酶联荧光免疫分析技术检测粪便中艰难梭菌毒素A/B

目的应用酶联荧光免疫分析(ELFIA)技术及PCR联合检测粪便标本中艰难梭菌毒素A/B(CDAB),分析不同临床表现的住院患者粪便标本中CDAB的检出情况。方法收集北京大学第一医院2010年8月～11月242位住院患者粪便标本,用ELFIA法检测CDAB,对检测结果为可疑的标本用PCR复测。将患者分为非抗生素相关腹泻组和抗生素相关腹泻组,对两组的CDAB阳性率进行χ2检验,并分析检测结果与临床表现的相关性。结果 242位患者中,22例ELFIA法CDAB检测为阳性,12例检测结果为可疑。12例可疑标本有10例进行了PCR复测,8例(80.0%)CDAB基因阳性。两法联合检测共计30例为CDAB阳性,阳性率为12.4%。抗生素相关腹泻组CDAB阳性率(24.0%)显著高于非抗生素相关腹泻组(6.9%)(χ2=14.21,P<0.01)。CDAB阳性组的年龄(68.2±23.6)岁高于CDAB阴性组(58.7±23.9)岁(P<0.05)。结论 ELFIA法检测CDAB,有商品试剂盒,方法简便可靠。可疑阳性标本用PCR法检测tcdA/tcdB基因,可进一步提高阳性率。艰难梭菌毒素在抗生素相关腹泻患者检出率较高,与临床表现具有较好的相关性。

艰难梭菌毒素A/B、BD-PCR毒素基因及GDH检测对艰难梭菌相关性腹泻的诊断价值

目的探讨艰难梭菌毒素A/B及其相关毒素基因检测对艰难梭菌相关性腹泻的诊断价值。方法收集2015年1月至2015年10月我院ICU病房腹泻疑似艰难梭菌感染患者的粪便标本133例作为研究对象,分别采用艰难梭菌培养法、CDAB法、PCR毒素基因检测法及艰难梭菌毒素GDH检测法进行检测,以艰难梭菌培养法结果为金标准,计算各方法的诊断指标所包含有的特异度、敏感度、阴性预测值和阳性预测值等。结果本研究收集的133例粪便标本中,经过金标准粪便样本厌氧培养法检出阳性结果 20例,阴性结果 113例。CDAB法具有低敏感度(0.550)和高特异度(0.912),诊断符合率为0.932,BD-PCR毒素基因检测法具有高敏感度(0.950)和高特异度(0.929),诊断符合率为0.932,艰难梭菌毒素GDH检测法的高敏感度(0.900)和低特异度(0.779),诊断符合率为0.797。结论对于疑似艰难梭菌感染,可联合艰难梭菌GDH、艰难梭菌毒素A/B(CDAB)或进行荧光定量PCR毒素基因共同检测,有效降低检测时间,为临床医师及时提供准确的诊断依据,并制定行之有效的治疗措施。

台山地区艰难梭菌毒素A/B检测在院外和院内感染的临床应用

目的探讨艰难梭菌毒素A/B检测在台山地区院外和院内感染中的应用。方法收集2013年5月~2014年10月528例刚入院腹泻患者的粪便标本作为院外感染可疑病例组（院外感染组）,年龄段在8~75岁,男249例,女279例;收集同时间段523例住院超一周以上并使用抗生素3天以上的患者的粪便标本作为院内感染的可疑病例组（院内感染组）,年龄段在7~74岁,男209例,女314例。分别进行艰难梭菌毒素A/B检测,并结合细菌培养结果、临床诊断和疗效进行综合统计学分析。结果院外感染艰难梭菌率4%,院内使用抗生素后感染率16%。艰难梭菌毒素A/B检测对院外感染的检出率为85%,对院内感染的检出率为90%。结论艰难梭菌毒素A/B检测对台山地区院外和院内感染检测快速准确,值得在临床上推广应用。

艰难梭菌的检测及临床分析

目的：了解我院艰难梭菌的感染流行情况,为防控院感爆发提供理论依据.方法：收集2016～2017年期间住院腹泻患者的大便标本,用艰难梭菌鉴别培养基显色培养,通过筛查菌落形态、 镜检,最终依赖质谱鉴定.同时对大便标本使用酶联荧光免疫测定艰难梭菌毒素A/B.收集阳性患者的临床资料,分析艰难梭菌感染相关的危险因素.结果：收集的大便标本经厌氧培养及鉴定,艰难梭菌培养阳性率为16.5％,艰难梭菌毒素检出率为12.3％,差异无统计学意义.单因素分析发现头孢一代、 头孢三代、 抗生素联用是引起艰难梭菌感染的潜在危险因素.多因素分析发现头孢三代的使用是感染艰难梭菌的独立危险因素.结论：我院艰难梭菌存在一定流行情况,同时存在易感因素,应严密监测,积极预防及控制.

腹泻患者艰难梭菌及其毒素A/B检出率分析

目的了解住院腹泻患者艰难梭菌及其毒素A/B的检出情况,为临床诊断抗生素相关性腹泻提供参考依据。方法收集2015年9月至2016年8月崇州市人民医院疑似抗生素相关性腹泻住院患者的粪便标本163份,用艰难梭菌快速检测试剂盒检测艰难梭菌特异性抗原谷氨酸脱氢酶(GDH);用酶联免疫荧光法检测GDH阳性标本中艰难梭菌毒素A/B的产生情况。结果 163份粪便标本中GDH阳性为34份,阳性率为20.86%。34份GDH阳性标本中艰难梭菌毒素A/B阳性率为41.18%(14/34),可疑阳性率为17.65%(6/34),阴性率为41.18%(14/34)。结论疑似抗生素相关性腹泻住院患者艰难梭菌GDH检出率较高,毒素A/B阳性率也比较高,提示临床应重视抗生素相关性腹泻患者艰难梭菌感染的诊断。

艰难梭菌培养联合酶法检测毒素蛋白(A/B)的临床应用价值探索

目的通过对艰难梭菌培养及毒素检测方法比较,建立艰难梭菌培养联合酶法检测毒素蛋白(A/B)的检测流程,评估其临床应用。方法收集 2015 年-2017 年住院腹泻患者粪便标本 852份,采用显色培养法( ChromID^TM)培养艰难梭菌,阳性菌株用酶联免疫荧光法检测其毒素蛋白A/B( Clostridium difficile toxins A and B,CDAB);用酶联免疫荧光法检测毒素蛋白A/B及阳性菌株,用PCR方法检测其tcdA和(或)tedB基因进行比较,运用检出率、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值进行效能评价。结果852 例粪便标本经显色培养共分离菌108株,粪便直接酶法A/B毒素蛋白检出率为5.99%(51/852);阳性菌株联合酶法检测A/B毒素蛋白检出率为10. 92%(93/852);108株阳性菌株联合PCR方法93株表达tcdA^+tcdB^+;6株表达tcdA^-tcdB^+;9株未表达,为tedA^-tcdB^-;阳性菌株用酶法检测毒素蛋白A/B结果93株阳性,15株阴性,且93株阳性经PCR检测基因均表达tedA^+tcdB^+;以PCR检测艰难梭菌毒素基因作为参考方法,培养阳性菌株联合酶法、粪便直接酶法检测毒素蛋白A/B的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为93. 94%、100%、100%.60%和51.52%、100%、100%、15. 79%;致性检验Kappa值分别为0.721和0. 150。结论显色培养后阳性菌株联合酶法检测艰难梭菌毒素蛋白A/B可以提高艰难梭菌检出率,与PCR毒素基因检测有较好一致性,操作简单,具有较好的临床应用价值。