魔芋对艾氏腹水瘤(EAC)抑制作用的研究

目的 探讨魔芋对肿瘤的抑制作用及对免疫功能的影响。方法 分别将魔芋精粉(RKM) ,魔芋灰粉、新鲜魔芋茎块煎剂 ,环磷酰胺、生理盐水对艾氏腹水瘤 (EAC)小鼠灌胃给药。结果 各实验组与盐水对照组相比有明显的抑瘤作用 ,能延长小鼠的生存时间 ,同时对动物白细胞无影响 ,并能增加淋巴细胞转化率。结论 魔芋可能是通过增强机体免疫功能来抑制移植性肿瘤的生长 。

声化学诱导艾氏腹水瘤细胞凋亡机制初探

本研究采用频率1.43MHz,声强3W/cm2的高频聚焦超声处理艾氏腹水肿瘤细胞,研究超声激活血卟啉诱导艾氏腹水肿瘤细胞凋亡的途径及其与癌细胞内的氧自由基之间的关系。通过细胞免疫组织化学方法检测与癌细胞凋亡相关的Bax,细胞色素c和caspase-3蛋白的动态表达,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活性变化,硫代巴比妥酸法检测膜脂质过氧化物的含量。结果发现超声加血卟啉处理1h,癌细胞胞浆中的三种促凋亡蛋白表达增多,3h时表现为高表达;处理1h的癌细胞,超氧化物歧化酶活性下降,膜脂质过氧化物增多。研究结果表明超声激活血卟啉诱导艾氏腹水肿瘤细胞凋亡可能通过线粒体途径,且与癌细胞受损后产生的氧自由基有关。

超声激活血卟啉对腹水型艾氏腹水瘤超微结构的影响

目的观察声动力学疗法(SDT)对肿瘤细胞超微结构的影响,探讨超声激活血卟啉杀伤肿瘤细胞的机制。方法采用频率为2.0MHz,声强为1.5W cm2的超声,结合血卟啉(HpD)对离体培养的小鼠艾氏腹水瘤(EAT)细胞处理3min,利用透射电镜观察不同时间段取材的细胞超微结构的变化。结果超声激活血卟啉对EAT细胞超微结构的破坏程度随取材时间的延长而加剧,损伤位点主要集中在细胞膜、线粒体、内质网及细胞核上,同时还观察到一些细胞表现出明显的凋亡特征。结论超声激活血卟啉主要通过破坏细胞超微结构杀伤肿瘤细胞,部分通过诱导凋亡杀伤。

声化学激活原卟啉Ⅸ杀伤艾氏腹水瘤细胞的分子机理

采用频率为2.2MHz、声强为3W/cm2的低强度聚焦超声结合原卟啉Ⅸ对艾氏腹水瘤细胞的损伤进行研究,并初步探讨其作用的生物学机制。分别用荧光分光光度法、激光共聚焦扫描显微镜分析原卟啉Ⅸ在肿瘤细胞内的积聚、定位情况;利用台盼蓝拒染法测定聚焦超声激活原卟啉Ⅸ对细胞存活率的影响;透射电镜观察细胞的超微结构变化;罗丹明123检测线粒体膜电位变化;2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(2′,7′-dichlorodihydrofluorescin diacetate,DCFH-DA)检测细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平;硫代巴比妥酸法检测细胞膜脂质过氧化水平的变化。通过研究发现,艾氏腹水瘤细胞对原卟啉Ⅸ有一定的选择性吸收和留作用,原卟啉Ⅸ主要定位于细胞的线粒体中;在超声结合原卟啉Ⅸ作用下,艾氏腹水瘤细胞的存活率明显下降;细胞的超微结构发生明显损伤;线粒体膜电位下降;ROS生成量显著增加;脂质过氧化水平显著增加。研究结果表明:超声激活原卟啉Ⅸ对艾氏腹水瘤细胞有着明显的协同杀伤效应,其间产生的活性氧自由基作用,降低线粒体膜电位,增加膜的脂质过氧化水平,可能是其损伤艾氏腹水瘤细胞的主要因素之一。

