抗特发性肺纤维化药物吡非尼酮和舒非尼酮在小鼠结核病模型肺损伤中的保护作用研究

目的在小鼠结核病模型中评价抗特发性肺纤维化上市药物吡非尼酮(Pirfenidone,PFD)和临床药物舒非尼酮(SC1011)对肺损伤的保护作用。方法建立C57BL/6小鼠结核病模型。1×10^(7)CFU/ml H37Rv菌悬液通过气溶胶感染75只C57BL/6小鼠,随机数字表法分为未处理组(n=9)、异烟肼H+利福平R+吡嗪酰胺Z(HRZ)治疗组(n=22)、PFD+HRZ治疗组(n=22)和SC1011+HRZ治疗组(n=22)。感染6周后开始给药治疗,分别于给药4、8周取各治疗组7只小鼠进行称重、处死、解剖、观察肺脏和脾脏病变;HE染色、Masson染色,评估肺损伤和肺纤维化程度;ELISA法评估治疗4周各治疗组小鼠血清中IFN-γ/TNF-α含量。碱水解法测定肺组织中羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量;同时通过CFU计数,评估各治疗组小鼠肺脾内的载菌量及停药12周后脾、肺组织的复发情况。结果8周PFD+HRZ治疗组、SC1011+HRZ治疗组、HRZ治疗组肺组织HYP含量分别为(630±58)、(635±17)、(840±70)μg/mg(P<0.05);8周肺组织Masson染色蓝染区域面积即阳性面积比例分别为16.65%±1.82%、10.01%±2.16%、21.36%±3.21%(F=27.11,P<0.001);8周HE染色肺损伤评分分别为(5.00±0.50)、(5.00±0.47)、(6.89±0.99)分(F=19.81,P<0.001)。4周ELISA实验结果显示SC1011+HRZ治疗组血清中TNF-α、IFN-γ水平均低于HRZ治疗组(均P<0.05)。PFD+HRZ、SC1011+HRZ治疗组肺损伤程度以及肺纤维化程度均低于HRZ治疗组(均P<0.001)。PFD+HRZ、SC1011+HRZ、HRZ三个治疗组治疗4周小鼠肺组织中活菌数量均低于未处理组[(1.82±0.10)、(1.91±0.05)、(1.79±0.17)比(5.27±0.07)lg(CFU+1)/ml,均P<0.05],并且各治疗组均在给药8周达到小鼠脾脏无菌化。停药12周后,SC1011+HRZ治疗组的肺部感染复发情况低于HRZ治疗组(3/7比5/7,P>0.05);SC1011+HRZ治疗组的脾脏感染复发情况低于HRZ治疗组(1/7比5/7,P>0.05)。PFD+HRZ治疗组的肺部感染的复发情况高于HRZ治疗组(6/7比5/7,P>0.05)。结论在C57BL/6小鼠结核病模型中,PFD/SC1011与HRZ联用可以减轻肺损伤和降低肺结核继发性纤维化。SC1011与HRZ联用时对MTB的近期治疗效果不显著,但在远期治疗上可能降低其复发率,尤其在降低小鼠脾脏的复发率上作用明显。