色素框同源蛋白8在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨色素框同源蛋白8(CBX8)在大肠癌组织及癌旁组织中的表达情况及其意义。方法应用荧光定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫组化方法检测172例大肠癌患者的癌组织、癌旁组织中CBX8的表达情况,并分析其与临床病理因素的关系。根据大肠癌组织CBX8的表达水平将172例患者分为CBX8低表达组70例、高表达组102例。结果大肠癌组织中CBX8表达水平及阳性率均明显高于癌旁组织(P<0.05);CBX8低表达组、高表达组患者的性别、年龄、诊断(直肠癌或者结肠癌)比较,差异无统计学意义(P>0.05);CBX8低表达组、高表达组患者肿瘤细胞分化程度、术前血清癌胚抗原(CEA)水平、是否血管侵犯及TNM分期比较,差异有统计学意义(P<0.05);Cox单因素分析显示,肿瘤细胞分化、术前血清CEA水平、血管侵犯以及癌组织CBX8的表达是影响大肠癌患者预后的危险因素(P<0.05);Cox多因素分析显示,术前血清CEA水平、血管侵犯、癌组织CBX8表达是影响大肠癌患者预后的独立因素(P<0.05)。生存分析显示,两组1年生存率比较,差异无统计学意义(P>0.05),但CBX8高表达组患者3年、5年生存率均明显高于低表达组(P<0.05)。结论大肠癌组织中CBX8呈高表达,然而癌组织中CBX8高表达提示患者预后良好。

微小RNA-615-3p下调色素框同源蛋白6对肺癌吉西他滨化疗抵抗细胞株的影响及其机制

目的研究微小RNA-615-3p(miR-615-3p)通过调控色素框同源蛋白6(CBX6)对肺癌细胞吉西他滨敏感性的影响及其机制。方法将肺癌吉西他滨化疗抵抗细胞株A549/GEM分为4组:空白组、吉西他滨(GEM)组、GEM转染-1组和GEM转染-2组。分别在A549/GEM中转染anti-miR-615-3p和Si-CBX6后,用GEM处理48 h。用噻唑蓝检测A549/GEM细胞增殖活力(OD值);流式细胞术检测A549/GEM细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测CBX6蛋白表达水平。结果空白组、GEM组、GEM转染-1组在2 d时的增殖活力分别为1.43±0.10,1.02±0.09和0.63±0.06,GEM组与空白组比较,或GEM转染-1组与GEM组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。GEM组、GEM转染-1组和GEM转染-2组的CBX6蛋白相对表达分别为1.02±0.09,1.66±0.09和1.21±0.11;这3组的胞凋亡率分别为(12.18±1.08)%,(19.28±1.65)%和(13.81±1.21)%;这3组的在2 d时的增殖活力分别为0.91±0.07,0.64±0.05和0.88±0.11。GEM转染-1组与GEM组比较,或GEM转染-2与GEM转染-1组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论敲降miR-615-3p通过上调CBX6表达,促进肺癌细胞对GEM的敏感性。