S_(180)肉瘤,艾氏腹水瘤肿瘤移植模型建立的研究

目的 应用小鼠S1 80 肉瘤 ,小鼠EAC腹水瘤实体型两种瘤株 ,进行BALB c小鼠、昆明小鼠两种动物移植瘤模型的研究。方法 试验共设BALB c小鼠模型组 ,BALB c小鼠阳性组 ,昆明小鼠模型组 ,昆明小鼠阳性组 ,比较给药 10d后实体瘤大小及其病理学变化特征。结果 BALB c小鼠较之昆明小鼠实验前后体重变化小 ,个体间瘤重差异小 ,其组内标准差占平均值的比例较小 ,肿瘤生长较均衡 ;与此同时 ,病理学观察模型组和阳性组间 ,瘤体切面积和瘤细胞坏死率差异均有极显著性 ,两模型组的小鼠肝脏内均发现有瘤细胞转移。

艾氏腹水瘤全细胞瘤苗诱导的特异性杀伤活性

目的研究艾氏腹水瘤全细胞瘤苗诱导的特异性杀伤活性。方法用40g/L的多聚甲醛处理的艾氏腹水瘤细胞作为全细胞瘤苗免疫Balb/c小鼠,建立瘤苗小鼠模型。用HE染色法对亲本肿瘤细胞皮下再次攻击形成的肿瘤结节进行病理学观察;用51Cr释放法测定瘤苗免疫组、荷瘤组、正常组小鼠脾细胞,对亲本艾氏腹水瘤细胞和Sp2细胞的杀伤活性。结果HE染色显示,经瘤苗免疫后亲本肿瘤细胞皮下再次攻击形成的肿瘤结节中,瘤细胞几乎完全坏死,同时在坏死部位有大量炎细胞浸润、纤维母细胞和小血管增生而对照组则无以上现象。效靶比为200∶1时,免疫小鼠脾细胞体外杀伤亲本艾氏腹水瘤细胞的杀伤率%为42.3±3.2%,显著高于荷瘤组的12.1±2.3%、正常组的6.1±1.1%和对Sp2/0细胞的杀伤率8.8±0.4%P均0.05。结论艾氏腹水瘤全细胞瘤苗可诱导机体产生特异性杀伤活性。

癌消I号对肝癌H_(22)和艾氏腹水瘤小鼠的影响

目的研究癌消I号对肝癌22和艾氏腹水瘤小鼠的作用。方法以肝癌(H22)小鼠和艾氏腹水瘤(EAC)为模型,观察癌消I号的抗肿瘤作用,并分别计算出抑瘤率和生命延长率。结果相当于生药3、6、12g/kg的癌消I号对肝癌(H22)小鼠的抑瘤率均在40%以上,与对照组比较差异均有显著性意义,P<0.01;能延长艾氏腹水瘤(EAC)小鼠的生存期,生命延长率均在50%以上,与对照组比较差异均有显著性意义,P<0.01。结论癌消I号对肝癌H22和艾氏腹水瘤有明显作用。

黄芩甙对艾氏腹水瘤细胞影响的初步探讨

研究黄芩甙对艾氏腹水瘤小鼠的免疫调节及对荷瘤小鼠腹水脂加氧酶活性的影响。方法：ＥＡＣ小鼠腹腔给药，每天１次；采用无色孔雀绿方法测定腹水中的脂加氧酶活性；同时，采用测定血清溶菌酶及Ｔ淋巴细胞非特异性酯酶染色法。结果：给药组小鼠的溶菌酶活性及淋巴细胞酸性非特异性酯酶（ＡＮＡＥ）阳性率增加；体内、外艾氏腹水瘤细胞生长受抑制。结论：黄芩甙增强了小鼠的体液和细胞免疫功能，能抑制荷瘤小鼠腹水脂加氧酶活性。抑制艾氏腹水瘤细胞的生长，但无论是在体内还是体外，对生长后期的瘤细胞抑制作用不明显。

云芝多糖对艾氏腹水瘤影响的研究

云芝(Couriolus vericolor)在分类上届真菌植物门,担子菌纲,多孔菌目,多孔菌科,革盖菌属,又名彩云革盖菌。它的孢子飞落在木材或朽木上,条件适宜即可生长菌丝,仲向木质深处,在木质表面逐步形成为复瓦状子实体。

艾氏腹水瘤细胞有丝分裂过程的显微观察

给小鼠腹腔注射艾氏腹水瘤瘤株,1wk后,抽取腹水细胞,经HE染色制成切片来观察动物细胞的有丝分裂过程及中期染色体形态.此法利用腹水型肿瘤细胞生长快、个体体积大、分裂相多且细胞间无粘连的特点,操作简单,结果明显,是一种新型的观察动物细胞有丝分裂过程的实验方法.

