臭氧氧化预处理对大鼠肾I/R组织Toll样受体4表达的影响

目的观察臭氧氧化预处理(OzoneOP)对大鼠肾缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,I/R)组织内Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法将48只大鼠随机分为假手术组、假手术+OzoneOP组、I/R组、I/R+OzoneOP组,每组各12只。术前15d始对包含OzoneOP的大鼠经直肠吹入氧气和臭氧的混合气体5～5.5 ml(臭氧浓度50 mg/L,1 mg/kg,每日1次),之后按分组要求建立原位大鼠单侧肾I/R动物模型。24 h后检测尿素(BUN)、肌酐(Cr)、TLR4 mRNA表达、TLR4蛋白表达情况。结果 I/R组和I/R+OzoneOP组BUN、Cr、TLR4 mRNA含量、TLR4蛋白含量明显高于假手术组和假手术+OzoneOP组,差异有统计学意义(P<0.05),而I/R组上述4项指标又明显高于I/R组+OzoneOP组,差异均有统计学意义(P<0.05),而假手术组与假手术+OzoneOP组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 OzoneOP可以减轻肾I/R,其机制可能通过抑制TLR4的表达而发挥作用。

造纸法再造烟叶废水的臭氧氧化法预处理

为探寻去除造纸法再造烟叶废水中有机污染物的有效途径,采用臭氧氧化法预处理造纸法再造烟叶废水二级生物处理出水,考察了p H、反应温度、反应时间、臭氧浓度和废水初始CODCr浓度对废水预处理效果的影响。结果表明:1在p H 8.0、反应温度30℃、臭氧浓度36.60 mg/L、废水初始CODCr浓度641 mg/L条件下,经臭氧氧化90 min后废水CODCr去除率达到77.36%;2臭氧能有效降解废水中的羰基、羟基等发色、助色基团,可使废水的色度去除率达到99%。3臭氧氧化处理废水60 min后,废水的BOD5/CODCr由0.46升至0.72,表明废水的可生化性明显提高,有利于后续的生物处理工艺对废水中有机污染物的降解。

臭氧氧化预处理对体外大鼠肾小管上皮细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察在细胞水平臭氧氧化预处理（OzoneOP）对大鼠肾小管上皮细胞再灌注损伤后的保护作用。方法细胞同步化24h后分成3组，正常组、缺血再灌注（I／R）组和OzoneOP组。正常组：更换对照缓冲液1ml，3h后更换2m1完全培养液培养24h。I／R组：更换缺血缓冲液1ml，置于三气培养箱中3h模拟缺血，后更换2ml完全培养液在正常条件下培养24h模拟再灌注。OzoneOP组：在模拟缺血前，加入2ml臭氧化的培养液并作用2h，余同I／R组。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率，并进行超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的检测，Western blot检测B细胞淋巴瘤／白血病-2（bcl-2）、bcl-2相关X蛋白（bax）的表达。结果正常组、I／R组和OzoneOP组的凋亡率分别为（4．58±0．35）％、（32．16±3．27）％、（18．73±1．52）％，SOD活性分别为（14．31±1．31）、（7．03±3．94）、（10．45±2．35）U／mg蛋白，MDA含量分别为（0．48±0．12）、（2．13±1．44）、（1．36±0．59）nmol／mg蛋白。I／R组与正常组比较，bcl-2／bax比率的降低（P〈0．05），而OzoneOP可以提高bcl-2／bax的表达比率（P〈0．05）。结论臭氧氧化预处理对肾小管上皮细胞的I／R损伤具有保护作用，其机制可能通过调节bcl-2／bax的比率来实现。

