强效抑酸治疗与艰难梭状芽孢杆菌性腹泻

酸相关性疾病使用抑酸剂治疗较为普遍，抑酸结果是否引起艰难梭状芽孢杆菌性腹泻意见不一，本文采用文献荟萃分析方法，对此问题进行探讨，现将有关资料报告如下。

使用Real-Time PCR粪便中检测艰难梭状芽孢杆菌

目的:探讨Real-Time PCR对粪便检测艰难梭菌的可行性。方法:以组织培养细胞毒素试验为标准,参考艰难梭菌的毒素A/B基因相应的引物和分子信标探针,对标准菌株和粪便提取的DNA实行Real-Time PCR扩增。结果:Real-Time PCR的敏感度为96.9%;特异性为100%;阳性预测值为100%;阴性预测值为98.3%。结论:Real-TimePCR与传统诊断方法相比具有快速、敏感、特异等优点,可以提高艰难梭菌的检测水平。

PPI引起艰难梭状芽孢杆菌性腹泻的危险因素

目的:评价治疗酸相关性疾病患者的质子泵抑制剂是引起艰难梭状芽孢杆菌性腹泻的另类危险因素。方法:查阅近期文献进行评价和分析。结果:队列研究表明艰难梭状芽孢杆菌性腹泻发生于约6.8%用过抗生素的住院患者,多自变量因素分析表明艰难梭状芽孢菌性腹泻与质子泵抑制剂的应用明显相关。结论:抗生素破坏了正常肠道菌群,公认是引起艰难梭状芽孢杆菌性腹泻的危险因素,而胃酸度降低一直被认为是其危险因素,质子泵抑制剂因为其强力的抑酸作用,可能是致艰难梭状芽孢杆菌性腹泻的独立危险因素。

克林霉素毒副作用与艰难梭状芽孢杆菌的关系

目的探讨克林霉素与艰难梭状芽孢杆菌的关系。方法2008年10月至2009年1月对应用克林霉素患者320例进行观察,了解记录出现腹泻出现,病例数、出现时间、临床症状并进行培养确诊艰难梭状芽孢杆菌感染。结果应用克林霉素患者320例68例腹泻患者艰难梭状芽孢杆菌感染31例,艰难梭状芽孢杆菌率9.68%,占腹泻发生例数45.58%。结论应用克林霉素容易造成艰难梭状芽孢杆菌引起高度重视,在临床应用中应严格掌握克林霉素的抗菌谱、适应证和用法、用量,避免滥用、过量、长时间应用等措施以免引起条件致病菌艰难梭状芽孢杆菌感染。

重组艰难梭状芽孢杆菌毒素TcdB对人体肠上皮细胞层功能的影响

利用Transwell小室体外建立人结肠细胞T84上皮细胞层,分析不同质量浓度重组艰难梭状芽孢杆菌毒素TcdB(1 000、100、10ng/mL)对上皮细胞层跨膜电阻(TER)的影响;通过免疫荧光染色分析TcdB对上皮细胞层结构的影响;运用荧光标记葡聚糖作为指示剂,检测毒素作用后上皮细胞层的旁通路渗透情况;通过细胞毒性分析,检测上皮细胞层功能受损情况下,TcdB的跨膜渗透。结果发现:重组艰难梭状芽孢杆菌毒素TcdB能引起剂量依赖性单层上皮组织跨膜电阻降低和渗透性增加,在24h内质量浓度为1 000、100、10ng/mL的TcdB能导致上皮细胞层分别丧失100%、70%、50%电阻力,同时分别引起30%、20%、10%的葡聚糖渗透;上皮细胞层受损后,大分子毒素通过旁通路的非正常跨膜渗透也增加。共聚焦分析显示上皮细胞层的细胞间紧密连接结构受损。综上所述,艰难梭状芽孢杆菌毒素TcdB介导的体外培养人T84肠上皮细胞层功能损伤主要表现为电生理学功能异常,旁通路渗透性增加,细胞间紧密连接结构破坏。

