四川泸州发现贵州臭蛙

臭蛙属Odorrana物种广泛分布于亚洲亚热带和热带地区,目前共有64种(Amphibia Web,2023),中国有41种(Lin et al.,2022),贵州臭蛙O. kweichowensis是Li等(2018)发表的新种,目前仅记录分布于贵州省(Li et al.,2018;李仕泽等,2020;中国两栖类,2023)。

中国四川省蛙科一新种——南江臭蛙(两栖纲:无尾目)

对分布于四川、重庆市、贵州、湖北、湖南、安徽和福建的花臭蛙[Odorrana(Odorrana)schmackeri(Boettger,1892)]标本进行了形态比较,结果发现四川省南江和万源县的花臭蛙标本与其他产地的花臭蛙标本在形态特征上存在明显区别,主要是:1)成体雄雌体长之比值较小,约为1∶1.34;2)犁骨齿列短,两内侧间距宽,距内鼻孔远;3)背面深色斑点周围无浅色边缘;4)股后部深色斑大而稀疏;5)趾间蹼较弱,第四趾蹼达远端关节下瘤;6)腹内成熟卵的动植物极均为乳白色。故将四川省南江和万源的标本订为新种--南江臭蛙[Odorrana(Odorrana)nanjiangensis,sp.nov.]。

竹叶臭蛙的分类学研究Ⅱ.两新种记述(两栖纲:蛙科)

据记载竹叶臭蛙Odorranaversabilis分布于广西、贵州、湖南、福建、浙江、安徽、广东、海南。作者对比研究了 7个省的 13个居群标本的形态特征 ,可分为 3个形态型 ,这 3个形态型标本的特征彼此差异明显 ,被确定为 3个不同的种 ,其中包括 2个新种 ,即小竹叶臭蛙O .exiliversabilissp .nov .和鸭嘴臭蛙O .nasutasp .nov .。为印证形态分类的结果 ,又采用形态数值性状标准差别分析和DNA指纹实验分析 ,其结果与形态特征分类研究结果一致。本文对 2个新种的形态和生物学资料进行了记述。

竹叶臭蛙的分类学研究Ⅰ.各地理居群的分类探讨(两栖纲:蛙科)

采用形态特征比较 ,对 7省 13个居群的竹叶臭蛙Odorranaversabilis的标本进行了研究 ,结果表明 :它们的形态特征差异明显 ,可以分为 3个形态型 ;同时经数值性状标准判别分析和DNA指纹分析印证其结果与形态学研究结果相吻合。据此将 3个形态型标本确定为 3个种 ,其中包括2新种。本文重新界定了 3个种的分布范围。

华东四省天目臭蛙分类修订及分布格局

运用形态学比较和12S mt DNA序列比对,对华东4省原记载的花臭蛙Odorrana schmackeri地理种群与天目臭蛙O.tianmuii、黄岗臭蛙O.huanggangensis及花臭蛙模式产地湖北宜昌种群进行比较研究。浙江、安徽、江苏、江西(三清山)花臭蛙形态学特征与天目臭蛙相吻合。基于Kimura 2-parameter模型计算花臭蛙各地理种群与天目臭蛙、黄岗臭蛙及花臭蛙湖北宜昌种群的遗传距离,结果显示,浙江、安徽、江苏、江西(三清山、彭泽)花臭蛙与湖北宜昌种群的遗传距离为0.067~0.069,与黄岗臭蛙的遗传距离为0.027~0.029,与天目臭蛙的遗传距离仅为0~0.001。因此,长江中下游以南、江南丘陵东段安徽南部、江苏、浙江、江西东北部信江以北、鄱阳湖以东的低山丘陵地带,原记录的花臭蛙应修订为天目臭蛙;江西省东北部信江以南的武夷山区为黄岗臭蛙分布范围,花臭蛙则分布于赣江鄱阳湖以西的赣西山地。赣江以东、抚河以西以及闽东丘陵地区花臭蛙的分类归属尚待确定,华东地区花臭蛙复合体的物种分化是否与水系造成的地理阻隔相关,有待深入研究。

