F-2毒素检测方法研究——柱色谱洗脱剂的筛选

F-2毒素除直接用薄层色谱法检测外,还可经柱色谱法分离,除掉样品中大量杂质,然后再通过薄层色谱法定性、定量或提纯。柱色谱法是大剂量提纯真菌毒素必要程序之一,因此筛选分离物组份集中的洗脱剂,将是试验的主要目的。

凝胶色谱柱复性在低分子量尿激酶原突变体(DscuPA-32K)中的应用

将构建的一种具溶栓和抗栓双重功能尿激酶原突变体 (DscuPA 32K)基因 ,在大肠杆菌中进行表达。由于DscuPA 32K分子较大并且表达量较高 ,目的蛋白质基本以包涵体的形式存在。包涵体中的蛋白质是无活性的蛋白质 ,为了获得有活性的蛋白质 ,就需要对包涵体进行变性及复性。尝试了一种新的凝胶色谱柱复性方法 ,并通过柱复性方法与常规的稀释复性方法进行了比较 ,发现柱复性方法明显优于稀释复性方法 ,具有成本低 ,效率高 ,并对目的蛋白质 (DscuPA 32K)进行了初步纯化等优点 ,尤其对酶这一类容易失活降解的蛋白质进行复性时 。