羟基喜树碱纳米胶束对舌癌RSCC-1细胞体外抑制实验

目的探讨HCPT/PEG-PLA(羟基喜树碱-聚乙二醇-聚乳酸)纳米胶束对舌癌RSCC-1细胞体外抑制作用。方法兔舌癌RSCC-1细胞复苏和培养,传代至对数生长期进行实验。经与PBS、不同浓度的HCPT(羟基喜树碱)和HCPT/PEG-PLA共同培养不同时间后,MTT法检测体外细胞毒作用,计算细胞生长抑制率。结果 MTT检测结果显示HCPT市售剂型组呈现明显细胞毒作用:生长抑制率随药物浓度、作用时间增加而升高;HCPT/PEG-PLA纳米胶束剂型组48 h时生长抑制率低于HCPT市售剂型组(P<0.05),至96 h时则与HCPT市售剂型组差别己无统计学差异(P>O.05)。结论 (1)HCPT/PEG-PLA纳米胶束对RSCC-1细胞具有直接抑制作用,呈现时间、剂量依赖性。(2)HCPT/PEG-PLA纳米胶束具有缓释性。

Prx1敲除对4NQO诱导的小鼠舌癌前病变细胞增殖及转录因子Ets1表达的影响

目的检测核增殖抗原Ki67和转录因子Ets1在4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)诱导的Prx1+/+和Prx1+/-小鼠舌癌前病变模型中的表达,探讨Prx1敲除对小鼠舌癌前病变细胞增殖及转录因子Ets1表达的影响。方法实验分为Prx1+/+阴性对照组、Prx1+/+4NQO组、Prx1+/-阴性对照组、Prx1+/-4NQO组。在实验过程中对照组小鼠给与蒸馏水,实验组小鼠给与4NQO饮用水,第16周末处死小鼠,取舌组织,用于HE染色及Ki67和Ets1免疫组织化学染色。结果在4NQO的诱导下,成功构建鼠舌癌前病变模型。组织学检查发现在第16周末,实验组小鼠舌黏膜上皮表现为单纯增生或不同程度的异常增生。免疫组化结果显示,与对照组正常舌黏膜相比,Ki67、Ets1在Prx1+/+4NQO组舌癌前病变中表达明显增高(P<0.01)。Prx1敲除导致Prx1+/-4NQO组舌黏膜上皮中Ki67、Ets1表达明显降低(P<0.01)。结论 Prx1对细胞增殖有促进作用,可能通过调控转录因子Ets1在口腔癌前病变发生发展中发挥重要作用。

RNA干扰沉默HIF-1α基因对舌癌Tca8113细胞侵袭和迁移的影响

目的观察RNA干扰沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因对人舌癌细胞Tca8113侵袭和迁移的影响。方法将3个shRNA序列质粒导入pGCsi-H1/Hygro/GFPshRNA质粒表达载体,并将重组质粒经脂质体介导转染人舌癌细胞Tca8113(siHIF-1α组),转染阴性对照质粒的细胞作为空载组。半定量RT-PCR及Western blot法检测HIF-1α的mRNA及蛋白,细胞侵袭实验和划痕实验检测Tca8113的侵袭和迁移能力,同时采用Western blot法检测其上皮—间质转化(EMT)相关标志蛋白和黏着斑激酶(FAK)、磷酸化FAK(P-FAK)。结果测序证实成功构建了HIF-1αshRNA重组质粒(分别为sh1、sh2、sh3),将sh3,转染Tca8113后进行低氧培养,HIF-1α基因表达显著被抑制。与空载组相比,转染sh3的siHIF-1α组穿透Matrigel胶的细胞数明显减少,且迁移能力也显著下降,两组相比,P均<0.05。与对照组(未转染质粒的Tca8113)相比,siHIF-1α组EMT相关标志蛋白和p-FAK蛋白表达下降,两组相比,P均<0.05。结论 RNA干扰沉默HIF-1α基因能有效抑制舌癌细胞的侵袭和迁移,在一定程度上可以逆转舌癌细胞的恶性表型。