无指盘臭蛙皮肤抗菌肽的分离纯化与氨基酸序列测定

在抗菌活性跟踪下对四川冕宁产无指盘臭蛙(Odorrana grahami)皮肤分泌物进行一系列层析分离,最终纯化得到4种抗菌肽,分别命名为Odorgrin A、Odorgrin B、Odorgrin C和Odorgrin D.质谱测得单一同位素分子量Mr分别为3364.8、3817.9、4859.4和3287.9.Edman降解法测得OdorgrinA的氨基酸序列为GLLDTFKNLALNAAKSAGVSV-LNSLSCKLSKTC.将以上结果与国内外对该物种抗菌肽研究的已有结果进行了比较分析,证明本研究分离到的4种抗菌肽与前人分离到的部分抗菌肽间具有一致性.

中国臭蛙类一新种

通过形态学比较和12S、16S mtDNA序列比对分析,结果显示分布于浙江省西天目山的花臭蛙(Odorrana schmackeri Boettger,1892)与地模产地花臭蛙以及花臭蛙2个新隐种南江臭蛙和黄岗臭蛙之间存在显著差异,其主要鉴别特征为:1)雌性成体体长约为雄性的1.75倍;2)头长大于头宽,吻端钝尖;3)后肢前伸胫跗关节达眼鼻间;4)趾间全蹼,第4趾两侧及第2、3趾内侧蹼以缘膜达趾吸盘基部;5)背部褐色斑稀疏,形状、大小、排列不规则;6)四肢背面浅褐色横纹宽窄不一,胫部横纹4或5条;7)雄性具1对咽侧下外声囊,背面有肉粉色雄性线,第1指具乳白色婚垫;8)雌性成熟卵动物极棕褐色、植物极米黄色,卵径2.17 mm左右.故将浙江省西天目山区的花臭蛙鉴定为一新种——天目臭蛙(Odorranatianmuii sp.nov.).

无指盘臭蛙皮肤分泌液中促胰岛素释放肽的分离纯化与活性初步研究

通过葡聚糖Sephadex G-50凝胶过滤和反相高压液相层析等手段,对无指盘臭蛙皮肤分泌液进行分离纯化,得到了高纯度的多肽分离峰。分别采用体外培养的大鼠胰岛和INS-1胰岛β细胞系检测分离峰的促胰岛素释放活性。结果表明,所得多肽既可促进原代培养的大鼠胰岛分泌胰岛素,又可以促进INS-1细胞胰岛素释放;运用飞行质谱仪测定该促胰岛素释放肽的相对分子质量,其大小为1 868。此外,利用鸡胚尿囊绒毛膜(CAM)体内模型检测,发现该多肽还具有显著的抑制血管生成活性。

我国臭蛙属(两栖纲:蛙科)的系统发育

为探讨臭蛙属的种间亲缘关系与其起源和分化 ,采用PAUP3 1软件对我国的 16种臭蛙的 2 9项分类性状进行系统发育关系的研究。结果表明 ,臭蛙属物种形成 1个单系群 ,可以划分为 4个种组 ;表明了臭蛙属中国物种间的亲缘关系 ;无指盘臭蛙和云南臭蛙是本属中最原始的物种 ,鸭嘴臭蛙等是较特化的物种 ;原始臭蛙可能起源于横断山区和云南西部高原 ,贵州高原可能是臭蛙的分化中心 ;各种组内相近种的地理替代呈南北方向更替 ,而种组间则呈东西方向更替 ;原始物种多分布于中国西南部 ,较进化或特化物种多分布于中国东部和东南部及海岛上 ;其种组亲缘关系与地理分布格局显示出一致性。