原发性肝癌患者癌组织Myc诱导的核抗原53和色素框同源蛋白8表达与预后的关系

目的观察原发性肝癌(hepatocellularcarcinoma, HCC)患者癌组织Myc诱导的核抗原53(Myc induced nuclear antigen 53, Mina53)、色素框同源蛋白8(chromobox homolog protein 8, CBX8)表达变化,探讨其与原发性HCC患者预后的关系。方法 89例原发性HCC患者,均行肝切除术,术后给予吉西他滨+草酸铂方案化疗3-6个周期。采用免疫组织化学SP法检测手术切除癌组织及癌旁组织Mina53、CBX8阳性表达,检测癌组织P53、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)阳性表达。随访3年,记录患者生存及死亡情况;比较生存组与死亡组年龄、性别比例、术前中国肝癌分期、术前肝功能Child-Pugh分级、肿瘤直径、肿瘤数目及癌组织Mina53、CBX8、P53、CEA阳性表达率;Cox回归分析原发性HCC患者肝切除术后死亡的影响因素;绘制ROC曲线,评估癌组织Mina53、CBX8阳性表达预测原发性HCC患者肝切除术后死亡的价值。结果癌组织Mina53、CBX8阳性表达率(67.42%、64.04%)均高于癌旁组织(8.99%、11.24%)(P<0.05)。随访至2020年11月,89例患者总生存率为69.66%。死亡组Mina53(85.19%)、CBX8(81.48%)、P53(77.78%)阳性表达率均高于生存组(54.84%、51.61%、50.00%)(P<0.05),年龄、性别比例、术前中国肝癌分期、术前肝功能Child-Pugh分级、肿瘤直径、肿瘤数目及CEA阳性表达率与生存组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。癌组织Mina53阳性表达(HR=0.296,95%CI:0.119-0.739,P=0.009)、CBX8阳性表达(HR=0.256,95%CI:0.096-0.681,P=0.006)、P53阳性表达(HR=0.219,95%CI:0.075-0.638,P=0.005)是原发性HCC患者肝切除术后死亡的影响因素。癌组织Mina53、CBX8阳性表达预测原发性HCC患者肝切除术后死亡的AUC分别为0.821(95%CI:0.723-0.919,P<0.001)、0.803(95%CI:0.672-0.885,P<0.001),灵敏度分别为74.2%、79.0%,特异度分别为81.5%、85.2%。结论原发性HCC患者癌组织Mina53、CBX8阳性表达率增高,Mina53、CBX8阳性表达预测原发性HCC患者肝切除术后死亡有较高价值。

色素框同源蛋白2在乳腺癌中的表达及意义

目的观察色素框同源蛋白(CBX)的表达及与乳腺癌临床病理预后的关系,寻找乳腺癌治疗的新靶点。方法利用METABRIC数据库分析8个CBX基因的mRNA表达情况,并重点研究CBX2 mRNA表达与乳腺癌临床病理参数之间的关系,探讨其与预后的关系;应用CBX2 siRNA处理CBX2高表达的乳腺癌细胞株SUM159和SUM1315,观察CBX20基因敲减后对乳腺癌细胞增殖的影响。结果通过对METABRIC数据库分析研究发现,在8个CBX基因中mRNA表达增高最明显的为CBX2,有22.47%(445/1980)的患者mRNA呈现高表达;CBX2高表达与肿瘤组织学分级和乳腺癌的分子分型密切相关(P<0.001);与CBX2 mRNA低表达组相比,高表达组中人表皮生长因子(HER)2型乳腺癌比例(28.1%与7.5%)和Basal-like型比例(44.5%与8.5%)均较高;CBX2高表达患者的无病生存期(DFS)和总生存期(OS)明显缩短。CBX2基因沉默能够显著抑制乳腺癌细胞增殖。结论CBX2与乳腺癌预后关系密切,有可能成为乳腺癌治疗的靶点。

外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p对缺血性脑卒中患者预后不良的预测价值

目的分析外周血缺血修饰蛋白(IMA)、色素框同源蛋白7(CBX7)信使RNA(mRNA)、微小RNA(miRNA)-181c-5p对缺血性脑卒中(IS)患者预后不良的预测价值。方法选取2021年1-12月在河北省邯郸市中医院就诊的150例IS患者作为观察组,根据改良Rankin量表(mRS)评分将IS患者分为预后良好组(mRS评分≤2分)和预后不良组(mRS评分>2分),另选取同期在河北省邯郸市中医院体检的150例健康人群作为对照组。比较观察组、对照组外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平,比较预后良好组和预后不良组临床资料。采用Pearson相关分析IS患者外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平与mRS评分的相关性;采用多因素Logistic回归分析IS患者预后不良的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p对IS患者预后不良的预测价值。结果观察组外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访结果显示预后良好组有103例患者,预后不良组有47例患者。预后良好组和预后不良组性别、年龄,以及合并高血压、糖尿病患者比例比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。预后不良组外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平升高为IS患者预后不良的危险因素(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,IS患者外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平与mRS评分呈正相关(r=0.629、0.475、0.419,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p 3项指标联合预测IS患者预后不良的曲线下面积(AUC)为0.873,高于单项指标预测的AUC(Z=3.347、3.125、2.974,P<0.05)。结论外周血IMA、CBX7 mRNA、miRNA-181c-5p水平升高为IS患者预后不良的危险因素,与其预后存在相关性,3项指标联合检测对IS患者预后不良有较高的预测价值。

CBX8蛋白与肿瘤相关性研究进展

色素框同源蛋白8(chromobox protein homolog 8,CBX8)是PcG家族蛋白PRC1复合体的核心组成部分,在细胞增殖、衰老、维持干细胞自我更新和全能性及肿瘤发生中发挥重要作用.目前研究发现CBX8在多种恶性肿瘤中表达增高,并与肿瘤的进展及预后密切相关,已成为当前肿瘤领域的研究热点.本文就当前CBX8在肿瘤中的研究作一综述.

