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农杆菌介导的稻瘟病菌转化及致病缺陷突变体筛选 被引量:23
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作者 刘朋娟 王政逸 +1 位作者 王秋华 李德葆 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期231-237,共7页
在构建了两个含有潮霉素B磷酸转移酶基因双元载体的基础上,成功地实现了农杆菌介导的稻瘟病菌转化,转化效率达每1×106个分生孢子>300个转化子,并得到了4000多个转化子。通过继代培养和PCR检测,证明插入到稻瘟病菌基因组中的潮... 在构建了两个含有潮霉素B磷酸转移酶基因双元载体的基础上,成功地实现了农杆菌介导的稻瘟病菌转化,转化效率达每1×106个分生孢子>300个转化子,并得到了4000多个转化子。通过继代培养和PCR检测,证明插入到稻瘟病菌基因组中的潮霉素抗性基因可稳定遗传。Southern杂交分析表明,大约有2/3转化子的T-DNA插入是单拷贝的。用大麦叶片离体接种的方法快速测定部分稻瘟病菌转化子的致病性,发现一个致病缺陷突变体:A1-412。该突变体不能侵入水稻叶片及擦伤的大麦或水稻叶片,说明A1-412突变体在寄主组织中扩展进程被阻断。进一步的表型分析发现A1-412突变体的产孢量显著下降,仅为野生菌株的7%,在疏水表面不能形成附着胞,部分分生孢子萌发也略有延迟。Southern杂交显示A1-412基因组中T-DNA插入是单拷贝的。上述结果表明,A1-412突变体表型的改变可能是由于T-DNA插入而使某一具有重要生物学功能的基因失活所致。 展开更多
关键词 稻瘟病菌 根癌农杆菌介导转化 插入突变 致病缺陷突变体
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柱花草炭疽菌突变体库致病缺陷转化子筛选及T-DNA插入位点侧翼序列分析
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作者 高建明 胡彩平 +5 位作者 郑金龙 张世清 陈河龙 刘巧莲 习金根 易克贤 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期189-191,F0002,共4页
比较了接种病原菌侵染柱花草的几种方法的效果,选定出最佳的初筛和复筛方法,进而对1 230个转化子进行筛选,得到致病力缺陷菌23株,其中致病力减弱的菌株18株,致病力完全丧失的5株。利用TAIL-PCR扩增致病力丧失突变子t-2430的T-DNA插入位... 比较了接种病原菌侵染柱花草的几种方法的效果,选定出最佳的初筛和复筛方法,进而对1 230个转化子进行筛选,得到致病力缺陷菌23株,其中致病力减弱的菌株18株,致病力完全丧失的5株。利用TAIL-PCR扩增致病力丧失突变子t-2430的T-DNA插入位点侧翼序列,得到大小为476 bp的一段序列,BLAST比对已测序炭疽菌基因组,发现401nt和数据库的Contig464的部分序列完全一致,进一步对该段序列的功能进行预测,表明T-DNA插入在一预测基因的启动子区域,并且这个预测基因与稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)的天冬氨酸转氨酶(XP_003719674.1)同源性为79%。 展开更多
关键词 炭疽菌 突变体 致病缺陷 筛选 侧翼序列
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芸薹生链格孢致病缺陷突变体的筛选及初步分析 被引量:1
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作者 张晓斐 刘伟阳 +2 位作者 卢凯 张敏 徐后娟 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期2635-2639,共5页
芸薹生链格孢(Alternaria brassicicola (Schwein.) Wiltshire)引起的黑斑病是十字花科蔬菜生产上的重要病害之一,在全球主产区都有报道。目前关于该病菌的致病机理的研究还较少。因此,查找和鉴定芸薹生链格孢致病相关基因,不仅有助于... 芸薹生链格孢(Alternaria brassicicola (Schwein.) Wiltshire)引起的黑斑病是十字花科蔬菜生产上的重要病害之一,在全球主产区都有报道。目前关于该病菌的致病机理的研究还较少。因此,查找和鉴定芸薹生链格孢致病相关基因,不仅有助于认识该类病原真菌致病的分子机制,还有助于发现病害防治新靶标。本研究从本实验室已构建的芸薹生链格孢转化子库中筛选得到了7株致病性缺陷的突变菌株。进一步利用Hi TAIL-PCR技术对插入位点的侧翼序列进行了扩增,并通过生物学分析方法进行了初步分析。相关研究结果将有助于对芸薹生链格孢致病机理的认识,为发现病害防治新靶标提供理论基础。 展开更多
关键词 芸薹生链格孢 致病缺陷 Hitail-PCR
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还原型谷胱甘肽治疗新生儿G-6PD缺陷致病理性黄疸的效果 被引量:1
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作者 蓝水浓 《中国医药科学》 2018年第24期53-55,共3页
目的探讨还原型谷胱甘肽治疗新生儿G-6PD缺陷致病理性黄疸的效果。方法选取2016年11月~2018年1月我院收治的200例G-6PD缺陷致病理性黄疸新生儿为主要对象,采用随机数字表法分组,每组100例。两组患儿均接受蓝光照射治疗,观察组患儿在蓝... 目的探讨还原型谷胱甘肽治疗新生儿G-6PD缺陷致病理性黄疸的效果。方法选取2016年11月~2018年1月我院收治的200例G-6PD缺陷致病理性黄疸新生儿为主要对象,采用随机数字表法分组,每组100例。两组患儿均接受蓝光照射治疗,观察组患儿在蓝光照射治疗基础上增加还原型谷胱甘肽治疗,对两组的临床治疗效果进行对比分析。结果观察组的治疗总有效率为96.0%,对照组为85.0%,两组对比,具有统计学差异(P <0.05);经治疗后,观察组患儿的MDA、NADPH水平、胆红素水平较治疗前明显改善,且明显优于对照组,两组对比差异有统计学意义(P <0.05);观察组的治疗时间明显短于对照组,且换血比例明显低于对照组,具有统计学差异(P <0.05);两组患儿的不良反应发生率对比,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论还原型谷胱甘肽治疗新生儿G-6PD缺陷致病理性黄疸的效果显著,可快速消退黄疸症状,减少血红蛋白和蛋白膜氧化破坏程度,且安全性高,故值得进一步推广和应用。 展开更多
关键词 还原型谷胱甘肽 新生儿 G-6PD缺陷致病理性黄疸 治疗效果
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Recent advance in the structural analysis of HIV-1 envelope protein
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作者 MATSUDA Zene 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2015年第5期420-424,共5页
Human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), a causative agent of AIDS, is affecting today more than 35 millions of people worldwide. The advance of anti-HIV chemotherapy has made AIDS a chronic non-fatal disease in... Human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1), a causative agent of AIDS, is affecting today more than 35 millions of people worldwide. The advance of anti-HIV chemotherapy has made AIDS a chronic non-fatal disease in resourceful countries. Longawaited anti-HIV-1 vaccine is still not with us yet; however, great progress in structural analyses of the envelope protein of HIV-1 in recent years starts to shed light on rational intervention targeted at the envelope protein, as will be reviewed in this article. 展开更多
关键词 HIV-1 envelope glycuprotein CRYOEM structure membrane fusion VACCINE
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