人p27^(kipl)cDNA克隆及其转染人舌癌细胞系Tca8113细胞的鉴定

目的克隆人p27kiplcDNA并将其转染至Tca8113细胞中,建立稳定转染p27kipl基因的细胞株。方法用PT-PCR法获得人p27kiplcDNA,将其克隆人pcDNA3载体上,并将重组表达质粒经脂质体介导转染Tca8113细胞,经CA18抗性筛选后用PCR鉴定。结果克隆出人的p27kiplcDNA并将其转染至Tca8113细胞中,获得了稳定转染p27kipl基因的细胞株。结论用分子生物学技术克隆了人p27kipl。基因,获得稳定转染p27kipl基因的细胞株,为进一步研究p27kip基因治疗舌癌的实验研究奠定基础。

融合蛋白TNFR1/DED介导舌癌细胞凋亡的实验研究

目的 :构建含FADD及TNFR1基因功能结构域的融合基因TFL ,稳定转染入舌癌细胞后 ,通过体内、外实验初步观察融合蛋白TNFR1/DED在重组人肿瘤坏死因子 α(rhTNF α)作用下介导舌癌细胞凋亡的效应。方法 :反转录及重组PCR构建融合基因TFL ;鉴定融合蛋白TNFR1/DED在建系舌癌细胞T TFL中的表达 ,通过MTT法、形态学观察、DAN片段及体内抑瘤实验 ,观察融合蛋白TNFR1/DED介导舌癌细胞凋亡的效应。结果 :获得了人FADD及TNFR1基因并构建成功融合基因TFL ,转染入Tca 8113细胞后 ,能表达融合蛋白TNFR1/DED活性 ,体外实验观察到rhTNF α可有效地杀伤舌癌细胞 ,体内可明显抑制移植瘤的生长 ,且荷瘤动物内脏器官无病理性改变。结论 :融合蛋白TNFR1/DED可有效地介导舌癌细胞凋亡 ,为舌癌基因治疗研究提供实验基础。

细胞周期素D_1在舌癌组织中的表达及临床意义

目的 研究舌癌组织中细胞周期素D_1(CYCLINID_1)的表达水平及与舌癌临床分期和病理分级的关系。方法 应用免疫组织化学S～P法对42例舌癌组织、30例癌旁组织、10例正常舌粘膜组织进行CYCLINID_1的表达检测。结果 舌癌中的CYCLINID_1呈高度表达,与癌旁组织和正常舌粘膜组织相比,差异显著(P<0.01)。随着病理分级和临床分期的增高,CYCLINID_1的阳性表达率和表达强度均增高。结论 CYCIINID_1是一种癌基因,其过度表达引起了细胞增殖周期的改变,导致细胞增殖失控,形成肿瘤,其表达水平在舌癌的发生、发展、浸润、转移中起重要作用。

nm23-H1基因对舌癌细胞株化疗敏感性的影响体外实验

目的 通过nm23-H1的转化及导入BcaCD85细胞株,观察nm23-H1对BcaCD885细胞株化疗敏感性的影响。方法 完成细胞培养和基因转染后,MTT法观察nm23-H1对BcaCD885化疗敏感性影响。结果 转染前BcaCD885细胞株对ADM、5-FU、MTX的化疗敏感性无显著差异。但转染后的BcaCD885细胞株对CDDP明显增敏。结论 nm23-H1可能通过特异性地影响细胞内的能量交换过程来达到对CDDP化疗增敏的效果。

促肝细胞再生磷酸酶1基因对舌癌细胞侵袭的影响

目的:探讨促肝细胞再生磷酸酶1(phosphatase of regenerating liver cell-1,PRL-1)对舌癌细胞侵袭能力的影响及其可能的机制。方法:应用si RNA-PRL-1慢病毒载体转染处理舌癌TCA8113细胞株后,分别采用荧光定量PCR和蛋白质印迹检测PRL-1基因和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)m RNA和蛋白水平;采用Transwell小室模型实验检测癌细胞的侵袭能力。结果:si RNA-PRL-1慢病毒转染组癌细胞PRL-1在RNA(0.425 0±0.010 0)和蛋白(2.720 0±0.110 0)水平明显下调(P=0.000,P=0.000),同时MMP-2及MMP-9在RNA(0.562 2±0.180 0,0.617 1±0.100 0)及蛋白(0.592 4±0.010 0,0.476 2±0.020 0)表达水平降低(P=0.024,P=0.010,P=0.000,P=0.000);Transwell实验si RNA-PRL-1慢病毒转染组细胞通过数(64.33±4.04)明显减少(P=0.000)。结论:si RNA-PRL-1转染可抑制舌癌细胞侵袭,其机制可能与PRL-1基因下调MMP-2及MMP-9的表达有关。

