质子跨膜转运能够引起艾氏腹水癌细胞质膜表面质子化

荧光探针Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ－ＰＥ在８ｍｍｏｌ／ＬＣａ２＋促进下，能够标记于艾氏腹水癌细胞质膜表面。在不影响膜结构的条件下，利用微量ＴｒｉｔｏｎＸ－１００消除膜表面与介质之间的质子浓度差，通过酸滴定实验，能够得到膜表面ｐＨ与ＦＰＥ荧光强度之间的相关曲线。根据此曲线测定了艾氏腹水癌细胞质膜表面ｐＨ：当介质ｐＨ为７．２时，其膜表面ｐＨ为６．７，其质子浓度大约为介质中的３倍，质子跨膜转运抑制剂ＣＣＣＰ和尼日利亚菌素均能消除膜表面与介质之间的质子浓度差。表明质子跨膜转运确实能够引起艾氏腹水癌细胞质膜表面质子化。

艾氏腹水癌细胞膜质子跨膜外转运与脂质体融合:Ca^(2+)及脂质体膜脂成份的作用

研究了Ca2 + 及脂质体膜脂成分对艾氏腹水癌细胞质膜质子跨膜转运驱动的脂质体融合中的作用。结果表明Ca2 + 促进质子跨膜转运驱动的质子跨膜转运驱动艾氏腹水癌细胞与脂质体间的融合 ,膜融合程度与膜表面电荷密度的相关曲线显示 ,在下述条件膜融合与膜表面电荷密度呈正相关 :(1)介质Ca2 + 浓度小于 6mmol/L ,脂质体磷脂组成为PE∶PC∶CL =6∶2∶2 ;(2 )介质Ca2 + 浓度为 6mmol/L ,脂质体磷脂组成为PE∶PC∶CL =6∶2∶2 ;(3)无Ca2 + 介质 ,脂质体磷脂组成为PE∶CL =8∶2 ;(4)介质Ca2 + 浓度 10mmol/L ,脂质体磷脂组成为PE∶CL=8∶2。脂质体PE/PC含量对膜融合的影响表明 ,当PE含量减少PC含量增加时 ,膜融合程度不断下降 ,提示影响膜融合的另一因素可能是生物膜结构形成“柄”融合中介体的能力。

三单位保存的艾氏腹水癌细胞株及克隆细胞蛋白质表达

目的 比较三个单位保存的艾氏腹水癌 (EAC)细胞株及克隆细胞的蛋白质表达。方法 对北京市肿瘤研究所 (北京 )保存的EAC进行克隆培养 ,从中选出 5株克隆 ;对武汉大学保种中心 (武汉 )、山东省医学科学院药物研究所 (山东 )及北京保存的EAC细胞株及 5株克隆细胞的SDS PAGE电泳图谱及免疫组化蛋白质分布进行了对比。结果 武汉、山东及北京保存的EAC的电泳条带数分别为 2 2、2 5及 2 8条 ,而克隆细胞E2G8为 2 6条带。三单位EAC瘤细胞对 5种抗体做免疫组化染色 ,与 1株抗体反应的阳性细胞比例均较高 ,差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,与另 4种抗体反应的阳性细胞率差异有显著性 ;5株克隆细胞对 10种抗体作免疫组化染色 ,其中克隆细胞E2G8、E2F4与 7种抗体反应阳性 ,E2C6与 8种抗体反应阳性 ,E1G5、E2B5与 6种抗体反应阳性。克隆细胞一旦与某种抗体反应阳性 ,阳性细胞的比例即在 85 %以上。

鸦胆子油有效成分油酸对艾氏腹水癌细胞DNA合成的影响

本文利用氚—胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法研究了油酸对小鼠艾氏腹水癌细胞DNA合成的影响,其最高抑制强度为66.7%,揭示了油酸能够干扰艾氏腹水癌细胞DNA的合成。

