基于网络药理学及分子对接方法探究舒胸方治疗冠心病的机制研究

目的:研究舒胸方治疗冠心病(CHD)的分子机制。方法:应用TCMSP获取舒胸方中红花、川芎、三七的化学成分,GeneCards和OMIM数据库预测舒胸方活性成分和冠心病靶点;用STRING数据库绘制成分-靶点PPI网络图;以Cytoscape软件绘制“成分-靶点-疾病”网络图,对于所获得的靶点和化合物分子信息应用微生信平台分别再进行GO和KEGG富集分析;使用PDB、Pubchem数据库和AutoDockTools软件对舒胸方核心化合物和CHD核心靶点进行分子对接。结果:筛得舒胸方中497个化学成分及8408个CHD的相关靶点;PPI网络分析获取353个交集靶点后,根据Degree值得到30个核心靶点,其主要核心靶点包括SRC、STAT3、PIK3R1等。GO功能富集分析得到112条与生物过程相关条目、102条与分子功能相关条目、63条与细胞组分相关条目(P<0.05),KEGG通路富集分析得到P13K-Akt、MAPK等164条通路(P<0.05)分子对接结果显示木脂素与SRC,6-羟基黄酮与STAT3,杨酶酮与PIK3R1具有较高的对接活性。结论:舒胸方的多种活性成分,如木脂素,6-羟基黄酮,杨酶酮可能通过抑制SRC,STAT3、PIK3R1的基因表达进而调控PI3K-AKT、MAPK等信号通路来治疗CHD。

舒胸方不同配伍情况下阿魏酸的溶出量研究

目的:建立高效液相色谱法测定舒胸方中阿魏酸含量的方法,考察舒胸方不同配伍对阿魏酸溶出量的影响。方法:采用高效液相色谱法,测定舒胸方不同配伍时水煎液中阿魏酸的含量,并对测得数据采用2×2析因设计的方差分析进行处理。结果:红花有促进阿魏酸溶出的作用,三七有抑制阿魏酸溶出的作用,全方合煎后红花、三七对阿魏酸溶出的作用相抵消,与单煎川芎无显著性差异。结论:舒胸方全方体现了配伍的整体作用。

冠心丹参方、精制冠心方和舒胸方对急性心肌缺血大鼠的保护作用比较研究

目的:研究并比较冠心丹参方、精制冠心方和舒胸方对急性心肌缺血大鼠的保护作用。方法:SD大鼠随机分为5组,连续给药7天,结扎左冠状动脉前降支造成大鼠心肌缺血,观察大鼠心电图ST段变化,分析大鼠心肌梗死面积,并检测血清一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)和心肌肌钙蛋白I(cTNI)含量。结果:冠心丹参方、精制冠心方和舒胸方均能降低模型大鼠ST段,减小心肌梗死面积,提高血清NO含量,降低血清ET-1和cTNI含量。结论:冠心丹参方、精制冠心方和舒胸方对急性心肌缺血大鼠均有很好的保护作用。

冠心丹参方、精制冠心方和舒胸方对急性心肌缺血大鼠血流动力学的影响

目的:研究冠心丹参方、精制冠心方和舒胸方对急性心肌缺血大鼠血流动力学的影响。方法:SD大鼠随机分为5组,连续给药7天,结扎左冠状动脉前降支造成大鼠急性心肌缺血,观察造模后3小时内各组大鼠血流动力学的变化。结果:冠心丹参方、精制冠心方和舒胸方均能升高左心室收缩压(LVSP)、左心室压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)、颈总动脉血流量和平均动脉压(MAP)。结论:冠心丹参方、精制冠心方和舒胸方对急性心肌缺血大鼠的保护作用可能与改善血流动力学指标有关。

RP-HPLC法同时测定舒胸方中7种有效成分

目的建立RP-HPLC同时测定舒胸方中盐酸川芎嗪、阿魏酸、羟基红花黄色素A、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、三七皂苷R1的方法。方法以舒胸方为研究对象，采用RP-HPLC法，以Inertsil ODS-SP（250mm×4．6mm，5μm）为分析柱，乙腈-0．05％磷酸水溶液为流动相，梯度洗脱（0-45min，15％乙腈；45-60min，15％-20％乙腈；60-80min，20％-38％乙腈；80-90min，15％乙腈），检测波长为203nm，柱温30℃，体积流量1．0mL／min，进样量为20μL。结果7种成分盐酸川芎嗪、阿魏酸、羟基红花黄色素A、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、三七皂苷R1线性范围分别为0．1010～1．364、0．0640～0．8670、1．020～13．77、1．699～22．95、1．869～25．23、0．1714～2．314、0．5160～6．966μg／mL，线性关系良好，r值均在0．9993～0．9999，平均加样回收率在97．25％～103．52％，RSD均〈3％。结论该方法简便、准确可靠，重复性好，分离度好，适用于同时测定舒胸方中主要7种有效成分。

舒胸方在Caco-2细胞单层模型的转运研究

舒胸方(三七、川芎和红花)具有活血化瘀、通络止痛功效,该文研究舒胸方在Caco-2细胞单层模型的转运特征。采用MTT法确定舒胸方对Caco-2细胞单层模型作用的安全浓度范围;采用Caco-2细胞单层模型探讨舒胸方对地高辛吸收转运的影响;采用HPLC测定并计算地高辛表观渗透系数Papp。结果显示,从顶侧(AP)到底侧(BL)(AP→BL),三七提取液、红花提取液、川芎提取液、(川芎+红花)混合提取液及舒胸方复方提取液表观渗透系数(Papp)分别为(3. 12±0. 73)×10-6,(2. 58±0. 41)×10-6,(4. 97±0. 64)×10-6,(4. 63±0. 57)×10-6,(5. 79±0. 68)×10-6cm·s-1,表明地高辛在Caco-2单层细胞膜转运中主要以主动吸收为主,且需要P-gp蛋白参与;川芎的加入能显著降低地高辛BL→AP方向的转运(P <0. 01),且能显著增加地高辛AP→BL方向的转运(P <0. 05);舒胸方提取液加入后,BL→AP方向地高辛转运受到显著抑制(P <0. 01)。研究结果提示,红花提取液不影响P-gp蛋白转运也未对地高辛自主扩散产生影响;川芎提取液和舒胸方提取液均显著降低了地高辛BL→AP方向的转运;三七对地高辛自主扩散并无影响;川芎红花混合提取液与川芎提取液实验结果类似。

舒胸方体外清除自由基研究

研究不同温度下舒胸方提取液抗氧化活性的影响,分析抗氧化活性的动态变化规律。试验结果表明:舒胸方的抗氧化活性随温度升高也呈现先增加后减小的趋势,其中对脂质体的抑制率、DPPH和ABTS+自由基清除率均高于Vc,而对OH自由基的清除能力低于Vc。所建立的动力学模型能有效预测不同温度下舒胸方提取液含量和抗氧化活性的变化规律。研究结果可为舒胸方提取液深加工提供理论依据。