MUC1-siRNA对人舌癌Tca细胞迁移、侵袭及PI3K-Akt信号通路的影响

目的:探讨MUC1对舌癌Tca8113细胞迁移、侵袭及PI3K-Akt信号通路的影响。方法:构建MUC1特异性siRNA质粒,利用脂质体Lipo fectamineTM2000将MUC1-siRNA质粒转入舌癌Tca8113细胞,同时设置阴性对照组及空白组,分别检测3组MUC1mRNA及蛋白表达水平,Tca8113细胞增殖活性及凋亡情况、迁移和侵袭能力,并检测PI3K-Akt通路关键蛋白PI3K、p-Akt、Akt表达水平。结果:经双酶切、PCR及测序验证,成功构建MUC1-siRNA表达载体;干扰组MUC1 mRNA及蛋白表达水平明显低于阴性对照组及空白组(P<0.05);MUC1-siRNA可明显对Tca8113细胞抑制增值和促进凋亡,降低Tca8113细胞PI3K、p-Akt、Akt蛋白表达水平和迁移及侵袭能力。结论:MUC1-siRNA可明显抑制舌癌Tca8113细胞增殖、迁移及侵袭能力,促进Tca8113细胞凋亡,推测其机制可能与抑制PI3K-Akt信号通路表达有关。

ZFP36L1通过下调细胞周期蛋白D1抑制舌癌细胞增殖

C3H1型的锌指蛋白36 (zinc finger protein 36,C3H type-like 1,ZFP36L1)是一种高度保守且具有CCCH型RNA结合结构域的蛋白质。近年来,ZFP36L1在多种肿瘤中的作用被报道,但是在舌癌中的表达型和作用机制尚不清楚。Western印记结合荧光定量PCR检测发现,ZFP36L1在舌癌细胞中的表达明显低于人永生化表皮细胞Hacat。在相对低表达ZFP36L1的舌癌细胞SCC15和SCC25中,稳定过表达ZFP36L1,细胞计数实验发现,SCC15细胞的数目由(4.768±0.09225)×10~3个降低到(3.089±0.09745)×10~3个,SCC25细胞的数目由(6.274±0.01311)×10~3个降低到(4.037±0.01173)×10~3个;平板克隆实验提示,SCC15和SCC25细胞克隆数目是对照组的0.67倍,0.68倍,0.7倍和0.59倍,0.57倍,0.59倍;过表达ZFP36L1组G_1期的SCC15和SCC25细胞分别由61.82±0.8933%增加到88.72%±0.8378,由56.31%±1.029增加到71.7%±0.9303;而S期的细胞由25.21%±0.9865减少到11.31%±0.6567,由28.58%±0.8182减少到18.61%±0.6798。过表达ZFP36L1能明显下调SCC15和SCC25细胞中细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的蛋白质水平。过表达ZFP36L1组的SCC15和SCC25细胞中,细胞周期蛋白D1 mRNA的表达量分别是对照组的0.217倍和0.175倍。在舌癌细胞中,上调细胞周期蛋白D1的表达水平可消除由过表达ZFP36L1引起的细胞增殖能力降低。总之,ZFP36L1在舌癌中呈低表达;可通过下调细胞周期蛋白D1的表达,抑制舌癌细胞增殖。

外源性拮抗神经纤毛蛋白1促进人舌癌细胞SCC9细胞凋亡的研究

目的:研究外源性拮抗人舌癌细胞SCC9中神经纤毛蛋白1(Neuropilin-1,NRP-1)蛋白对人舌癌细胞SCC9增殖、凋亡的影响。方法:通过免疫印迹实验(western blot,WB)及实时定量荧光PCR(real-time RT-PCR)分别从蛋白水平及mRNA水平检测小分子肽ATWLPPR(A7R)对SCC9细胞NRP-1表达的影响,利用细胞计数法及流式细胞术检测拮抗NRP-1蛋白后对SCC9细胞增殖、凋亡的影响。结果:A7R拮抗后SCC9细胞NRP-1的mRNA水平下降而蛋白表达未见明显下降,同时对SCC9细胞凋亡有促进作用,而对SCC9细胞增殖无明显影响。结论:外源性拮抗NRP-1可促进SCC9细胞凋亡。