超声激活血卟啉对在体艾氏腹水瘤杀伤效应的研究初报

利用超声激活血卟啉 ,研究对在体艾氏腹水瘤癌细胞的杀伤作用 .实验分别选择不同的超声时间及取材时间 .结果表明 ,单纯超声及血卟啉加超声组对肿瘤细胞均有杀伤作用 .强度为 0 .9W /cm2 ,声照 3min ,6h取材 。

超声结合原卟啉Ⅸ对艾氏腹水瘤细胞的杀伤作用

通过台盼蓝拒染法,以细胞存活率为指标用扫描电镜观察超声激活原卟啉Ⅸ(ProtoporphyrinⅨ,PPⅨ)对艾氏腹水肿瘤(Ehrlich ascites tumor,EAT)细胞的杀伤作用;采用硫代巴比妥酸法检测超声激活PPⅨ对EAT细胞膜脂质过氧化水平的影响,研究超声激活Ⅸ对EAT细胞的杀伤效应.结果显示,超声结合PPⅨ杀伤EAT细胞与超声强度、处理时间及PPⅨ药物浓度呈正相关,超声结合PPⅨ对EAT细胞的损伤显著高于单纯超声组,而单纯PPⅨ表现出无明显的细胞毒作用;超声激活PPⅨ后膜的脂质过氧化水平显著增加.实验表明超声激活PPⅨ对EAT细胞具有明显的协同杀伤效应,推测可能是超声激活PPⅨ增加了膜脂质过氧化量,从而使细胞受损,并且质膜可能是超声激活PPⅨ杀伤EAT细胞的主要靶点之一.

不同单位保存的艾氏腹水癌细胞(EAC)的某些生物学特性比较研究

目的 比较研究不同单位保种的EAC瘤株生物学特性的差异。方法 选择研究了北京市肿瘤研究所、山东省医学科学院药物研究所及武汉大学保种中心保存EAC细胞的大小 ,细胞株体外培养时对血清的依赖性 ,接种小鼠皮下建立肿瘤动物模型肿块生长曲线 ,建立的动物模型对环磷酰胺CTX治疗的敏感性等指标。结果 发现三个单位保存的EAC细胞形态及大小基本一致 ;北京EAC体外培养容易生长 ,7 5%NCS即可生长良好 ,山东及武汉EAC体外培养生长力较弱 ;皮下接种BALB c小鼠后 ,北京EAC最易生长肿瘤 ,武汉EAC次之 ,山东EAC最差 ;建立的动物模型对CTX治疗的敏感性 ,依次为北京EAC ,武汉EAC ,山东EAC ,用CTX治疗的抑瘤率相应为 82 9% ,71 9% ,50 %。结果 可见三个不同单位保种的EAC瘤细胞生物学特性确已存在显著差异。

诺卡氏菌细胞壁骨架抑制艾氏腹水瘤作用的观察

本文研究了诺卡氏菌细胞壁骨架(N-CWS)对小鼠艾氏腹水瘤(EAC)生长的影响及与环磷酰胺(CYP)的协同作用。实验结果表明:N-CWS 对 EAC 鼠的腹水量和瘤细胞数有抑制作用;联用 CYP 可提高荷瘤鼠的生命延长率;对 CYP 引起的体重减轻、白细胞数和血小板数减少及胸腺和脾脏重量减轻也有一定的拮抗作用。

腹腔内应用重组人血管内皮抑制素治疗艾氏腹水瘤的实验研究

目的观察重组人血管内皮抑制素对艾氏腹水瘤(EAC)小鼠的治疗作用,并初步探讨其相关作用机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同终浓度的重组人血管内皮抑制素(0、5、10、20、40μg/ml)对体外培养的EAC细胞的抑制率;利用EAC细胞建立腹水瘤小鼠模型,将54只腹水瘤小鼠随机分为3组:A组(重组人血管内皮抑制素8 mg/kg,每12 h腹腔注射1次)、B组(重组人血管内皮抑制素8 mg/kg,每24 h腹腔注射1次)、C组即对照组(生理盐水0.2 ml/只,每12 h腹腔注射1次)。详细记录小鼠腹水量、体重及生存期;酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠腹水血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-2(MMP-2);并通过尾静脉注射伊文思蓝染液间接反映微血管通透性。结果体外实验显示,不同浓度的重组人血管内皮抑制素对EAC未见抑制作用;体内试验显示,重组人血管内皮抑制素组(A组和B组)小鼠的体重、腹水量及腹水中VEGF和MMP-2浓度均低于对照组,生存时间较对照组延长(P<0.05);3组小鼠血管通透性、A组与B组之间的各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔内给药治疗小鼠EAC疗效较好,其作用机制可能与抑制VEGF及MMP-2的生成有关,提示重组人血管内皮抑制素在临床上治疗恶性腹水有较好的应用前景。