无指盘臭蛙体内寄生双睾虫属多盘吸虫一新种

于云南一平浪镇无指盘臭蛙Rana grahami Boulenger膀胱内检获单殖吸虫多盘科双睾虫属1新种,以宿主名命名为无指盘臭蛙双睾虫Diplorchis grahami sp.nov.。检查36只无指盘臭蛙,感染率为19.4%,感染虫体1～94枚,平均感染强度为31,相对密度为6.02。新种模式标本具有典型双睾属多盘吸虫的特征:消化道两侧均未形成肠盲突,末端不形成联合,不延伸进入后吸器。阴道孔隆起明显,子宫具升支和降支,向后延伸至后吸器内。卵黄腺发达,滤泡状,沿肠管两侧分布至后吸器内。生殖棘7枚排列为冠状。本双睾虫体长平均4.627mm,虫体最宽处平均1.611mm,与黑斑蛙双睾虫、拉氏双睾虫和杭州双睾虫均属于大型虫体,但新种的几丁质结构与上述3种已记录的双睾虫存在显著差异,其后吸器相对较小,平均为0.681mm×1.178mm,吸盘直径平均284.22μm,大钩较小,平均295.87μm,X/Y为1.255;但与小型的石林双睾虫比较,大钩X/Y值差异不显著。

花臭蛙消化道6种激素阳性细胞的免疫组织化学定位

目的应用6种胃肠激素抗血清对花臭蛙(Rana schmackeri)消化道激素阳性细胞进行了免疫组织化学定位。方法SP(Streptavidin peroxidase)免疫组织化学法。结果五羟色胺阳性细胞在消化道各段都有分布,以胃幽门部密度最高,胃体其次,食道和直肠较少;生长抑素阳性细胞主要分布于胃和小肠,其中幽门部较多,食管和直肠未见分布。胃泌素阳性细胞只在十二指肠和空肠两个部位检测到。而胰多肽、胰高血糖素和P-物质阳性细胞在消化道各段均未见其分布。结论花臭蛙消化道这六种内分泌细胞分布与其他两栖类动物比较,既显示了两栖类动物在生活习性及动物消化生理方面消化道激素阳性细胞分布的某些共性,又显示了不同物种在消化道的结构特点、生活环境、食性等方面存在的种间差异。

基于云南臭蛙抗菌肽序列分析的药物设计策略

通过生物信息学手段分析云南臭蛙抗菌肽的结构与功能,为合成此类抗菌肽和通过基因工程方法生产新药物提供理论依据.通过互联网和计算机软件比较和分析了云南臭蛙抗菌肽的成熟肽序列和二级结构,设计了一个具有抗菌活性的抗菌肽分子.结果表明:成熟肽的正电荷和α螺旋结构与抗菌肽的活性密切相关.根据分析结果,设计了一条抗菌肽序列:GL(A/V/I)AANFLPK(T)AF(L)CXXXK(R)KC,此抗菌肽分子可能具有较强的抗菌活性.表明正电荷是影响抗菌肽与致病菌细胞膜结合的关键,而α螺旋的两亲性结构则在抗菌肽插入脂质双分子层中起重要作用.在维持保守氨基酸不变的情况下,可在适当位置改变或置换一些氨基酸,对天然抗菌肽进行基因改造或人工合成此类抗菌肽,不失为开发新药物的一条捷径.

中国臭蛙属两新种记述(无尾目:蛙科)

对云南臭蛙Odorrana andersonii各地居群的形态特征进行了深入研究，将原定名为云南臭蛙的9个地区标本分为3个形态型。这3个形态型被确定为3个不同的种，即云南臭蛙和2个新种：景东臭蛙O.jingdongensis sp.nov.和海南臭蛙O.hainanensis sp.nov.。海南臭蛙Odorrana hainanensis sp.nov.,正模CIB64Ⅲ3916，雄性成体59.5?mm；采自海南白沙县鹦歌岭，海拔520?m；1964年8月25日。景东臭蛙Odorrana jingdongensis sp.nov.,正模CIB581505，雌性成体体长90.4?mm；采自云南景东县新民乡，海拔1?480?m；1958年5月29日。模式标本保存在中国科学院成都生物研究所。