双硫仑联合铜通过调控视神经萎缩蛋白1诱导舌癌细胞凋亡

目的探讨视神经萎缩蛋白1(OPA1)在双硫仑联合铜(DSF-Cu)诱导舌癌细胞凋亡中的作用。方法用不同浓度的DSF-Cu干预舌癌细胞Cal-27,MTT法检测细胞增殖活性,Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光素酶发光法检测ATP含量,Western blot法检测OPA1蛋白表达水平。结果DSF-Cu能抑制舌癌细胞的增殖活性,促进细胞凋亡的发生,减少细胞ATP含量,并呈浓度依赖性。Western blot结果示低浓度DSF-Cu对OPA1蛋白表达无明显影响,而中、高浓度的DSF-Cu显著抑制OPA1蛋白表达水平。结论DSF-Cu可诱导舌癌细胞凋亡,其机制可能是通过抑制OPA1表达。

siRNA干扰沉默HIF-1α基因在舌癌Tca8113细胞侵袭和迁移中的作用机制

目的探讨利用siRNA技术特异性阻断缺氧诱导因子(HIF)-1α基因表达对舌癌Tca8113细胞侵袭和迁移的影响。方法取指数生长期细胞消化计数后按2×105个/孔接种于6孔细胞培养板中,待细胞融合至40%~50%时,将针对HIF-1α的siRNA序列应用LipofectamineTM2000转染入Tca8113细胞(siRNA HIF-1α组,干扰组)。半定量RT-PCR及Western印迹法检测HIF-1α的m RNA及蛋白,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率,细胞侵袭实验和划痕实验检测细胞的侵袭和迁移能力。结果 siRNA可以有效沉默Tca8113细胞HIF-1α基因;干扰组细胞增殖较对照组明显受到抑制,且与细胞凋亡有关,凋亡率显著高于对照组(P<0.05);,siRNA HIF-1α基因转染后的Tca8113细胞黏附能力降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);侵袭能力也下降。结论 siRNA能够有效沉默HIF-1α基因,抑制舌癌Tca8113细胞侵袭和迁移,在某种程度上可以改善舌癌细胞的恶性表型,为舌癌的治疗提供思路。

Tip-1抗体抑制舌癌细胞增殖的作用和机制研究

目的探讨Tip-1单克隆抗体对舌癌细胞增殖的作用及可能机制。方法通过体外培养口腔鳞状细胞癌细胞,Tip-1单克隆抗体干预,采用同型和空白对照干预。台盼蓝染色法检测舌癌细胞活细胞数;westernblotting检测mTOR、p-mTOR、Akt、p-Akt蛋白表达。结果Tip-1抗体干预96h后舌癌活细胞数为(0.13±0.01)×10^6,同型对照组为(0.25±0.00)×10^6,2组相比,差异有统计学意义(P=0.007);Tip-1抗体干预组mTOR、Akt、p-Akt蛋白表达水平明显升高,p-mTOR所有组表达均不明显。结论Tip-1抗体在体外能抑制舌癌细胞增殖,但其机制有待进一步研究。

舌癌细胞系T-TFL的建立和生物学性状检测(英文)

背景:基因治疗已成为恶性肿瘤研究领域的热点和发展趋势,但舌癌基因治疗的研究报道极少。目的:构建含相关死亡结构域蛋白(FADD)及肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)基因功能结构域的融合基因TFL,稳定转染入人舌鳞状细胞癌细胞系(Tca-8113)中,检测建系细胞T-TFL的生物学性状,探讨一种更有利于舌癌患者治疗期及治疗后期内生活质量的治疗手段。设计:以诊断为依据,前瞻性研究。地点和对象:实验在第四军医大学口腔医学院口腔颌面外科完成,研究对象为人舌鳞状细胞癌细胞系(Tca-8113),上海第二医科大学口腔医学院建系。干预:反转录PCR获得人FADD及TNFR1基因cDNA,重组PCR法构建含二者功能结构域的融合基因TFL,通过阳离子脂质体法稳定转染TFL基因入Tca-8113细胞中。主要观察指标:Westernblot检测融合蛋白TNFR1/DED表达,通过形态学观察、生长曲线等检测T-TFL细胞的生物学性状。结果:获得了人FADD及TNFR1基因并构建成功融合基因TFL,转染入Tca-8113细胞后,能表达融合蛋白TNFR1/DED活性,且T-TFL细胞与亲本Tca-8113细胞的生物学性状无明显差异。结论:T-TFL细胞能表达融合蛋白TNFR1/DED活性,可以为进一步深入研究舌癌基因治疗提供实验基础。

