芍药舒筋片对大鼠膝骨关节炎软骨病理、细胞因子及PⅡCP水平的影响

目的:探讨芍药舒筋片对大鼠膝骨关节炎软骨病理、血清中前列腺素2(Prostaglandin E2,PGE2)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)及Ⅱ型前胶原羧基端前肽(Carboxyterminal Propeptide of TypeⅡ Procollagen,PⅡCP)水平的影响。方法:将60只SD大鼠分成假手术组,模型组,阳性药组,受试药高、中、低剂量组,采用经典前交叉韧带切断术(Anterior Cruciate Ligament Transection,ACLT)手术造模,成模后灌胃给药4周后处死,分离血清及取术侧膝关节进行PGE2、TNF-α、PⅡCP检测和病理观察。结果:光镜下显示关节软骨发生退变,膝骨关节炎模型成功;ELISA检测血清指标PGE2、PⅡCP提示,芍药舒筋片受试药组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。而血清TNF-α含量与模型组比较,具有降低趋势。结论:芍药舒筋片对大鼠膝骨关节炎有一定的抗炎、延缓软骨退化、保护软骨的作用。

芍药舒筋片对C_(57)黑鼠膝骨关节炎的影响及其抗炎、镇痛作用研究

目的评价芍药舒筋片保护C57黑鼠软骨组织及其抗炎、镇痛作用,为其临床应用提供实验依据。方法将70只黑鼠随机分为空白对照组,模型对照组,阳性对照组,芍药舒筋片高、中、低剂量组。通过跑步机运动负荷成模后,灌胃给药4周,然后取膝关节进行病理形态学观察。采用小鼠耳郭肿胀、大鼠足跖肿胀模型,分为空白对照组,阳性对照组,芍药舒筋片高、中、低剂量组,分别干预5天后观察芍药舒筋片的抗炎作用;采用小鼠热板法和扭体法,分为空白对照组,阳性对照组,芍药舒筋片高、中、低剂量组,分别采取相应的干预措施,研究芍药舒筋片的镇痛作用。结果芍药舒筋片可明显减轻C57黑鼠膝骨关节炎关节软骨损伤程度;Mankin评分提示,阳性对照和治疗药组与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.01),且芍药舒筋片高、中剂量组作用优于阳性药维固力组。芍药舒筋片能降低巴豆油致小鼠外耳郭的肿胀度和肿胀率,阳性对照组和给药组与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);对鸡蛋清致大鼠足跖的肿胀度和肿胀率亦有明显的减轻作用,阳性对照组和高、中剂量给药组与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);阳性对照组和高、中剂量给药组与空白组小鼠痛阈值比较,差异均有统计学意义(P<0.01);阳性对照组和给药组与空白组小鼠扭体次数比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论芍药舒筋片可一定程度延缓运动负荷导致的C57黑鼠膝骨关节炎关节软骨退变,且有较好的抗炎镇痛作用。

芍药舒筋片对大鼠膝骨关节炎软骨病理及COMP水平的影响

目的评价芍药舒筋片对膝骨关节炎大鼠关节软骨病理及COMP的影响。方法将50只大鼠随机分为假手术组,模型组,芍药舒筋片高、中、低剂量组。除假手术组外,其余组别大鼠采用经典前交叉韧带切断ACLT手术造模。造模成功后,各组采取相应的措施干预4周,检测COMP水平,并观察关节软骨病理变化情况。结果与假手术组比较,模型组Mankin病理评分及血清COMP含量差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,芍药舒筋片高、中、低剂量组Mankin病理评分差异有统计学意义(P<0.05),芍药舒筋片高剂量组血清COMP含量差异有统计学意义(P<0.05)。结论芍药舒筋片对大鼠膝骨关节软骨有保护作用,可一定程度延缓手术形成的膝骨关节炎关节软骨退变。

健骨舒筋片中马兜铃酸A限量测定

目的建立健骨舒筋片中马兜铃酸A限量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱;乙腈-甲醇-水-冰乙酸(30∶30∶39∶1)为流动相;检测波长为390nm;进样量为10μL。结果马兜铃酸A浓度在0.017～0.52μg线性范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9999);两批细辛药材的马兜铃酸A含量较低,3批样品均未检出含马兜铃酸A。结论该法精密度高、重复性良好,可作为健骨舒筋片中马兜铃酸A的限量测定方法。