机械通气患者艰难梭状芽孢杆菌感染危险因素及预后分析

目的探讨机械通气患者艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素,并分析其预后,为临床预防及治疗提供理论依据。方法自2017年1月至2017年12月,连续性收集无锡市第二人民医院收治的机械通气患者382例,常规进行艰难梭状芽孢杆菌检测,共49例患者发生艰难梭状芽孢杆菌感染,分析不同临床特征患者艰难梭状芽孢杆菌感染率及危险因素,同时使用多因素回归分析探讨艰难梭状芽孢杆菌感染对患者院内死亡的影响。结果使用抗生素≥3种、急性生理功能与慢性健康状况评分系统Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ)评分≥20分、序贯器官衰竭评估(sequential organ failure assessment,SOFA)评分≥4分、机械通气时间≥14天、多器官功能衰竭、质子泵抑制剂使用时间≥14天、住院天数≥30天及死亡的患者艰难梭状芽孢杆菌感染率均显著升高(P_均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示:APACHEⅡ评分≥20分、死亡、多器官功能衰竭、使用抗生素≥3种、机械通气时间≥14天是导致机械通气患者艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素(P_均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示艰难梭状芽孢杆菌感染是机械通气患者院内死亡的危险因素(P<0.05)。结论机械通气患者艰难梭状芽孢杆菌感染率较高,可导致患者院内死亡率升高,应常规检测并加强干预。

60例脓毒性休克患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素分析及其防治措施

目的:分析脓毒性休克患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素及其预防措施。方法:选取医院2016年8月-2019年8月间收治的脓毒性休克患者60例资料,分析其艰难梭状芽孢杆菌感染的发生与相关因素关系。结果:60例脓毒性休克患者中,并发艰难梭状芽孢杆菌感染发生率为75.00%;经Logistic分析,急性与慢性健康评分(APACHEⅡ)的评分值≥20分、实施机械通气、血乳酸水平≥4 mmol/L、抗菌药物使用时长≥14 d均为影响艰难梭状芽孢杆菌感染发生的危险因素,而实施血液净化对预防艰难梭状芽孢杆菌感染发生具有保护因素(P<0.05)。结论:APACHEⅡ评分值≥20分、实施机械通气、血乳酸水平≥4 mmol/L、抗菌药物使用时长≥14 d均属于脓毒性休克并发艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素;而血管活性药物使用时长≥7 d、实施血液净化为保护因素,临床应密切关注导致其感染的危险因素,以降低其感染的发生率。

实时荧光定量PCR法检测人粪便中艰难梭状芽孢杆菌

目的摸索并明确实时荧光定量PCR技术检测人体肠道粪便中艰难梭状芽孢杆菌的方法。方法用16S rRNA real-time PCR方法检测喘息患儿与正常儿童肠道内梭状芽孢杆菌的数量。结果常规PCR扩增出艰难梭状芽孢杆菌16S rRNA部分基因片段长度为500 bp^750 bp,测序结果正确,符合预期,成功构建了艰难梭状芽孢杆菌实时荧光定量PCR中的标准品,生成的标准曲线r2>0.995;实时荧光定量PCR产物的溶解曲线为单峰,表明实时荧光定量PCR的特异性强。对待测80份样本分批进行荧光定量PCR检测,各组间标准品Ct值的变异系数(CV)为4.96%、3.45%、2.46%、2.43%和2.75%。80份儿童粪便样本中艰难梭状芽孢杆菌含量的对数值为3.70±2.71(copy/g湿便)。结论本研究表明,实时荧光定量PCR方法操作简便、灵敏度高、特异性强、自动化程度高,适用于人体粪便中艰难梭状芽孢杆菌含量的检测。

脓毒性休克合并艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素分析

目的艰难梭状芽孢杆菌是导致重症患者预后不良、住院时间延长的主要因素,本研究旨在分析脓毒性休克患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素。方法回顾性分析2015年1月—2016年12月宁波市第二医院收治的218例脓毒性休克患者的临床资料,根据是否并发艰难梭状芽孢杆菌感染,将患者分为感染组(n=56)和未感染组(n=162)。比较2组临床特征及干预情况,并采用多因素Logistic回归分析方法分析艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素。结果感染组患者入院时APPACHEⅡ评分≥20分(57.14%vs.31.48%,P=0.001)、血乳酸水平≥4 mmol/L(67.86%vs.46.91%,P=0.007)、肾功能衰竭(71.43%vs.46.30%,P=0.001)、肺功能衰竭(75.00%vs.54.32%,P=0.007)、多脏器功能衰竭(51.79%vs.30.86%,P=0.005)、抗菌药物使用时间≥14 d(60.71%vs.41.98%,P=0.015)、PPI使用时间≥14 d(60.71%vs.44.44%,P=0.036)、血管活性药物使用时间≥7 d(41.07%vs.25.93%,P=0.033)、行机械通气(62.50%vs.40.74%,P=0.005)及血液滤过(50.00%vs.34.57%,P=0.041)的患者比例显著高于未感染组。多因素Logistic回归分析结果显示:入院时APPACHEⅡ评分≥20分和肺功能衰竭是脓毒性休克患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的独立危险因素(P<0.05)。结论入院时APPACHEⅡ评分≥20分和肺功能衰竭是脓毒性休克患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的独立危险因素,对这类危重患者要加强监护和预防,以降低艰难梭状芽孢杆菌感染率。