人舌癌移植瘤模型中血管内皮细胞来源的实验研究

目的观察人舌癌裸鼠皮下移植瘤模型中肿瘤新生血管内皮细胞的来源。方法通过皮下移植人舌癌Tca8113-M1细胞建立人舌癌裸鼠移植肿瘤模型，并于肿瘤生长至直径1cm时切除肿瘤，对移植瘤进行病理组织学观察，利用免疫组织化学方法检测移植瘤内新生血管内皮细胞的来源，抗体为鼠抗人单克隆抗体CD34和大鼠抗小鼠单克隆抗体CD34；并进行微血管密度（microvessel density，MVD）计数及血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）表达检测。结果右腋窝皮下接种人舌癌Tca8113-M1细胞2周后，6只裸鼠的肿瘤直径都达到1cm以上，切片HE染色可见肿瘤组织病理形态为鳞状上皮细胞癌，MVD平均值为10．72±2．12，其中肿瘤新生血管内皮细胞大鼠抗小鼠CD34免疫组化结果是阳性，而鼠抗人CD34阴性。VEGF在6例移植瘤标本中均阳性表达，平均阳性率为（67±5．6）％。结论人舌癌移植瘤模型中血管内皮细胞主要来源于宿主裸鼠，并且可能与肿瘤细胞分泌的VFGE诱导有关。

巨噬细胞炎症蛋白-1β对人舌鳞癌细胞CAL-27增殖和凋亡的影响

目的探讨β亚族趋化因子受体5(CCR5)在不同人舌鳞癌细胞株的表达情况以及其配体巨噬细胞炎症蛋白-1β(MIP-1β)对人舌鳞癌细胞株CAL-27增殖和凋亡的影响。方法采用蛋白印迹法和免疫荧光染色对3种人舌鳞癌细胞株(CAL-27、UM-1、Tca-8113)MIP-1β的相应受体CCR5的表达进行检测;根据MIP-1β刺激浓度的不同,细胞被随机分为4组:0 ng/m L组(对照组)、10 ng/m L组、20 ng/m L组、40 ng/m L组。用CCK-8试剂盒(Cell Counting Kit-8)检测MIP-1β在刺激12、24、48 h时,对CAL-27细胞增殖的影响;实验分组同前,分别用0、10、20、40 ng/m L IP-10处理24 h后收集细胞,用Annexin V/PI双染流式细胞仪检测CAL-27细胞的凋亡情况。结果 CCR5在3种人舌鳞癌细胞株均有表达,并且CCR5在3株细胞的胞膜及胞质内均有染色;和对照组相比,MIP-1β对CAL-27细胞有促进增殖的作用。在12 h、24 h时,3种浓度的MIP-1β均能够促进CAL-27细胞增殖(P<0.05);48 h时,10 ng/m L、20 ng/m L的MIP-1β均能够促进CAL-27细胞增殖(P<0.05),但40 ng/m L的MIP-1β对CAL-27细胞的增殖无影响(P>0.05);在24 h时,40 ng/m L MIP-1β组的细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),而10 ng/m L、20 ng/m L MIP-1β组细胞凋亡率和对照组之间均无显著差异(P>0.05)。结论 CCR5在3种人舌鳞癌细胞株的胞膜及胞质内均有表达;MIP-1β对CAL-27细胞有促进增殖的作用,但相对较高浓度的MIP-1β对CAL-27细胞的凋亡也有促进作用。随着较高浓度MIP-1β作用时间的延长,促增殖作用减弱,而这种减弱可能是由MIP-1β的促凋亡作用的逐步发挥所引起的。