高效液相色谱法测定舒筋片中大黄素、大黄酚的含量

目的:建立舒筋片中大黄素、大黄酚的含量测定方法。方法:采用高效液相法,色谱柱为依利特C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸(85∶15),流速1.0 ml/min,检测波长为290 nm。结果:大黄素、大黄酚进样量在0.019 392～0.058 176μg、0.055 104～0.165 312μg范围内线性关系良好,相关系数分别为0.999 9、0.999 9,大黄素平均加标回收率为97.54%,RSD=2.46%,大黄酚平均加标回收率为99.02%,RSD=2.78%。结论:此方法简便可靠,精密度高,重现性好,可用于舒筋片的质量控制。

舒筋片质量标准研究

目的:建立舒筋片的质量标准。方法:用薄层色谱法对片中的当归、没药、乳香、红花进行了定性鉴别;采用高效液相色谱法测定了片中大黄素、大黄酚含量。结果:薄层色谱斑点清晰,空白样品无干扰;大黄素在0.025～0.25μg具有良好的线性关系,r=0.999;大黄酚在0.063～0.63μg具有良好的线性关系,r=0.999。大黄素平均加样回收率为96.28%,RSD=1.37%(n=5);大黄酚平均加样回收率为95.27%,RSD=1.90%(n=5)。结论:该方法简便、精确、重现性好,可作为该制剂的质量控制。

芍药舒筋片通过miRNA-140对骨关节炎大鼠软骨细胞中Wnt/β-catenin信号通路的调控作用

目的:研究芍药舒筋片通过miRNA-140对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用,探讨芍药舒筋片对骨关节炎(OA)大鼠软骨细胞的保护作用。方法:取SD大鼠45只,随机分为假手术组、OA对照组、OA治疗组,每组各15只。OA对照组和OA治疗组采用改良Hulth造模法建模,假手术组和OA对照组在建模2周后开始生理盐水灌胃,OA治疗组等量芍药舒筋片灌胃。采用CCK-8溶液检测药物对细胞增殖的影响;软骨组织学采用Mankin评分;检测各组软骨细胞miRNA-140、Wnt-3a、β-catenin、GSK-3βmiRNA和蛋白表达。结果:OA对照组中软骨细胞的增殖速率、miRNA-140相对表达量均明显低于假手术组,而OA治疗组均明显高于OA对照组(P<0.05)。OA对照组中Mankin评分、细胞Wnt-3a、β-catenin、GSK-3βmiRNA和蛋白表达水平均明显高于假手术组,而OA治疗组均明显低于OA对照组(P<0.05)。结论:芍药舒筋片能够增加OA大鼠软骨细胞中miRNA-140的相对表达量和软骨细胞的增殖速率,降低Mankin评分,且能够通过调节Wnt/β-catenin信号通路活性来发挥其对关节软骨细胞的保护作用。

舒筋片定性定量方法研究

目的建立舒筋片的定性定量研究方法。方法应用TLC鉴别方内麻黄、大黄、红花和牡丹皮;采用HPLC对舒筋片中士的宁、丹皮酚、盐酸小檗碱和芍药苷进行含量测定。结果 TLC图谱中呈现出这4种物质的特征性斑点,且斑点显色清晰,分离度好;士的宁在4.18~37.58μg·mL^(-1)与峰面积线性关系良好,r=1.000,平均加样回收率102.3%,RSD=0.59%(n=6)。盐酸小檗碱在34.5~172.5μg·mL^(-1)与峰面积线性关系良好,r=1.000,平均加样回收率97.7%,RSD=0.88%(n=6)。丹皮酚在4.09~36.79μg·mL^(-1)与峰面积线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率99.8%,RSD=0.62%(n=6)。芍药苷在7.24~65.16μg·mL^(-1)与峰面积线性关系良好,r=0.9996,平均加样回收率99.6%,RSD=1.9%(n=6)。结论本法简单易行,重复性好,可以作为舒筋片的质量控制的标准,为医院制剂定性定量方法研究提供了科学依据。