超声激活血卟啉诱导艾氏腹水瘤细胞凋亡的细胞学研究

采用频率为1.34 MHz、声强为1W/cm2的超声结合血卟啉对EAT细胞凋亡模式进行了研究,探讨了声动力学疗法抗肿瘤的分子机制.超声激活血卟啉作用于EAT细胞后,不同时间点取材,通过扫描电镜观察EAT细胞的形态学变化;通过HO荧光染色观察凋亡细胞的形态学特征;利用免疫细胞化学方法检测caspase-8蛋白的活性变化.结果表明,超声激活血卟啉可诱导EAT细胞凋亡的发生,并且随时间的延迟凋亡现象愈加明显;免疫细胞化学方法表明超声处理后caspase-8蛋白表达活性显著增强,且于1h活化程度达到最高.研究表明,超声激活血卟啉可诱导EAT细胞凋亡,其作用的分子机制可能涉及Caspase-8依赖的膜受体凋亡信号调节通路.

HAC70抗原肽复合物诱导的对艾氏腹水瘤细胞杀伤活性的实验研究

目的观察从艾氏腹水瘤小鼠瘤细胞中提取的热休克蛋白70-抗原肽复合物(HAC70)诱导的抗肿瘤免疫效应,探讨其临床应用。方法提取热休克后的小鼠艾氏腹水瘤细胞经肝素-琼脂糖亲和层析纯化,制成热休克蛋白-肽复合物疫苗,以体内免疫法检测HAC70的抑瘤作用,3H-TdR掺入释放法检测脾细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。结果经HAC70免疫的荷瘤小鼠皮下肿瘤结节平均重1.26±0.4 g,较对照组(3.14±0.56 g)明显减轻(P<0.05);当效靶比为200:1时,免疫组脾细胞杀伤活性为49.25±11.25%,显著高于对照组(18.50±9.95%,P<0.01)及荷瘤组(25.75±8.38%,P<0.01)。结论经肝素-琼脂糖亲和层析纯化的HAC70可通过诱导机体产生特异性杀伤艾氏腹水瘤细胞的活性,明显抑制荷瘤小鼠艾氏腹水瘤的生长。

艾氏腹水瘤细胞热休克蛋白70的抗瘤效应

目的 观察从艾氏腹水瘤细胞胞浆中提纯的热休克蛋白 70 (heatshockprotein70 ,HSP70 )的抑瘤作用 ,并探讨其机制。方法 用亲和层析提纯艾氏腹水瘤细胞的HSP70 ,应用体内免疫法检测HSP70的抑瘤作用 ,用3 H -TdR释放法检测特异性细胞毒T淋巴细胞 (CTL)的杀伤活性。结果 与对照组相比免疫组小鼠平均肿瘤重量明显减轻、体积明显缩小 ,特异性CTL的杀伤活性显著增强。结论 HSP70可诱导机体产生特异性杀伤活性 。

声化学激活血卟啉诱导艾氏腹水肿瘤细胞凋亡

本实验采用频率为 2 0MHz,声强分别为 1 0W/cm2 、 1 5W /cm2 、 2 0W /cm2 等不同参数 ,研究超声激活血卟啉对艾氏腹水肿瘤细胞的杀伤作用和诱导肿瘤细胞凋亡现象。通过扫描电镜、透射电镜以及荧光显微镜观察受损后细胞形态结构的变化 ,主要表现为细胞微绒毛的减少 ,胞膜结构和通透性的改变 ,细胞器的受损以及核物质的分解、丢失 ;同时发现处理后的肿瘤细胞有核物质凝集、趋边排列以及凋亡小体的形成等细胞凋亡特征。研究中首次发现声化学激活血卟啉在对艾氏腹水肿瘤细胞杀伤的同时 ,也能诱导艾氏腹水肿瘤细胞发生凋亡 。