CBX4基因rs1285251位点单核苷酸多态性与子宫肌瘤的关系研究

目的探讨色素框同源蛋白4(CBX4)基因rs1285251位点单核苷酸多态性(SNP)与子宫肌瘤发病风险及临床病理特征的关系。方法选择419例子宫肌瘤患者作为病例组,同期499例体检的健康女性作为对照组。分别采集两组研究对象的静脉血,提取全血DNA,采用Mass ARRAY技术进行CBX4基因SNP分型检测,并进行统计学分析。结果病例组与对照组CBX4基因rs1285251位点基因型频率及等位基因频率分布比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与CC基因型相比,携带TT基因型人群子宫肌瘤发病风险明显升高[OR=2.046,95%CI=(1.268,3.301),P=0.003<0.05],校正年龄后仍有统计学差异[OR=1.951,95%CI=(1.138,3.344),P=0.015<0.05]。隐性模型条件下,TT基因型携带者与TC+CC基因型相比罹患子宫肌瘤的风险更高[OR=2.023,95%CI=(1.273,3.212),P=0.003<0.05],校正年龄后仍有统计学差异[OR=2.018,95%CI=(1.201,3.393),P=0.008<0.05]。分层分析显示,携带TT基因型的<40岁女性子宫肌瘤患病风险明显升高[OR=1.811,95%CI=(1.054,3.110),P=0.031<0.05],校正年龄后仍有统计学差异[OR=1.839,95%CI=(1.036,3.264),P=0.037<0.05]。此外,TT基因型携带者出现多发性肌瘤[OR=2.432,95%CI=(1.406,4.209),P=0.001<0.05]、校正年龄后仍有统计学差异[OR=2.726,95%CI=(1.438,5.167),P=0.002<0.05],肌壁间肌瘤[OR=2.145,95%CI=(1.320,3.485),P=0.002<0.05]、校正年龄后仍有统计学差异[OR=2.025,95%CI=(1.170,3.504),P=0.012<0.05]及大体积肌瘤(最大肌瘤长径≥5 cm)[OR=2.124,95%CI=(1.300,3.470),P=0.003<0.05]、校正年龄后仍有统计学差异[OR=2.138,95%CI=(1.231,3.714),P=0.007<0.05]的风险显著增加。结论CBX4基因rs1285251位点SNP增加了子宫肌瘤患病风险,并与其临床病理特征密切相关。

沉默CBX4抑制食管胃结合部腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:探讨沉默色素框同源蛋白4(CBX4)对食管胃腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:RT-qPCR检测2017年6月至2019年6月于山西省肿瘤医院进行食管胃结合部腺癌手术患者的癌组织和癌旁组织及食管胃结合部腺癌细胞系中CBX4的mRNA表达水平。以食管胃结合部腺癌细胞AGS和SK-GT-4为研究对象,分别转染阴性对照(NC)和CBX4 si RNA,采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,Transwell实验检测细胞的侵袭,Western blot检测细胞中CBX4、β-catenin、c-MYC和cyclin D1的蛋白表达水平。结果:(1)与临近正常组织相比,食管胃结合部腺癌组织中CBX4表达量明显上调;(2)与正常胃上皮细胞GES-1相比,食管胃结合部腺癌细胞中CBX4 mRNA水平显著升高(P<0.05);(3)沉默CBX4表达后,AGS和SK-GT-4细胞增殖、迁移和侵袭能力明显下降;(4)沉默CBX4后,Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达均降低(P<0.05)。结论:CBX4在食管胃结合部腺癌组织和细胞中高表达,沉默CBX4可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制食管胃结合部腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