臭氧氧化预处理在肾缺血再灌注损伤中对内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的观察臭氧氧化预处理对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用及其对内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。方法 38只8周龄雄性Wistar大鼠按随机数字表法随机分为4组。(1)假手术组(n=8):仅切除右肾;(2)缺血再灌注组(n=10):切除右肾、游离左肾后夹闭左肾动、静脉45 min再开通;(3)臭氧氧化预处理组(n=10):与缺血再灌注组建模方法一致,但在建模前15 d起每天1次经直肠灌注法吹入氧气和臭氧的混合气体5~5.5 mL;(4)氧气预处理组(n=10):与臭氧氧化预处理组建模方法一致,但经直肠仅吹入氧气(13 mg/kg)。建模后24 h检测各组大鼠血清肌酐、血尿素氮和血清一氧化氮浓度;48 h后采用免疫组织化学法和逆转录PCR法检测各组大鼠肾组织eNOS表达;蛋白质印迹法检测肾组织胞浆eNOS含量。结果建模后24 h,缺血再灌注组大鼠血清肌酐为(117±20)μmol/L,血尿素氮为(32.8±7.6)mmol/L,血清一氧化氮为(58±12)μmol/L,均高于假手术组,差异有统计学意义(均P<0.05)。臭氧氧化预处理组血清肌酐为(63±16)μmol/L,血尿素氮为(17.4±5.2)mmol/L,低于缺血再灌注组和氧气预处理组,差异有统计学意义(均P<0.05);血清一氧化氮为(84±14)μmol/L,均高于缺血再灌注组和氧气预处理组,差异有统计学意义(均P<0.05)。臭氧氧化预处理组肾组织学Paller评分(41±6)低于缺血再灌注组(62±9),eNOS灰度值(163±15)高于缺血再灌注组(126±18),差异有统计学意义(均P<0.05)。假手术组大鼠肾组织内有微量eNOS mRNA表达,缺血再灌注组、臭氧氧化预处理组和氧气预处理组eNOS mRNA表达增强,均高于假手术组(均P<0.05),臭氧氧化预处理组eNOS mRNA表达高于缺血再灌注组和氧气预处理组(均P<0.05)。假手术组无明显eNOS蛋白表达,缺血再灌注组、臭氧氧化预处理组和氧气预处理组eNOS蛋白表达增强,均高于假手术组(均P<0.05),臭氧氧化预处理组eNOS蛋白表达高于缺血再灌注组和氧气预处理组(均P<0.05)。结论臭氧氧化预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤有保护作用,作用机制可能与其诱导eNOS合成增多、一氧化氮产生增多有关。

臭氧氧化预处理对大鼠肝脏缺血再灌注细胞凋亡的影响

目的观察O_3氧化预处理对大鼠肝脏缺血再灌注后细胞凋亡的影响,探讨O_3对肝脏的保护作用及其可能的作用机制。方法将18只SD大鼠(♂,6~8周龄,250~280 g)随机分为3组:O_3预处理组(OP+IR组)、单纯缺血再灌注组(IR组)和假手术组(S组),每组6只。O_3预处理组每天同一时间点行腹腔注射O_3/O_2混合气体(O_3浓度为50μg·m L^(-1),1 mg·kg^(-1)·d^(-1)),连续注射5 d。S组和IR组则注射相等容积的O_2。缺血45 min后恢复灌注3 h建立70%肝脏缺血再灌注模型(S组仅开腹不阻断肝血流),取左肝叶组织,HE染色观察肝组织形态学变化,TUNEL法测定肝细胞凋亡指数(AI),免疫组化法测定凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达量的变化,并计算Bcl-2/Bax比值。结果与S组比较,OP+IR组与IR组的肝组织电镜观察皆有损伤,OP+IR组的损伤程度较IR组减轻;与S组相比,OP+IR组和IR组的肝细胞凋亡指数增加,Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比值下降(P均<0.05);与IR组相比,OP+IR组的肝细胞凋亡指数降低,Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白减少,Bcl-2/Bax比值增加(P均<0.05)。结论 O_3氧化预处理可以显著减轻大鼠肝脏缺血再灌注后肝细胞的凋亡,其作用机制可能与升高Bcl-2蛋白表达、降低Bax蛋白表达从而上调Bcl-2/Bax比例有关。

臭氧氧化预处理对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的 评价臭氧氧化预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 将18只SD大鼠（雄性,8周龄,250 ～ 300 g）按随机数字表法分为3组：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）和臭氧预处理组（O3＋ I/R组）,每组6只.O3＋I/R组于术前5天连续腹腔注射臭氧和氧气混合气体（臭氧浓度为50 mg/L,1 mg·kg^-1 ·d^-1）.采用结扎肝动脉、门静脉和胆管分支45 min后恢复灌注的方法制备大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型.再灌注3h后抽取腹主动脉血样测定血清ALT和AST水平;处死大鼠取肝组织,测定超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量.结果 与S组比较,I/R组和O3＋I/R组血清ALT和AST水平、肝组织MDA含量升高,I/R组肝组织SOD活性降低（P＜0.05）,O3＋ I/R组肝组织SOD活性升高（P＜0.05）;与L/R组比较,O3＋ I/R组血清ALT和AST水平、肝组织MDA含量降低,肝组织SOD活性升高.结论 臭氧预处理可减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤,其机制可能与抑制脂质过氧化反应有关.