质子泵抑制剂使用与ICU患者艰难梭状芽孢杆菌感染腹泻的相关性研究

目的质子泵抑制剂(Proton pump inhibitors,PPI)已经被证实与艰难梭状芽孢杆菌相关腹泻(Clostridium difficile-associated diarrhea,CDAD)相关,但是关于重症监护病房(Intensive Care Unit,ICU)患者的研究仍然较少或没有系统性的分析,我们探讨ICU患者中应用PPI增加CDAD的风险。方法采用回顾性的病例对照研究,感染艰难梭状芽胞杆菌(Clostridium difficile,CD)的患者使用ICD-9编码作为第二诊断进行鉴定。患者在感染CD前必须在ICU入住超过48h,然后使用ICD-9首次诊断、年龄(±5岁)和SOFA评分(±1)选取未感染CD的患者作为对照组与之配对。回顾成功配对的患者关于PPI使用情况及其他潜在的CD感染混杂变量。PPI使用分为<2d和≥2d。运用多变量模型确定感染CD的风险因素。结果共有300例患者入组,其中有81%的患者接受了PPI治疗。病例组有85%的患者使用PPI≥2d,而对照组只有72%(P=0.011)。在多变量(使用PPI≥2d,使用H2RA,使用抗生素,使用免疫抑制剂分析中,使用PPI≥2d(OR(95%CI)=1.887(1.023~3.478),(P=0.042)和使用抗生素(OR(95%CI)=2.620(1.093~6.278),(P=0.031)分别是引起CD感染的两个独立因素。结论 PPI是ICU患者感染CD的独立风险因素,尤其是在使用2d或更久的PPI的情况下。

艰难梭状芽孢杆菌谷氨酸脱氢酶的原核表达、纯化及其酶活性

目的原核表达艰难梭状芽孢杆菌(Clostridium difficile,CD)谷氨酸脱氢酶(Glutamate dehydrogenase,GDH),纯化重组蛋白,并检测其酶活性。方法采用PCR法从标准株ATCC BAA-1805中扩增GDH基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组表达质粒pET-28-GDH,转化感受态大肠杆菌Rosetta(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,并通过Ni-NAT层析柱分离纯化后,根据脱氢酶酶活测定方法,测定纯化蛋白的酶活性。结果重组表达质粒pET-28-GDH经双酶切及测序,证实构建正确,重组蛋白的相对分子质量约46 000,可与抗His单抗特异性结合,主要以可溶性形式表达。纯化的目的蛋白纯度可达90%,浓度为1.7 mg/ml。纯化蛋白GDH以NADPH和NADP为辅酶,酶活性分别为42.6和63.3 U/L。结论已成功在大肠杆菌中表达了重组CD GDH,纯化的目的蛋白纯度高,具有GDH酶活性,为制备GDH单克隆抗体奠定了基础。

重症急性胰腺炎患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素

目的探讨重症急性胰腺炎患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素。方法前瞻性收集2016年1月至2017年1月收治的重症急性胰腺炎患者134例。根据患者住院期间是否发生艰难梭状芽孢杆菌感染,将患者分为感染组(n=45)和对照组(n=89),比较2组患者质子泵抑制剂使用情况及其他临床特征,同时采用多因素Logistic回归分析探讨艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素。结果感染组质子泵抑制剂使用天数<3 d、<7 d、<14 d和≥14 d的比例分别为2. 22%、15. 56%、26. 67%和55. 56%,对照组分别为13. 48%、40. 45%、31. 46%和14. 61%,差异有高度统计学意义(P <0. 01)。与对照组比较,感染组患者APPACHEⅡ≥10、休克、腹腔感染、多器官功能衰竭、机械通气、抗生素使用≥7d比例显著增加(P <0. 05)。多因素Logistic回归分析显示质子泵抑制剂使用≥14d、APPACHEⅡ≥10、机械通气、多脏器功能衰竭和休克是重症急性胰腺炎患者艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素(P <0. 05)。结论控制重症急性胰腺炎患者并发艰难梭状芽孢杆菌感染的危险因素:质子泵抑制剂使用≥14 d、APPACHEⅡ≥10、机械通气、多脏器功能衰竭和休克等,对积极预防艰难梭状芽孢杆菌感染具有重要意义。