CBX7对维持肺癌干细胞表型及化疗敏感性的影响

目的:探讨色素框同源蛋白7(CBX7)对肺癌干细胞(LCSCs)表型和化疗敏感性的调节作用及部分潜在机制。方法:培养肺癌A549、NCL-H460和H1299细胞株,分选CD44^(+)细胞进行后续实验。转染后,将CD44^(+)LCSCs分为空白组、阴性组(转染空载体)、shCBX7(沉默CBX7表达)。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定和集落形成实验分析细胞增殖能力和对化疗药物的敏感性,使用染色质免疫沉淀(ChIP)和双荧光素酶报告基因测定法验证CBX7和CD44之间的关系,Western blot检测蛋白含量。结果:成功的从A549、H460和H1299细胞中富集了CD44^(+)LCSCs,CD44^(+)细胞百分比为97.1%~99.5%。与CD44^(-)细胞相比,CD44^(+)细胞中CBX7、CD44、Sox2、Nanog蛋白表达量更高(P<0.001),且CD44^(+)H460细胞CBX7蛋白表达量最高(P<0.05),可用作后续沉默CBX7表达实验。shCBX7组沉默CBX7表达后,CD44^(+)H460细胞的增殖率、集落形成能力、肿瘤球形成数量及细胞内CD44、Sox2、Nanog蛋白表达量明显低于空白组和阴性组(P<0.05)。ChIP-qPCR实验结果显示CBX7可与CD44基因启动子结合。CBX7过表达也显著增加了CD44启动子的荧光素酶活性(P<0.05)。此外,与空白组DDP(0.98±0.04)μmol/L和DOX(17.5±0.97)μmol/L相比,阴性组CD44^(+)H460细胞对DDP(0.87±0.03)μmol/L和DOX(16.3±1.04)μmol/L的IC_(50)基本一致(P>0.05);与阴性组相比,shCBX7组CD44^(+)H460细胞对DDP和DOX的IC 50分别降低为(0.08±0.01)μmol/L和(0.43±0.03)μmol/L(P<0.05)。结论:CBX7可维持LCSCs的干性特征并提高化疗敏感性,在肺癌临床治疗中具有潜在的研究价值。

非小细胞肺癌组织中KISS-1和CBX8的表达及相关性研究

目的研究肿瘤转移抑制基因亲吻素1(KISS-1)和色素框同源蛋白8(CBX8)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与NSCLC临床特征的关系,以及二者之间的相关性。方法选取海口市人民医院(中南大学湘雅医学院附属海口医院)胸部外科2018~2020年间行肺部手术切除的存档病理标本蜡块108例,其中NSCLC组织84例,良性肺组织24例。运用免疫组织化学(IHC)方法检查NSCLC组织、良性肺组织中KISS-1和CBX8的表达,分析其与肿瘤的临床病理特征之间的关系,并研究两者之间有无相关性。结果KISS-1在良性肺组织中的阳性率明显高于NSCLC组织,有淋巴结转移患者NSCLC组织中的阳性率明显低于无淋巴结转移者,临床Ⅰ~Ⅱ期患者NSCLC组织中的阳性率明显高于临床Ⅲ期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。CBX8在NSCLC组织中的阳性率明显高于良性肺组织,有淋巴结转移患者NSCLC组织中的阳性率明显低于无淋巴结转移者,临床Ⅰ~Ⅱ期患者NSCLC组织中的阳性率明显高于临床Ⅲ期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。KISS-1与CBX8表达呈负相关(r=-0.341,P<0.05)。结论KISS-1和CBX8与NSCLC的发生、进展密切相关,二者在NSCLC中的表达呈负相关。