HPLC法测定舒筋片中的延胡索乙素含量

目的 建立复方制剂舒筋片中有效成分延胡索乙素的含量测定方法。方法 采用酸溶碱沉法分离纯化延胡索中的延胡素乙素，并用HPLC法对其进行含量检测。结果 本品中延胡索乙素含量测定线性范围为0．2922-1．7532pg，平均加样回收率为100．28％（n=12），RSD为1．16％。结论 本测定方法简便可行、重复性好，可用于舒筋片的质量控制。

芍药舒筋片中全蝎蜈蚣的显微鉴别

目的显微鉴别芍药舒筋片中的全蝎和蜈蚣。方法查阅文献,确定全蝎、蜈蚣药材的鉴别特征,使用显微鉴别方法鉴别单味、混合药材及中成药中的全蝎和蜈蚣。结果成功对多批次芍药舒筋片中全蝎、蜈蚣进行显微鉴别,初步确定刚毛、体壁碎片及蜈蚣独有的组织器官为其不同特征。结论选取全蝎的刚毛、蜈蚣的气管道碎片作为其混合入药的主要鉴别特征;选取全蝎含有毛窝、瘤状突起、未骨化部分的体壁碎片作为其混合入药的辅助鉴别特征。为含有全蝎、蜈蚣混合粉末的中药复方提供简单、快捷、易行的鉴别方法。

高效液相色谱法测定舒筋活血片中香附烯酮和α-香附酮的含量

建立HPLC法测定舒筋活血片中香附烯酮和α-香附酮的含量。采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(65∶35)作为流动相,流速为1.0 mL/min;检测波长为254 nm;柱温30℃;进样体积5μL。结果显示,香附烯酮在0.422~2.530μg范围内线性关系良好,相关系数为1.000,α-香附酮在0.161~0.964μg范围内线性关系良好,相关系数为1.000;香附烯酮和α-香附酮的精密度、稳定性(24 h)、重复性实验的RSD均小于2.0%(n=6),香附烯酮平均回收率为101.9%,RSD为1.8%,α-香附酮平均回收率为102.7%,RSD为1.6%。该检测方法专属性好,准确度高,简单易行,能够为舒筋活血片的质量控制及评价提供技术支撑。

舒筋活血片联合悬吊推拿法对腰椎间盘突出症患者生物力学性能的影响

目的:探讨舒筋活血片联合悬吊推拿法对腰椎间盘突出症患者临床疗效及生物力学性能的影响。方法:选取郑州大学医院2021年3月—2022年3月收治的90例腰椎间盘突出症患者随机分为对照组和观察组,各45例。对照组以悬吊推拿法治疗,观察组增加舒筋活血片治疗。评估对比两组患者的临床疗效、中医证候积分、生物力学指标、炎症因子、治疗安全性等。结果:观察组总有效率为91.11%,高于对照组的73.33%(P<0.05)。治疗后,观察组中医证候积分(腰腿疼痛、腰部板硬、下肢麻木、舌质暗紫)均低于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组腰背肌平均功率(AP)、峰力矩(PT)高于对照组,腰背屈/伸比值(F/E)低于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组患者核因子κB(NF-κB)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)、Toll样受体4(TLR4)水平低于对照组(P<0.05)。治疗期间两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:舒筋活血片联合悬吊推拿法对腰椎间盘突出症患者治疗效果显著,可改善患者中医证候,增强患者腰背肌生物力学水平,抑制炎症因子水平,治疗安全性较好,可临床推荐。

骨折术后应用舒筋活血片临床观察

目的:观察骨折术后应用舒筋活血片的效果。方法:60例分为两组各30例。两组均行切开内复位固定术治疗,术后给予常规西药治疗,研究组加用舒筋活血片治疗。结果:研究组治疗后碱性磷酸酶(ALP)、血清胰岛素样生长因子(IGF)、Ⅰ型前胶原羧基末端肽(PICP)水平高于对照组(P<0.05),研究组完全消肿率高于对照组(P<0.05),研究组治疗后炎症因子水平低于对照组(P<0.05),两组不良反应发生率比较无统计学差异(P>0.05)。结论:舒筋活血片可减轻骨折术后肿胀和疼痛,促进骨折愈合,减轻炎症反应,且不良反应较少。

