牙周炎患者自身组织核酸刺激小鼠巨噬细胞后对破骨相关因子mRNA表达的影响

目的检测牙周炎患者自身组织核酸刺激巨噬细胞后破骨相关因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)p35、IL-12p40、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、活化T细胞核因子1(NFATc1)、核激活因子κB受体(RANK)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达,观察牙周炎患者自身组织核酸对巨噬细胞向破骨细胞分化的影响作用。方法采集翻瓣术中慢性牙周炎患者炎症牙周组织及正畸患者健康牙拔除术获取的健康牙周组织,提取组织总RNA逆转录cDNA。培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,加入质量浓度1μg·mL-1的特定序列寡核苷酸MT01共孵育3 h后(以1μg·mL-1的PBS作为对照),加入已提取的炎症牙周组织及健康牙周组织cDNA(质量浓度为1μg·mL-1)。实验分4组:健康组织cDNA,炎症组织cDNA,MT01+健康组织cDNA,MT01+炎症组织cDNA。4组细胞分别孵育3、6、12、24 h,采用实时定量聚合酶链反应法检测破骨相关因子IL-6、IL-12p35、IL-12p40、MMP-9、NFATc1、RANK及TNF-αmRNA的表达,进行两两组间比较。结果牙周炎患者自身组织核酸可上调RAW264.7破骨相关因子IL-6、IL-12p35、IL-12p40、MMP-9、NFATc1、RANK及TNF-αmRNA的表达;在免疫抑制剂MT01的作用下,牙周炎患者自身组织核酸上调RAW264.7内破骨相关因子mRNA的表达状况受到抑制。结论牙周炎患者自身组织核酸可以影响小鼠巨噬细胞向破骨细胞的分化。

牙周炎患者自身组织核酸对小鼠巨噬细胞中NLRP3 mRNA表达的影响及其意义

目的:检测牙周炎患者自身组织核酸刺激小鼠巨噬细胞后炎性相关因子NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶1 (caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素18 (IL-18)mRNA表达水平,探讨牙周炎患者自身组织核酸对小鼠巨噬细胞中炎性相关因子的作用。方法:于慢性牙周炎患者翻瓣术中采集炎性牙周组织、于牙周组织健康患者冠延长术中采集健康牙周组织,分别提取组织总RNA逆转录成cDNA (cDNA质量浓度为1mg·L^(-1))。培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,分为对照组和实验组,分别加入上述提取的健康牙周组织cDNA (健康牙周组织)和炎症牙周组织cDNA (炎症牙周组织)共孵育。共孵育4、6和8h后,实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组RAW264.7细胞中NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18mRNA表达水平。结果:显微镜下观察,小鼠巨噬细胞RAW264.7生长状态良好,细胞形态似圆形和多边形,胞浆透明,胞体丰满。与对照组比较,实验组在4、6和8h时RAW264.7细胞中NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18mRNA表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),6h时实验组RAW264.7细胞中NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18mRNA表达水平最高。结论:牙周炎患者自身组织核酸可促进小鼠巨噬细胞中炎性相关因子mRNA表达,牙周炎患者自身组织核酸对小鼠巨噬细胞的活化具有免疫调节作用。