抗坏血酸与丝裂霉素C对艾氏腹水癌细胞联合杀伤作用的体外研究

研究了抗坏血酸与丝裂霉素Ｃ（ＭｉｔｏｍｙｃｉｎＣ）对艾氏腹水癌细胞的联合杀伤作用，Ｃｕ（Ⅱ）／ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ Ｃ／抗坏血酸体系对ＤＮＡ链的断裂作用，以及丝裂霉素Ｃ存在下，Ｃｕ（Ⅱ）催化抗坏血酸有氧氧化的动力学。实验结果表明，抗坏血酸与丝裂霉素Ｃ在杀伤艾氏腹水癌细胞时存在协同作用，该协同作用与Ｃｕ（Ⅱ）／ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ Ｃ／抗坏血酸体系对ＤＮＡ链的断裂作用以及Ｃｕ（Ⅱ）／ｍｉｔｏｍｙｃｉｎ Ｃ／抗坏血酸体系产生·ＯＨ自由基的量和速度有关，其均与抗坏血酸浓度成正比。此结果提示，抗坏血酸有氧氧化产生的·ＯＨ，以及由之引起的ＤＮＡ链断裂作用，是导致抗坏血酸与丝裂霉素Ｃ在杀伤艾氏腹水癌细胞时存在协同作用的重要原因。

小白鼠艾氏腹水癌细胞Mg^(++)-ATP酶的细胞化学观察(光学及电子显微镜)

本实验采用Wachstein-Meisel显示ATP酶的方法,对小白鼠艾氏腹水癌细胞的Mg^(++)-ATP酶进行光学及电子显微镜下的细胞化学观察,见到Mg^(++)-ATP酶集中分布在癌细胞的质膜表面和线粒体内,线粒体内存在的Mg^(++)-ATP酶对戊二醛极为敏感,一经戊二醛固定后,线粒体内存在的Mg^(++)-ATP酶反应消失。但质膜上Mg^(++)-ATP酶的沉淀反应却不受戊二醛的影响,固定后仍可见到强的沉淀反应。L-半胱氨酸可加强质膜上和线粒体内ATP活性酶所产生的阳性反应,而经NaF,PCMB处理后,其阳性的沉淀反应消失。

玻璃化冻存小鼠艾氏腹水癌细胞的超微结构和功能研究

研究了小鼠艾氏腹水癌细胞在含有不同低温保护剂的玻璃化冻存液内，快速降温冷冻保存１～７ｄ后细胞超微结构和功能的变化．结果表明，以９０％ＶＳｌ（含１８．５％Ｗ／ＶＤＭＳＯ，１４．Ｏ％Ｗ／Ｖ乙酰胺，９．０％Ｗ／Ｖ丙二醇，４．１％Ｗ／Ｖ分子量６０００的聚乙二醇）作为冻存液，快速冻存、复温后的艾氏腹水癌细胞，存活率为７ｌ％，绝大多数细胞保持完好的超微结构，体外ＤＮＡ增殖能力仍能保持较高的水平。小鼠体内接种后的长瘤情况与新鲜对照组相比没有显著差异．因此，复苏后的艾氏腹水癌细胞可用于该癌细胞模型的接种传代．这种快速、简便的方法可应用于艾氏腹水癌细胞的深低温保存．

3',5'-cAMP对不同瘤龄的艾氏腹水癌细胞内cAMP免疫荧光细胞化学反应及其磷酸二酯酶的细胞化学反应与癌细胞膜表面某些形态学变化的关系

本工作用外源性cAMP加氨茶碱对小鼠艾氏腹水癌细胞进行了多方面的研究,观察到外源性3′,5′-cAMP不仅对小鼠艾氏腹水癌细胞增殖有显著的抑制作用。在接种后第9天,看到癌细胞增殖受到抑制的同时,大多数癌细胞胞质内的cAMP免疫荧光细胞化学反应增强,癌细胞内3′,5′-cAMP磷酸二酯酶(PDE)活性受到抑制,此外,还观察到某些癌细胞表面膜上微绒毛消失或变短以及对植物凝集素的凝集反应减弱等现象,这些癌细胞的逆转表现的变化均与不同瘤龄的癌细胞有关,如经外源性cAMP处理后,cAMP-PDE活性降低出现的最早,均在接种后5~7天时最为明显,cAMP免疫荧光细胞化学反应是在接种后第9天最为显著,癌细胞表面膜上的微绒毛消失和变短的细胞比数明显增多,对植物凝集素的凝集反应减轻都是在接种后7~9天时最为显著,而cAMP对小鼠艾氏腹水癌细胞的增殖抑制作用是在接种后第9~11天最为明显。根据上述实验结果,本文讨论了外源性cAMP加氨茶碱对腹水癌细胞的抑制作用和癌细胞内cAMP荧光反应,3′,5′-cAMP-PDE活性以及癌细胞表面膜上微绒毛形态学变化的因果关系。