创伤性骨折患者艰难梭状芽孢杆菌感染的流行病学调查及对临床预后的影响

目的探讨创伤性骨折患者艰难梭状芽孢杆菌感染的流行病学调查及对患者临床预后的影响,为创伤性骨折患者艰难梭状芽孢杆菌感染的临床预防提供可靠依据。方法选择2012年5月-2016年5月医院骨科收治的创伤性开放性骨折合并腹泻患者185例,将检出艰难梭状芽孢杆菌感染28例患者作为阳性组,再选择60例无艰难梭状芽孢杆菌感染患者作为阴性组,分析艰难梭状芽胞杆菌感染危险因素、艰难梭状芽胞杆菌感染对患者血清炎症因子水平的影响以及对患者日常生活能力(ADL)评分及住院时间的影响。结果送检185份标本中,共检出艰难梭状芽孢杆菌毒素检测阳性28份,阳性率15.14%;单因素及多因素logistic分析显示,合并胃肠道疾病及腹泻天数为创伤性开放性骨折患者发生艰难梭状芽胞杆菌感染的独立危险因素;艰难梭状芽孢杆菌感染阳性组患者其血清降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平显著高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);艰难梭状芽孢杆菌检出阳性组患者其ADL评分显著低于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05),阳性组住院时间显著长于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论合并胃肠疾病及长时间腹泻是创伤性开放性骨折住院患者艰难梭状芽孢杆菌感染的独立危险因素,艰难梭状芽孢杆菌感染将引起患者机体炎症水平的升高,影响患者预后。

粪菌移植治疗肠道艰难梭状芽孢杆菌感染1例

艰难梭状芽孢杆菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)是抗生素相关性腹泻主要的病因,也是医院获得性感染主要的病因之一[1]。CDI在全球范围的发病,尤其是重症CDI的发病及CDI相关的死亡均呈上升趋势[2]。但目前,临床医务工作者,尤其是基层医院的临床医务工作者对CDI的认识及早期辨别难治性CDI尚且不足。本文报道本院消化内分泌科收治并成功救治的老年人肠道CDI患者1例,并结合相关文献对诊治经验及思路进行讨论,旨在提高临床医务工作者对CDI的认识。

艰难梭状芽孢杆菌感染对机械通气患者临床转归的影响

目的探讨艰难梭状芽孢杆菌感染对机械通气患者临床转归的影响。方法回顾性收集医院2013年1月-2018年1月收治的机械通气患者989例临床资料,根据患者住院期间是否发生艰难梭状芽孢杆菌感染,将患者分为感染组(n=40)和对照组(n=949),观察两组患者主要临床特征,同时采用多因素Logistic回归分析探讨艰难梭状芽孢杆菌感染对机械通气患者临床预后的影响。结果与对照组比较,感染组患者APACHEⅡ评分、抗菌药物使用时间、机械通气时间、质子泵抑制剂使用时间均延长(P<0.001),新发脏器功能损伤率增加(52.50%vs.26.24%)(P<0.001);多因素Logistic回归分析显示艰难梭状芽孢杆菌感染是机械通气患者住院期间新发脏器功能损伤的危险因素(P<0.05)。结论艰难梭状芽孢杆菌感染可加重机械通气患者脏器功能损伤,其发生率较高,临床应加强防治。