结肠癌组织中CBX2蛋白预测老年结肠癌患者腹腔镜根治术后远处转移的临床分析

[目的]分析结肠癌(CC)组织中色素框同源物2(CBX2)蛋白与老年CC患者腹腔镜根治术后远处转移的关系及预测患者术后远处转移风险的价值。[方法]收集腹腔镜根治术治疗且完成3年随访的119例老年CC患者资料,患者均接受病理组织CBX2蛋白检测,病例资料、相关检查资料等完整;统计患者随访期间远处转移发生情况并分组,采集并比较患者相关基线资料、CBX2蛋白表达,重点分析CC组织中CBX2蛋白与老年CC患者腹腔镜根治术后远处转移的关系及预测患者术后远处转移风险的价值。[结果]119例患者随访3年有18例出现远处转移(转移组),转移率为15.13%;转移组TNM/T分期Ⅲ期比例、淋巴结转移比例、癌胚抗原(CEA)水平、糖类抗原199(CA199)水平、CBX2蛋白表达均高于未转移组,差异有统计学意义(P<0.05);组间其他基线资料比较差异无统计学意义(P>0.05);经Logistic回归分析结果显示,TNM/T高分期、淋巴结转移、CEA升高、CA199升高、CBX2蛋白过表达均可能是老年CC患者腹腔镜根治术后远处转移的风险因子(OR>1,P<0.05);绘制ROC曲线发现,CC组织中CBX2蛋白预测老年CC患者腹腔镜根治术后远处转移风险的AUC>0.800有一定预测价值。[结论]老年CC患者腹腔镜根治术后远处转移可能与组织中CBX2蛋白过表达有关,且CBX2蛋白对老年CC患者术后远处转移有一定预测价值。

CBX7在胃癌干细胞样细胞中的表达及其功能研究

背景与目的:色素框同源蛋白7(chromobox protein homolog 7,CBX7)是一种参与调控细胞增殖衰老的转录抑制因子,属于PcG家族成员,其在维持胚胎干细胞自我更新和全能性中发挥重要作用,但CBX7在肿瘤干细胞中的表达和作用鲜见报道。本研究旨在探讨CBX7在胃癌干细胞样细胞中的表达及其对胃癌干细胞相关特性的调节作用。方法:采用无血清悬浮培养法从MKN28胃癌细胞系中分离干细胞样亚群,蛋白质印迹法(Western blot)检测干细胞相关因子Oct4、β-catenin和CBX7蛋白表达。脂质体法将CBX7干扰质粒(CBX7i)和对照质粒(Ctrli)分别转染入MKN28胃癌细胞,转染后荧光显微镜观察转染效率,Western blot检测CBX7下调效果,无血清悬浮培养检测细胞自我更新能力,平板克隆检测细胞克隆增殖能力改变。结果:无血清培养MKN28细胞,极少数细胞能形成干细胞样悬浮球,其高表达Oct4、β-catenin两个干细胞相关因子,且明显高表达PcG家族蛋白CBX7。基因转染下调CBX7表达后,胃癌细胞无血清培养成球率降低,克隆形成率下降。结论:CBX7在胃癌干细胞样细胞中高表达,其在调控胃癌干细胞自我更新和增殖能力中发挥重要作用。

肝细胞癌癌组织CBX7和PERK表达及其对手术治疗后患者预后的影响

目的研究肝细胞癌癌组织色素框同源蛋白7(CBX7)和磷酸化胞外信号调节激酶(PERK)表达及其对术后预后的影响。方法2016年1月~2017年1月在我院接受治疗的肝细胞癌患者68例,所有患者接受肝癌切除术,并随访3年。术后,取癌组织和癌旁肝组织,采用RT-PCR法检测癌组织和癌旁组织CBX7 mRNA和PERK mRNA水平,采用免疫组化法检测癌组织CBX7和PERK蛋白表达。结果癌组织CBX7 mRNA水平为(0.51±0.10),显著低于癌旁组织[(4.11±0.91),P<0.05],而癌组织PERK mRNA水平为(4.87±0.99),显著高于癌旁组织[(0.58±0.15),P<0.05];38例肿瘤直径>3 cm患者癌组织CBX7蛋白呈高表达阳性率为33.3%,显著低于30例肿瘤直径≤3 cm组的66.7%,而PERK高表达阳性率为73.3%,显著高于肿瘤直径≤3 cm组的26.7%,28例AJCCⅢ/Ⅳ期患者癌组织CBX7蛋白呈高表达阳性率为8.3%,显著低于40例AJCCⅠ/Ⅱ期患者的91.7%,而PERK高表达阳性率为70.0%,显著高于对照组的30.0%(P<0.05);32例癌组织CBX7高表达患者1 a、2 a和3 a生存率分别为78.1%、65.6%和53.1%,显著高于36例呈低表达患者[分别为52.7%、38.9%和30.6%,P<0.05],38例癌组织PERK高表达患者1 a、2 a和3 a生存率分别为55.3%、44.7%和31.6%,显著低于30例呈低表达患者[分别为80.0%、63.6%和53.3%,P<0.05]。结论癌组织CBX7表达下调,而PERK表达增强的HCC患者预后差,需要给予特别的关注。

