一株产α-半乳糖苷酶菌的分离与选育

主要研究了α-半乳糖苷酶产生菌的筛选及选育。以发酵豆制品和用于食品酿造的菌株为材料,通过在平板上显示蓝色作为初筛依据,结合摇瓶复筛获得1株产α-半乳糖苷酶酶活高的曲霉菌株,其96h酶活达到22.27U/mL,初步鉴定为臭曲霉,并定名为AspergillusfoetidusZU-G。该菌株经60Co-γ辐射诱变和N+离子束诱变,其酶活比各出发菌株分别提高了20.7%和23.4%,分别达到26.88U/mL和33.18U/mL。

α-半乳糖苷酶的液体发酵条件和酶学性质研究

研究了臭曲霉ZU-G1液体发酵产α-半乳糖苷酶的最佳生产条件及其酶学性质。试验结果表明,最适发酵条件为:温度28℃,转速200r/min,装液量30mL(250mL三角瓶),接种量6.6%,种子培养18h后接种,发酵144h后α-半乳糖苷酶酶活达到最大值。在此发酵条件下α-半乳糖苷酶最适pH5.0,于28℃放置7h,在pH3.5～6.0内稳定性较好;该酶的最适温度为60℃,在50℃以下存放稳定性较好。Ag+可强烈抑制该酶的活性,Ca2+、Mg2+、Mn2+和Zn2+的激活效果随浓度而变。1mmol/L甘露醇、抗坏血酸和2mmol/L蜜二糖对酶的热稳定性保护效果好。