双亚苄基哌啶与蛋白酶体抑制剂对舌癌细胞毒性作用及机制

目的探讨双亚苄基哌啶RA190与蛋白酶体抑制剂MG132对舌癌细胞CAL27、TCA8113的毒性作用及机制。方法将不同浓度的RA190或MG132作用于舌癌细胞24 h,CCK-8法检测各组细胞存活情况;流式分析不同组舌癌细胞周期与凋亡情况;Western blot检测各组细胞内ADRM1、Cyclin B1、Bak、Bax蛋白表达。结果RA190对CAL27、TCA8113的半抑制浓度IC 50分别约为0.18和1.6μmol·L-1;MG132的IC 50分别约为0.1和0.3μmol·L-1。RA190诱导CAL27细胞G 1/G 0或G 2/M期停滞;MG132诱导CAL27细胞G 2/M期停滞。1μmol·L-1 RA190提高TCA8113细胞凋亡率(P<0.05);MG132提高CAL27与TCA8113细胞凋亡率(P<0.05),并呈剂量依赖性。RA190和MG132均下调CAL27、TCA8113细胞内ADRM1、Bak、Bax蛋白表达,上调Cyclin B1。结论RA190在舌癌中作用具有较大的选择性和局限性,采用靶向ADRM1治疗策略不适用于舌癌。MG132通过ADRM1以外的其他通路对舌癌细胞产生毒性作用;MG132可能应用于舌癌治疗,但存在的副作用也可能较广。

基于生物信息学分析纤维蛋白1在舌癌中的表达及临床意义

目的探讨舌癌组织及舌癌细胞中纤维蛋白1(FBLN1)的表达及临床意义。方法基于HPA数据库分析FBLN1在头颈部癌组织中的表达情况;GEPIA数据库和Pearson相关性分析研究FBLN1与MKI67两者在头颈部癌中表达的关联;Kaplan-Meier Plotter数据库在线分析FBLN1表达水平与头颈部癌患者生存率的关系;免疫组化和Western blotting实验验证FBLN1在舌癌组织中的表达情况;构建过表达FBLN1舌癌细胞株,通过划痕实验、Transwell实验检测FBLN1对舌癌细胞迁移、侵袭能力的影响。结果HPA数据库检索和免疫荧光显示,FBLN1在人体正常细胞和组织中高表达,在头颈部癌组织中较癌旁组织低表达(P<0.05)。GEPIA数据库分析显示,FBLN1在头颈部癌与癌旁组织中表达水平差异无统计学意义(P>0.05),而MKI67在头颈部癌中高表达(P<0.05),且Pearson相关性分析显示二者表达不相关(P=0.280)。Kaplan-Meier Plotter生存分析表明,FBLN1表达与头颈部癌总生存率无关(log-rank P=0.190),而FBLN1高表达时无病生存率更高(log-rank P=0.007)。免疫组化结果显示,FBLN1在癌旁组织中的染色强度和阳性面积均高于肿瘤组织(P<0.001)。Western blotting结果显示,在10例舌癌及配对癌旁组织中,FBLN1蛋白水平在癌旁组织中表达更高(P<0.001)。划痕实验和Transwell实验结果显示,过表达FBLN1显著抑制舌鳞癌细胞Cal-27的迁移、侵袭能力(P<0.05)。结论FBLN1基因在舌癌组织中低表达,而过表达FBLN1抑制舌鳞癌细胞Cal-27的迁移和侵袭能力,提示其可作为评价舌癌患者预后的潜在标志物。

siRNA干扰MDR1逆转口腔舌癌耐药性表型的实验研究

目的:探讨MDR1siRNA对人舌癌耐药细胞株TCA8113多药耐药性的影响。方法:以人舌癌耐药细胞株TCA8113/DDP为靶细胞,将针对MDR1基因合成,并已鉴定和测序后的siRNA分子利用脂质体介导转染TCA8113/DDP细胞,采用G418筛选克隆细胞,RT-PCR检测MDR1基因mRNA表达,免疫组织化学法测定P-糖蛋白(P-gp)表达;MTT比色法检测TCA8113/DDP细胞对顺铂(DDP)、卡铂(CBP)、平阳霉素(PYM)的敏感性。结果:经转染成功的阳性克隆细胞TCA8113/DDP的MDR1mRNA和P-gp的表达均被抑制。TCA8113人舌癌耐药细胞顺铂(DDP)、卡铂(CBP)、平阳霉素(PYM)的IC50分别降至3.43μmol/L,1.72μmol/L和1.05μmol/L(P<0.01)。结论:稳定转染含编码MDR1siRNA的质粒载体能特异性地阻抑人舌癌多药耐药细胞TCA8113细胞MDR1基因的表达,逆转其对抗癌药物的耐受性。