复方中药和3′,5′环腺苷酸(cAMP)对小鼠艾氏腹水癌细胞的抑制效果与癌细胞内cAMP含量及cAMP-PDE活性变化关系

本工作用复方白蛇酒及外源性cAMP对小鼠艾氏腹水癌进行比较实验,通过实验观察到该复方制剂和外源性3’,5’-cAMP对小鼠艾氏腹水癌细胞的增殖均有显著的抑制作用,癌细胞增殖受到抑制的同时,癌细胞内3’,5’-cAMP含量显著提高;控制cAMP水平的3’,5’-cAMP磷酸二酯酶(PDE)活性受到抑制。该复方之所以能提高癌细胞内cAMP水平可能是由于细胞内3’,5’-cAMP-PDE.活性受到抑制所致。本工作进一步将该复方组分的两部份(六味中草药和蟾蜍酒)与原复方白蛇洒分别进行实验比较,观察到前两组癌细胞内3’,5’-cAMP水平和3’,5’-cAMP-PDE的活性均未看到显著变化,本工作可为中医临床用药和疗效机理提供一定的理论依据。

质子跨膜转运能够引起艾氏腹水癌细胞质膜表面局部脱水

我们实验室曾经发现多种质子泵活性能够引起生物膜和脂质体膜的融合,并发现琥珀酸氧化启动的线粒体呼吸链质子泵活性能够使线粒体外膜表面pH值降低0.6,在此基础上提出了质子泵诱导膜融合的理论模型.认为质子泵诱导膜融合的分子机制在于使生物膜表面质子化,引起膜表面水化层中水分子与磷脂极性端之间氢键结合的断裂,导致瞬间的和局部的脱水,从而引起两个相对膜间的接触和融合.近来。

胸腺素对Ehrlich腹水癌细胞MI影响的研究

小鼠经Ehrlich腹水癌细胞感染后,随着瘤龄增长,胸腺组织逐渐萎缩,胸腺淋巴细胞与骨髓细胞有丝分裂指数降低,机体免疫力减弱,癌细胞有丝分裂指数持续增高,荷瘤小鼠注射胸腺素后,其骨髓细胞和胸腺淋巴细胞有丝分裂指数,在不同瘤龄期均有明显提高,而瘤细胞有丝分裂指数下降,说明外源性胸腺素能延缓胸腺萎缩,促进造血功能,提高机体免疫力,从而对肿瘤细胞的增长具有间接的抑制作用.

绿芦笋提取液抑制肿瘤细胞核酸生物合成的研究

目的 :研究绿芦笋原汁和提取液对小鼠S180 肉瘤细胞和小鼠艾氏腹水癌细胞(EAC)核酸生物合成的影响。 方法 :采用 3H -TdR和3H -UR掺入肿瘤细胞DNA和RNA的方法 ,观察不同浓度的芦笋原汁和提取液对肿瘤细胞核酸生物合成的抑制作用。结果 :绿芦笋原汁及其乙醇提取液浓度分别为20、40、80、160mg/ml时 ,对S180DNA的掺入抑制率分别为 :20.40 %、52.19 %、56.90 %、77.11 %和53.25 %、76.86 %、88.86 %、94.62 % ;对S180 RNA的掺入抑制率分别为 :24.70 %、41.53 %、76.06 %、85.72 %和60.17 %、80.90 %、94.08 %、97.26 % ;对EAC的DNA掺入抑制率分别为 :5.16 %、13.00 %、31.44 %、57.09 %和20.56 %、43.02 %、58.55 %、75.99 % ;对EAC的RNA掺入抑制率分别为 :10.52 %、23.04 %、45.60 %、68.39 %和13.37 %、32.60 %、59.70 %、81.85 %。结论 :不同浓度的绿芦笋原汁和提取液能显著抑制肿瘤细胞核酸的生物合成 ,且抑制程度随原汁和提取液浓度的升高而增强。结果显示 ,在20～160mg/ml浓度范围内 。