舒筋定痛片对斑马鱼胚胎发育的急性毒性研究

目的采用斑马鱼胚胎模型评价舒筋定痛片样品的急性毒性。方法以模式生物斑马鱼胚胎为实验对象,以不同硼砂含量的舒筋定痛片样品给药处理,野生型为阴性对照,于不同发育时间点观察给药后胚胎的发育情况,包括胚胎致畸、致死检测。结果舒筋定痛片4组测试样品在不同浓度下对斑马鱼胚胎发育有明显影响,高浓度时胚胎毒性以导致胚胎发育停滞为主,中浓度时可致发育滞后并出现心脏、脑、躯干等主要器官畸形,低浓度时大多数胚胎发育接近正常,少数胚胎出现胚胎发育中轻度的滞后。结论舒筋定痛片测试样品对斑马鱼胚胎发育的影响主要表现为高、中浓度下的胚胎发育停滞、滞后;同时,研究表明同一企业样品毒性作用与其中所含硼砂存在一定剂量依赖性正相关。

舒筋活血片中非法染色剂酸性红73的检测研究

目的 筛查确认舒筋活血片中非法添加的染色剂成分酸性红73并建立检测方法。方法 采用高效液相色谱法(HPLC)对舒筋活血片中非法添加的酸性红73进行筛查,并经HPLC-DAD和HPLC-MS/MS确认,最终采用HPLC测定含量。色谱条件:色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.05 mol/L乙酸铵溶液(B),梯度洗脱,流量为0.8 ml/min,柱温为30℃,进样量为20μl。结果 46批舒筋活血片样品中有4批检出含酸性红73染色剂。酸性红73进样量在0.004712~4.712μg范围内与峰面积有良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为97.91%,RSD为0.81%。结论 本方法简单、方便、准确、可靠,可对舒筋活血片中非法添加的酸性红73进行有效的排查检测。

芍药舒筋片对大鼠膝骨关节炎软骨病理及PⅡCP水平的影响

目的:评价芍药舒筋片对大鼠膝关节炎关节软骨病理改变及PⅡCP水平的影响。方法:将50只大鼠随机分成假手术组、模型组和受试药高、中、低剂量组,采用经典ACLT手术造模,手术后第2天灌胃给药4周后,腹主动脉取血,分离血清及取术侧膝关节。结果:通过Mankin评分提示,芍药舒筋片受试药组评分均小于模型组,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);通过ELISA检测血清PⅡCP浓度的统计提示,芍药舒筋片受试药组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:芍药舒筋片对大鼠膝骨关节软骨有一定的保护作用,可一定程度的预防膝骨关节炎关节软骨退变。

舒筋活血片质量标准研究

目的提高舒筋活血片的质量标准。方法分别用香加皮、香附和槲寄生对照药材和4甲-氧基水杨醛、α-香附酮、芒柄花素、原儿茶酸对照品做对照,采用薄层色谱法对处方中香加皮、香附、鸡血藤、槲寄生和狗脊进行定性鉴别。结果薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰。结论薄层色谱法简单、易行,专属性强,重现性好,可作为控制该制剂的质量标准。

舒筋活血片高效液相色谱数字化定量指纹谱和对数指纹谱研究

目的建立舒筋活血片(Shujin Huoxue Pian,SJHXP)数字化定量指纹谱和对数指纹谱,从数字定量化角度监控SJHXP质量。方法采用RP-HPLC法,以绿原酸为参照物峰,确定39个共有指纹峰,建立了SJHXP-HPLC数字化定量指纹谱和对数指纹谱。应用46个数字化参数定量揭示SJHXP-HPLC指纹图谱特征,用整体定量法鉴别14批次SJHXP质量。结果质量由极好到劣依次可分为1、2、3、4、5、6、7、8级,其中S5质量为3级,S6、S7、S10质量为5级,S13质量为6级,S3、S8、S14质量为7级,S1、S2、S4、S9、S11、S12质量为8级;对数指纹谱鉴定质量结果普遍升高。结论所建立SJHXP-HPLC数字化定量指纹谱和对数指纹谱能有效控制SJHXP质量,对数指纹谱能消除批间指纹差异,但却会导致鉴定信息失真。