中起重要作用,CsA能抑制AA患者T细胞的早期激活。

23例骨髓增生异常综合征患者骨髓淋巴细胞CD4/CD8表达水平临床观察

目的根据骨髓流式细胞(FCM)白血病免疫分型报告,观察23例骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓淋巴细胞CD4/CD8水平,比较不同分型间差异有无统计学意义,分析MDS的免疫异常与分型相关性。方法将入选病例根据WHO分型(RAEB 8例、RCMD 8例、RA 7例)。观察不同分型CD4/CD8的表达水平差异有无统计学意义。结果 RA、RAEB和RCMD组CD4/CD8水平比较表达有显著差异。结论 MDS是一组与免疫异常有关的骨髓发育异常疾病,其免疫异常与分型及预后有一定关系。

抗T淋巴细胞单克隆抗体治疗骨髓增生异常综合征

用抗T淋巴细胞单克隆抗体SMU3(抗CD3)和SMU8(抗CD8)治疗10例骨髓增生异常综合征(MDS),结果表明:2例明显进步,5例进步,白细胞和血红蛋白显著升高。治疗前CD4^+细胞少,CD8^+细胞多,CD4/CD8比值降低或倒置,HLA-DR抗原高表达,与对照组比较均有显著差异,治疗后T淋巴细胞亚群比例恢复,HLA-DR表达降低。T淋巴细胞各亚群比例失调和功能异常是MDS的诱发因素之一。

剔除自体活化CD4 T淋巴细胞改善骨髓增生异常综合征祖细胞体外培养集落形成

目的探讨自体活化CD4 T(CD4+/CCR5+T)淋巴细胞对骨髓增生异常综合征(MDS)祖细胞体外培养细胞集落形成情况的影响。方法用免疫磁珠体外剔除16例低危MDS患者和5例正常人骨髓单个核细胞(BMNC)中CD4+/CCR5+T淋巴细胞,剔除CD4+/CCR5+T及加回CD4+/CCR5+T(4倍)的BMNC分别接种于甲基纤维素培养基中培养,比较培养后细胞集落生长情况,以及培养前后髓系细胞抗原和克隆细胞比例的变化。结果①MDS组剔除CD4+/CCR5+T较加回CD4+/CCR5+T(4倍)的BMNC培养后,细胞集落显著增加(P<0.05),加回CD4+/CCR5+T(4倍)的BMNC培养后无细胞集落形成。而正常对照组剔除CD4+/CCR5+T和加回CD4+/CCR5+T(4倍)的BMNC培养后,细胞集落计数无统计学差异(P>0.05)。②MDS组剔除CD4+/CCR5+T的BMNC培养后,红系集落计数与Th1(CD4+/IFN-γ+)细胞数量呈正相关(r=0.55,P<0.05)。③细胞培养前后,MDS组CD34阳性细胞比例无明显下降[(1.8±2.4)%vs(1.4±1.6)%](P>0.05),CD33和CD13阳性细胞比例均有显著下降[(20.3±5.8)%vs(12.1±3.7)%和(21.1±6.4)%vs(17.1±5.4)%](P<0.05);而正常对照组CD34、CD33及CD13阳性细胞比例在培养前后均无明显变化(P>0.05)。④FISH分析5例核型异常MDS患者培养前后克隆细胞比例变化,+8及20q-克隆细胞比例增加,而-7克隆细胞比例无明显变化。结论选择性剔除骨髓CD4+/CCR5+T淋巴细胞,可以增加某些类型MDS骨髓祖细胞体外培养细胞集落形成,并改善MDS骨髓早期髓系细胞堆积现象,促进分化。增加的集落细胞以异常克隆细胞或残存正常细胞为主尚不能定论。