目的 观察人核糖核酸酶抑制因子(RI)逆转录病毒真核表达载体(p L NCX- ri)对小鼠B16黑素瘤生长的抑制作用。方法 将转染细胞PA317- p L NCX和PA317- p L NCX- ri分别置于DMEM培养基上,经G4 18筛选培养。用Sepharose CL- 4 B凝胶过滤...目的 观察人核糖核酸酶抑制因子(RI)逆转录病毒真核表达载体(p L NCX- ri)对小鼠B16黑素瘤生长的抑制作用。方法 将转染细胞PA317- p L NCX和PA317- p L NCX- ri分别置于DMEM培养基上,经G4 18筛选培养。用Sepharose CL- 4 B凝胶过滤层析纯化病毒颗粒。经G4 18筛选培养,在倒置相差显微镜下计数克隆细胞数。用RT- PCR方法和Western blotting方法检测被感染的NIH3T3细胞及B16黑素瘤组织中RI基因的表达。给接种B16黑素瘤细胞的C5 7BL/ 6 J小鼠分别皮下注射纯化的p L NCX- ri病毒和空载体病毒,观察C5 7BL/ 6 J小鼠肿瘤的生长状况,并对肿瘤组织称重。镜下观察肿瘤组织切片的血管密度。结果 RI在感染了p L NCX- ri病毒的NIH3T3细胞和B16黑素瘤组织中得到有效表达。p L NCX- ri病毒治疗组的瘤组织重量(0 .6 0±0 .2 6 ) g明显低于p L NCX病毒对照组(1.84±1.6 4 ) g(P<0 .0 1)和生理盐水对照组(1.77±1.13) g(P<0 .0 1)。p L NCX病毒对照组(1.84±1.6 4 ) g和生理盐水对照组(1.77±1.13) g无显著性差异(P>0 .0 5 )。与p L NCX病毒对照组和生理盐水对照组相比,p L NCX- ri病毒治疗组肿瘤组织的血管密度明显减少,而两对照组间无明显差异。结论 人核糖核酸酶抑制因子(RI)展开更多