2013-2014年上海市污水中人类肠道病毒的基因型分布

目的 分析上海市闵行和嘉定区污水处理厂中人类肠道病毒（HEV）的时间分布特点及其基因分型。方法 于2013—2014年，选取闵行和嘉定区两所污水处理厂入水口作为采样点，每月24—28日采集污水标本1份，每份1 L，共48份。经阴离子膜吸附的方法浓缩，再用牛肉汤洗脱，取上清液并接种RD、HEp-2和L20B细胞进行病毒分离，共分离HEV 249株，其中非脊髓灰质炎病毒（NPEV）185株，脊髓灰质炎病毒（PV）64株（均为疫苗相关株）。通过RT-PCR鉴定基因型，采用Bioedit 7.0.0对VP1核苷酸序列进行序列同源性分析，使用MEGA 5.0软件，通过邻位法构建系统发生树，分析优势株及病毒传播链。结果 185株NPEV中178株鉴定出基因型，包括：柯萨奇B组病毒（CVB）2、3、5基因型，埃可病毒（ECHO）1、3、6、7、11、13、19、20、24、25、30基因型，柯萨奇A组病毒（CVA）4基因型。CVB5和ECHO6是在NPEV分离株中比例较高的两个基因型，分别占33.5%（56株）和24.9%（43株）。闵行区污水水样中HEV分离株主要集中在4—9月份，其中优势株ECHO6主要分布在2013下半年和2014上半年采集水样中，优势株CVB5主要在2013—2014年散在分布。嘉定的ECHO6和CVB5两个优势株的流行趋势与闵行区的基本一致。2013—2014年CVB5形成C6和C8基因亚型2个传播链，而与国外毒株有较大的差异；ECHO6形成C3、C6和D9基因亚型3个传播链，而D9基因亚型在上海属于优势基因亚型，在国内外有一定地域性的传播。结论 2013—2014年上海市污水中的分离到的PV均为疫苗株。HEV优势株为CVB5和ECHO6，其中ECHO6在2013下半年和2014上半年较为流行，CVB5在2014年下半年开始流行。CVB5和ECHO6存在多条传播链的共同流行现象。

2001年徐州地区暴发性病毒性脑膜炎病原的研究

目的确定引起2001年江苏省徐州地区无菌性脑膜炎流行的病原体。方法组织培养法从患者脑脊液分离病毒,标准血清中和试验鉴定分离毒株;中和试验检测双份血清中和抗体效价;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肠道病毒特异性基因片段。结果22份脑脊液中分离出4株柯萨奇B5型、2株柯萨奇B3型、1株艾可7型肠道病毒,分离阳性率31.8%。RT-PCR检测脑脊液21份,肠道病毒阳性11份,阳性率52.4%。19例双份血清中11例中和效价呈4倍以上增长或转阳,阳性率57.9%。结论此次江苏省徐州地区无菌性脑膜炎流行的病原体是以柯萨奇B5为主要血清型的肠道病毒。