携带 xylE 的转基因小鼠致突变检测模型的建立及用于常规测试现状

携带ｘｙｌＥ的转基因小鼠致突变检测模型的建立及用于常规测试现状印木泉黄建（第二军医大学卫生毒理教研室，上海２００４３３）人们建立了许多测试系统来检测突变以及最终导致突变的分子事件．常用的有：细菌系统，细胞系统和啮齿类动物系统等．然而，离体的实验系统难...

靶基因xylE质粒载体转基因小鼠的建立

目的建立在基因组中整合有ｐＵＣ１１８ＮＸ质粒的转基因小鼠致突变检测模型。方法将含ｘｙｌＥ靶基因的ｐＵＣ１１８ＮＸ质粒ＤＮＡ显微注射至Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠３７６枚受精卵雄性原核中，存活的２２５枚受精卵移入１１只假孕母鼠双侧输卵管内发育成个体后，用ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ、质粒回收转化试验和酶切鉴定方法筛选存活仔鼠。结果假孕母鼠中有７只妊娠，共产仔鼠２９只，存活２５只，其中ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测阳性小鼠１８只，阳性率为７２％。最后选择２只在基因组中完整整合ｐＵＣ１１８ＮＸ质粒的健康雄性小鼠作为Ｆｏｕｎｄｅｒ鼠，进行转基因小鼠致突变检测和建系工作。结论成功地建立了在基因组ＤＮＡ中整合有ｐＵＣ１１８ＮＸ质粒的Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ转基因小鼠。