胰腺癌病人肿瘤组织CBX7的表达与预后的关系

目的:检测CBX7在胰腺癌组织中的表达,分析其与胰腺癌病人预后的相关性。方法:用免疫组织化学方法检测74例胰腺癌病人肿瘤标本中CBX7的表达,分析CBX7表达程度与胰腺癌肿瘤体积、TNM分期及生存率等临床参数的相关性。结果:74例标本中有40例CBX7低表达,34例CBX7高表达。肿瘤体积与CBX7的表达无相关性。CBX7高表达的病人TNM分期相对较早,其差异有统计学意义。CBX7低表达病人的累积生存时间显著低于CBX7高表达病人,有统计学差异。结论 :CBX7的表达程度与胰腺癌的预后有关,可在胰腺癌的诊断及预后评估中作为参考指标。

CBX8基因在肝细胞癌中的表达及功能分析

目的探讨色素框同源蛋白8(CBX8)在肝细胞癌(HCC)中的表达情况、临床意义及作用机制,为HCC的预防、诊治和预后提供新思路和方向。方法基于生物信息学的方法,应用肿瘤基因数据库分析CBX8在HCC组织中的表达和基因突变情况,并分析其与人口学特征、病理特征及预后的关系。利用蛋白质相关数据库分析CBX8基因的蛋白质表达水平,构建相关蛋白质互作网络并进行通路富集分析。结果HCC组织的CBX8 mRNA表达水平高于正常肝组织。CBX8 mRNA的表达与体重、TP53突变情况、组织学分类、肿瘤分级存在显著关联(P<0.05),且CBX8 mRNA高表达患者的总体生存率较低(P<0.05)。CBX8基因的突变类型主要为C>T突变和错义突变。CBX8主要参与细胞周期、组蛋白泛化等生理过程,可能在干细胞多能性的信号调控通路和癌症关联的microRNA网络中发挥作用。结论CBX8在HCC中高表达,与HCC预后相关,可能参与了HCC的发生和发展。

下肢动脉硬化闭塞症患者外周血单个核细胞中CBX3水平与介入术后1年内支架内再狭窄的关系

目的探究下肢动脉硬化闭塞症(LASO)患者外周血单个核细胞中色素框同源蛋白3(CBX3)水平与介入术后1年内支架内再狭窄(ISR)关系。方法选择2018年4月至2019年5月在华北理工大学附属医院确诊的LASO患者204例。根据LASO患者介入术后1年内是否发生ISR将其分为狭窄组(n=69)和未狭窄组(n=135)。Ficoll密度梯度离心法分离外周血中单个核细胞。蛋白质免疫印迹法检测单个核细胞中CBX3蛋白水平。结果狭窄组介入术前、术后7 d和14 d外周血单个核细胞中CBX3蛋白水平分别为0.67±0.12,0.72±0.12和0.77±0.06。未狭窄组介入术前、术后7 d和14 d外周血单个核细胞中CBX3蛋白水平分别为0.68±0.11,0.78±0.13和0.96±0.08。狭窄组和未狭窄组外周血单个核细胞中CBX3蛋白比较,差异有时间效应、组间效应及时间和组间的交互效应(P<0.05)。术后14 d外周血单个核细胞中CBX3蛋白诊断ISR的ROC曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度分别为0.949,89.9%和87.4%,其诊断ISR的效能高于术前和术后7 d外周血单个核细胞中CBX3蛋白,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血管闭塞长度和完全闭塞是LASO患者ISR的独立危险因素(P<0.05),术后14 d CBX3是LASO患者ISR的独立保护因素(P<0.05)。限制性立方样条拟合Logistic回归分析结果显示,外周血单个核细胞中CBX3蛋白与LASO患者ISR有关(P<0.05),且呈线性关系(非线性检验P>0.05)。结论LASO患者介入术后14 d外周血单个核细胞中CBX3蛋白水平低提示1年内发生ISR的风险高。