创伤性骨折患者艰难梭状芽孢杆菌感染流行病学调查

目的调查创伤性骨折患者艰难梭状芽孢杆菌感染流行病学,为临床疾病感染防控提供指导。方法收集289例创伤性骨折患者临床资料,检测患者粪便样本中艰难梭状芽孢杆菌感染情况。调查患者血清炎症因子水平及临床指标,并进行统计学分析。结果 289例创伤性骨折患者中,艰难梭状芽胞杆菌感染113例,感染率39.10%。男性患者艰难梭状芽孢杆菌感染率46.94%,女性30.99%,差异有统计学意义(χ2=7.719 5,P<0.05);白细胞<3.0×10~9/L患者感染率48.57%,白细胞≥3.0×10~9/L患者感染率30.20%,差异有统计学意义(χ2=10.229 2,P<0.05);使用抗菌药物患者感染率45.86%,未使用抗菌药物患者感染率31.06%,差异有统计学意义(χ2=6.595 7,P<0.05);合并胃肠道疾病患者感染率47.02%,未合并胃肠道疾病患者感染率30.43%,差异有统计学意义(χ2=8.329 1,P<0.05)。年龄<50岁患者感染率35.63%,≥50岁患者44.35%,差异无统计学意义(χ2=2.208 8,P>0.05);体温<38℃患者感染率36.65%,体温≥38℃患者感染率42.19%,差异无统计学意义(χ2=0.919 6,P>0.05)。艰难梭状芽孢杆菌感染患者血清炎症因子PCT、hs-CRP以及IL-6水平显著高于未感染组。艰难梭状芽孢杆菌检出阳性组患者ADL评分显著低于阴性组,阳性组住院时间显著长于阴性组。结论男性、白细胞数高、使用抗菌药物、以及合并胃肠道疾病患者发生艰难梭状芽胞杆菌感染率较高。艰难梭状芽孢杆菌感染引起患者机体炎症水平升高,降低ADL评分,延长患者住院时间,影响患者预后。

ILC相关细胞因子在艰难梭状芽孢杆菌感染中的作用

艰难梭状芽孢杆菌感染(Clostridium difficile infection, CDI)是医院获得性胃肠道感染的主要原因,给医疗系统带来极大负担。近年来有报道称ILC相关细胞因子在CDI的发生、发展和转归中扮演重要角色,但其机制尚不明确。文章将对ILC相关细胞因子在CD感染发病机制中作用的研究进展进行综述,以期为CD感染的发病机制与临床治疗提供新思路。

异基因造血干细胞移植过程中患者艰难梭菌感染与肠道微生态失调关系的临床研究

本研究探讨异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)过程中患者艰难梭菌相关性腹泻(clostridium difficile associated diarrhea,CDAD)与肠道微生态的关系,了解肠道微生态失衡的临床特征,寻找有效防治措施,保护肠道菌群,减少细菌易位及感染的发生。对44例allo-HSCT后腹泻患者采用艰难梭菌毒素A&B检测试剂盒进行毒素检测,采用厌氧培养方法进行艰难梭菌的分离、鉴定。对患者粪便标本进行肠道微生态研究;采用光冈复合式法对目的菌群(双歧杆菌、乳酸杆菌、类杆菌、消化链球菌、产气荚膜梭菌、肠杆菌、肠球菌、酵母菌)进行定性定量分析。结果表明:44例腹泻患者中共检测出12例艰难梭菌阳性,阳性率为27.27%;CDAD的发生与使用抗生素或化疗药物有关;CDAD患者的肠道微生态发生了明显变化,表现为乳酸杆菌、双歧杆菌、类杆菌、肠杆菌等细菌数量明显下降;对CDAD用万古霉素、甲硝唑等药物并配合给予益生菌治疗效果好,但有一定复发率(16.67%)。结论:allo-HSCT并发CDAD与肠道微生态的改变有关,应用敏感抗生素治疗的同时应积极扶植肠道菌群,这样的治疗有利于改善病情和减少复发。

中国部分地区艰难梭菌PCR-核糖体分型及毒素基因多态性研究

目的了解中国部分地区艰难梭菌聚合酶链反应(PCR)-核糖体型别分布及其A、B毒素基因多态性,为建立适宜中国的艰难梭菌分子检测和分子分型技术提供基础数据,同时在基因水平上为艰难梭菌感染导致的复杂临床表现提供依据。方法对中国3个城市(北京、广州、济南)分离的64株艰难梭菌临床株进行PCR-核糖体分型,并对不同型别的26株代表菌株的A、B毒素基因进行扩增测序。结果 64株艰难梭菌中,毒素基因型以A+B+型(45株,70.31%)为主,A-B+型19株(29.69%)。共存在9种PCR-核糖体型别,以017型(21株,32.81%)为主要型别,其次为001型(13株,20.31%)、012型(11株,17.19%)。A-B+菌株中,14株(73.68%)是017型,1株是001型。A、B毒素基因呈现一定的多态性,其中有7种A毒素序列型别(TSTA),6种B毒素序列型别(TSTB),8种A、B毒素序列型别组合(TSTG)。结论我国部分地区的艰难梭菌可能以PCR-核糖体017型为主,A、B毒素基因在菌株间存在多态性,且核糖体型别与毒素基因多态性间存在相对应的关联。应进一步扩大菌株数量和范围,探寻适合我国的分子检测和分子分型方法,从而帮助医院更好地预防和控制艰难梭菌感染。