臭参水提物通过miR-3081-3p及靶基因Ubn2对小鼠结肠癌的调控研究

为了探究臭参水提物通过miRNA对小鼠结肠癌的调控效果,试验首先采用高通量测序技术测定结肠癌模型小鼠的结肠组织中miRNA表达水平,通过GO注释分析和KEGG富集分析对差异表达miRNA进行功能预测,以筛选出的表达差异较显著且尚无相关报道的miR-3081-3p为研究对象并预测其靶基因;然后在NIH-3T3细胞中转染miR-3081-3p模拟物(mimics)并添加臭参水提物进行孵育,通过Western-blot检测其靶基因的表达水平,并利用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果表明:在结肠癌模型小鼠的结肠组织中共发现117个显著差异表达的miRNA,其靶基因主要富集在肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)、Ras、泛素化及NF-κB等信号通路中;其中miR-3081-3p在结肠癌模型小鼠中表达量显著下降54%,其靶基因Ubn2表达量显著上升(P<0.05);在NIH-3T3细胞中,臭参水提物孵育和转染miR-3081-3p模拟物(mimics)均可以提高miR-3081-3p的表达量并降低靶基因Ubn2的表达量,还可降低NIH-3T3细胞凋亡水平。说明臭参水提物可以通过miR-3081-3p下调靶基因Ubn2的表达量,抑制肿瘤的发生和发展,具有一定抗肿瘤作用。