花臭蛙核型、C-带、银带的研究

花臭蛙Rana schmackeri的核型为2n=26,NF=52。各号染色体均具着丝粒区C-带,2q、3q、4p、9q上具居间区C-带、5p末端具端粒区C-带。花臭蛙仅有一对NORs,位子10q上。另外还对无指盘臭蛙、绿臭蛙与花臭蛙的染色体进行了比较。

无指盘臭蛙(Odorrana grahami)典型栖息地环境微生物季节变化

无指盘臭蛙(Odorrana grahami)是迄今为止发现抗菌肽种类最多的蛙类,而抗菌肽直接与环境微生物作用.为进一步研究无指盘臭蛙皮肤分泌物与环境微生物的关联性,利用平板稀释法对无指盘臭蛙典型栖息地(云南昆明、四川冕宁、四川会理)细菌、真菌、放线菌的数量随季节变化进行了研究.结果显示:1)3个地方土壤都是春季3种微生物总量菌落形成单位最多;2)放线菌都是秋季最多,春季最少;3)昆明和会理土壤春季细菌最多,冕宁夏季最多;4)昆明和冕宁土壤春季真菌最多,会理秋季最多;5)水样中,冕宁和会理微生物总数和真菌春夏秋逐渐增多,3个季节微生物变化趋势明显不同于昆明.同时对3个地方不同微生物的季节变化趋势进行了讨论.

务川臭蛙皮肤及指趾组织学特征

务川臭蛙仅分布于贵州省务川县溶洞内,属极危物种。以牛蛙为对照,通过形态解剖学和组织学方法对务川臭蛙的皮肤和吸盘结构进行研究,结果显示,务川臭蛙头部背侧、后肢背侧以及躯干腹侧皮肤总厚度分别为372.50μm±29.7μm、453.25μm±13.9μm及237.92μm±31.8μm,各部分皮肤真皮层所占比例分别为(88.86±1.41)%、(90.65±0.81)%和(86.59±1.77)%,其中分布着大量的颗粒腺和粘液腺;前后肢每个指(趾)末端的吸盘,腹面有明显的柱状凸起表皮结构,其间有小孔和粘液腺,是务川臭蛙在溶洞壁上攀爬捕食的结构基础。务川臭蛙具有的特殊生理结构,是珍贵的遗传资源,应当加强科学保护。

湖北省两栖动物新记录——无指盘臭蛙

2012年10月对湖北省保康县五道峡自然保护区进行综合科学考察.考察期间采集到两栖动物蛙类标本1只,经鉴定,为无指盘臭蛙(Odorrana grahami),是湖北省两栖动物新纪录.

花臭蛙皮肤分泌物中抗菌肽Odorranin的分离纯化与表征

从花臭蛙(Odorrana schmackeri)皮肤分泌液中分离得到一类(包含三种)新型的抗菌肽。经过一级结构解析和抗菌活性表征后,命名为Odorranin(1,2,3)。该类抗菌肽由21个氨基酸组成。Odorranin对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有明显的抑制活性,其中Odorranin 3对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为4.2、6.06μg/mL。

贵州产绿臭蛙核型、C—带和银带研究

本文报道贵州仁怀产绿臭蛙的核型、C—带和银带。其染色体数目为2n=26,NF=52,大型染色体5对(相对长度大于9％),小型染色体8对(相对长度小于7％)。第3、4、6、9四对为亚中部着丝粒染色体,其余为中部着丝粒染色体。各号染色体均有着丝粒区C带,3q和4q上有一条居间区C带(4q异态),2p有一条弱居间区C带。9q有一对标准NORs(异态)。本文还讨论了贵州与四川产绿臭蛙染色体核型、带型的异同。

中国蛙类一新种——合江臭蛙

本文记述中国蛙属一新种,合江臭蛙.模式标本保存在四川师范学院生物系.