CBX2在鼻咽癌的表达及其对鼻咽癌细胞生物学行为的影响

目的 目前关于色素框同源蛋白2(CBX2)在鼻咽癌中的作用报道较少。文章旨在研究CBX2在鼻咽癌中的表达及其生物学功能。方法 采用实时荧光定量PCR检测41例鼻咽癌组织和35例鼻咽慢性黏膜炎组织标本的CBX2 mRNA表达水平。设计并合成CBX2-target的小干扰RNA序列:siNC:正义链,5′-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3′;反义链,5′-ACGUGACACGUUCGGAGAATT-3′。CBX2-siRNA#1正义链,5′-GGAUGACAGUGACUUAGAUTT-3′;反义链,5′-AUCUAAGUCACUGUCAUCCTT-3′。CBX2-siRNA#2:正义链,5′-CCAGAUCCUGGUGGCCAAATT-3′;反义链,5′-UUUGGCCACCAGGAUCU GGTT-3′。小干扰RAN(siRNA)瞬时转染鼻咽癌SUNE1细胞株,分别采用CCK-8法和平板克隆形成实验、流式细胞检测技术及Transwell法分析CBX2敲低表达后SUNE1细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化;Western blot检测相关通路蛋白表达水平。结果 CBX2在鼻咽癌细胞系及组织中的表达水平均显著高于正常鼻咽上皮细胞系及鼻咽炎症组织。CBX2-siRNA#1和#2两个小干扰片段(0.19±0.11, 0.27±0.06)相比较siNC(0.59±0.06)敲低了CBX2的表达(P<0.01)。敲低CBX2表达后,SUNE1细胞细胞增殖速度、克隆形成数目均显著降低(P<0.01)。并且siRNA#1、#2 CBX2敲低后细胞迁移(56.33±3.51, 156.33±4.73)和侵袭数目(61.33±5.86, 118.67±4.73)相比siNC (225.00±3.60、199.33±5.13)显著减少(P<0.01)。细胞周期也发生显著改变,与siNC相比,siRNA#1组细胞周期发生了S期阻滞,而siRNA#2组发生G0/G1期阻滞。Western blot结果显示,CBX2敲低表达组β-catenin及LRP6、Cyclin D1蛋白表达较siNC明显下降(P<0.01)。结论 CBX2在鼻咽癌中的表达水平升高,且CBX2表达可能通过改变Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达影响SUNE1细胞的增殖、迁移和侵袭。

miR-503靶向调控CBX2改善乳腺癌MDA-MB-231细胞耐药性

目的探讨miR-503靶向调控色素框同源蛋白(chromobox2,CBX2)对乳腺癌MDA-MB-231细胞耐药性的影响及潜在的作用机制。方法实验设置miR-con组、miR-503组、si-con组、CBX2组、anti-miR-con组、anti-miR-503组、miR-503+pcDNA组、miR-503+pcDNA-CBX2组;采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测miR-503和CBX2 mRNA的表达水平;Western blot实验检测蛋白表达;MTT法检测细胞活性;双荧光素酶实验检测其靶向调控关系。结果与正常乳腺细胞HBL-100(1.02±0.09)相比,乳腺癌细胞MCF-7(0.41±0.05)、MDA-MB-231(0.25±0.03)和BT474(0.35±0.04)中miR-503的表达水平显著降低;乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、BT474细胞中CBX2 mRNA的表达量分别为(4.02±0.35)、(4.62±0.36)、(3.47±0.33);乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、BT474细胞中CBX2蛋白的表达量分别为(0.64±0.07)、(0.74±0.05)、(0.68±0.06);正常乳腺细胞HBL-100中CBX2 mRNA和蛋白含量分别为(1.01±0.08)(0.40±0.04),乳腺癌细胞中CBX2的表达较于正常乳腺细胞明显升高(P<0.05);过表达miR-503(3.64±0.30)、沉默CBX2均可抑制MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭,抑制CBX2(0.26±0.03)、细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinases,CDK)4(0.32±0.03)、细胞周期蛋白(Cyclin,CCN)D1(0.58±0.03)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)-2(0.32±0.03)、MMP-9(0.32±0.04)的表达(P<0.05)。miR-503靶向调控CBX2的表达,过表达CBX2(0.75±0.03)能逆转miR-503对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖与耐药性。结论miR-503可能通过下调CBX2表达抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。