声化学激活原卟啉Ⅸ杀伤艾氏腹水瘤细胞的分子机理

采用频率为2.2MHz、声强为3W/cm2的低强度聚焦超声结合原卟啉Ⅸ对艾氏腹水瘤细胞的损伤进行研究,并初步探讨其作用的生物学机制。分别用荧光分光光度法、激光共聚焦扫描显微镜分析原卟啉Ⅸ在肿瘤细胞内的积聚、定位情况;利用台盼蓝拒染法测定聚焦超声激活原卟啉Ⅸ对细胞存活率的影响;透射电镜观察细胞的超微结构变化;罗丹明123检测线粒体膜电位变化;2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐(2′,7′-dichlorodihydrofluorescin diacetate,DCFH-DA)检测细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平;硫代巴比妥酸法检测细胞膜脂质过氧化水平的变化。通过研究发现,艾氏腹水瘤细胞对原卟啉Ⅸ有一定的选择性吸收和留作用,原卟啉Ⅸ主要定位于细胞的线粒体中;在超声结合原卟啉Ⅸ作用下,艾氏腹水瘤细胞的存活率明显下降;细胞的超微结构发生明显损伤;线粒体膜电位下降;ROS生成量显著增加;脂质过氧化水平显著增加。研究结果表明:超声激活原卟啉Ⅸ对艾氏腹水瘤细胞有着明显的协同杀伤效应,其间产生的活性氧自由基作用,降低线粒体膜电位,增加膜的脂质过氧化水平,可能是其损伤艾氏腹水瘤细胞的主要因素之一。

黄芩甙对艾氏腹水瘤细胞影响的初步探讨

研究黄芩甙对艾氏腹水瘤小鼠的免疫调节及对荷瘤小鼠腹水脂加氧酶活性的影响。方法：ＥＡＣ小鼠腹腔给药，每天１次；采用无色孔雀绿方法测定腹水中的脂加氧酶活性；同时，采用测定血清溶菌酶及Ｔ淋巴细胞非特异性酯酶染色法。结果：给药组小鼠的溶菌酶活性及淋巴细胞酸性非特异性酯酶（ＡＮＡＥ）阳性率增加；体内、外艾氏腹水瘤细胞生长受抑制。结论：黄芩甙增强了小鼠的体液和细胞免疫功能，能抑制荷瘤小鼠腹水脂加氧酶活性。抑制艾氏腹水瘤细胞的生长，但无论是在体内还是体外，对生长后期的瘤细胞抑制作用不明显。

超声结合原卟啉Ⅸ对艾氏腹水瘤细胞的杀伤作用

通过台盼蓝拒染法,以细胞存活率为指标用扫描电镜观察超声激活原卟啉Ⅸ(ProtoporphyrinⅨ,PPⅨ)对艾氏腹水肿瘤(Ehrlich ascites tumor,EAT)细胞的杀伤作用;采用硫代巴比妥酸法检测超声激活PPⅨ对EAT细胞膜脂质过氧化水平的影响,研究超声激活Ⅸ对EAT细胞的杀伤效应.结果显示,超声结合PPⅨ杀伤EAT细胞与超声强度、处理时间及PPⅨ药物浓度呈正相关,超声结合PPⅨ对EAT细胞的损伤显著高于单纯超声组,而单纯PPⅨ表现出无明显的细胞毒作用;超声激活PPⅨ后膜的脂质过氧化水平显著增加.实验表明超声激活PPⅨ对EAT细胞具有明显的协同杀伤效应,推测可能是超声激活PPⅨ增加了膜脂质过氧化量,从而使细胞受损,并且质膜可能是超声激活PPⅨ杀伤EAT细胞的主要靶点之一.

艾氏腹水瘤细胞热休克蛋白70的抗瘤效应

目的 观察从艾氏腹水瘤细胞胞浆中提纯的热休克蛋白 70 (heatshockprotein70 ,HSP70 )的抑瘤作用 ,并探讨其机制。方法 用亲和层析提纯艾氏腹水瘤细胞的HSP70 ,应用体内免疫法检测HSP70的抑瘤作用 ,用3 H -TdR释放法检测特异性细胞毒T淋巴细胞 (CTL)的杀伤活性。结果 与对照组相比免疫组小鼠平均肿瘤重量明显减轻、体积明显缩小 ,特异性CTL的杀伤活性显著增强。结论 HSP70可诱导机体产生特异性杀伤活性 。

海带多糖FGS体内外抗癌作用的研究

研究了一个海带多糖组分FGS对两株人癌细胞体外增殖和对荷瘤小鼠存活期的影响.MTT法检测显示FGS对人肺癌NKM和肝癌SMMC细胞体外增殖具有显著的抑制作用,IC50值分别为91和164μg/mL,并且对卡铂抑制NKM、SMMC癌细胞的增殖有增效作用;放射性同位素(3H)标记检测显示FGS剂量依赖性抑制该两株癌细胞生物大分子前体物TdR、UR和Leu的掺入,提示DNA、RNA和蛋白质合成受到FGS的抑制.体内实验显示FGS显著延长荷艾氏腹水瘤细胞小鼠的存活期.

^(125)I植入对小鼠移植性实体瘤抑制效果

目的 观察1 2 5I籽源组织间植入对小鼠移植性实体瘤的治疗效果。方法 建立小鼠艾氏腹水瘤细胞移植性实体肿瘤模型。治疗组在肿瘤组织内平均植入 4粒表面放射活性为 8 14MBq的BT 12 5 Ⅰ型1 2 5I籽源 ,对照组植入 4粒无放射活性的空心籽源。治疗 2 8d ,记录小鼠存活率。处死存活的小鼠 ,测量残存肿瘤的体积、重量并计算肿瘤体积抑制率。对摘除的肿瘤组织进行常规病理切片检查 ,观察籽源对肿瘤组织的破坏程度和范围。结果 治疗 2 8d ,治疗组和对照组小鼠存活率分别为 75 %和 5 0 % ;平均瘤重分别为 (0 347± 0 2 5 )g ,(5 16 2± 1 75 )g(t=6 16 4 ,P <0 0 5 ) ;肿瘤平均体积分别为 (175 9± 14 7 9)mm3,(3974 1± 15 0 7 7)mm3(t=5 6 18,P <0 0 5 ) ,肿瘤体积抑制率为95 6 %。常规病理切片结果显示 ,1 2 5I籽源周围 0～ 3mm范围内肿瘤细胞病理变化由凝固坏死向外逐渐减弱为变性坏死 ;空心籽源周边区域仅有机械刺激导致的轻微水肿和纤维化。结论 1 2 5I籽源组织间植入对小鼠实体肿瘤具有显著的治疗效果。