胸腺素对荷瘤小鼠胸腺淋巴细胞有丝分裂指数影响的研究

本文报道胸腺素对荷瘤小鼠胸腺淋巴细胞有丝分裂指数的影响。实验结果表明,注射胸腺素的实验组胸腺淋巴细咆有丝分裂指数均高于对照组,其中不同瘤龄之间有一定差异。

不同细胞株对血卟啉吸收特性的比较研究

分别用不同浓度的血卟啉(Hematoporphyrin,Hp)依次孵育细胞,研究了S180、Eac、H22腹水型肿瘤细胞对其的吸收特性.结果表明,随着孵育时间的延长和孵育浓度的增加,腹水型肿瘤细胞对Hp的吸收也相应增加.当浓度≤50μg/mL时,三种细胞对Hp的吸收量缓慢增加;当浓度大于50μg/mL时,细胞对Hp的吸收迅速,H22在60 min左右出现峰值.S180对Hp的吸收能力稍强于Eac,前两者明显强于H22,而且不同的浓度范围可能导致同一细胞对Hp的吸收差异.这种吸收特点可能与肿瘤细胞膜表面的差异以及本身结构和功能特性有关.

A群链球菌制剂抑瘤试验中荷瘤细胞数量对生命延长率的影响

探讨A群链球菌制剂抑瘤试验中,荷瘤细胞(艾氏腹水癌细胞)的接种数量对试验结果的影响,选用接种不同数量艾氏腹水癌细胞的KM小鼠,进行A群链球菌制剂的抑瘤试验。结果显示,每只小鼠的癌细胞接种数量由100万下降至10万,抑瘤试验结果中小鼠的生命延长率呈上升趋势。

NCPP对肝纤维化作用及机理的初步研究

目的:研究不同状态巨噬细胞分泌细胞因子及免疫功能的差异及无细胞短棒状杆菌纳米级制剂(NCPP)活化巨噬细胞在肝纤维化中的作用。方法:将 C57/B6小鼠分为痤疮丙酸杆菌(ATCC12930)组、NCPP 组及对照组。于第1d 及第7d 腹腔注射痤疮丙酸杆菌及 NCPP。第10d 处死小鼠,取腹腔液,分离培养巨噬细胞,收集上清液,用于检测 IFN-γ和 TNF-α。小鼠腹腔注射 NCPP 与痤疮丙酸杆菌,14d 后测定脾指数,并做脾病理检查。小鼠腹腔注射艾氏腹水癌细胞,于注射癌细胞前1d 及注射后次日起,连续(间隔1d)腹腔注射 NCPP 与痤疮丙酸杆菌5次,计算小鼠存活率。将猕猴分为对照组及 NCPP 高、中、低3个剂量组,肌肉内注射给药,每周2次,连续90d。剖取肝脏,做病理切片检查。结果:NCPP 组小鼠腹腔巨噬细胞产生的 IFN-r 水平明显高于痤疮丙酸杆菌组(p<0.05),TNF-α的水平明显低于痤疮丙酸杆菌组(p<0.05)。NCPP 组和痤疮丙酸杆菌组均引起小鼠脾脏明显增大,脾指数增高。病理检查两组脾脏均显示脾窦中单核细胞及多核巨细胞明显增多,但NCPP 组有明显的抑瘤作用,而痤疮丙酸杆菌组无明显抑瘤作用。猴肝病理结果显示 NCPP 高、中、低剂量组肝脏组织结构正常,未见明显的纤维化现象。结论:NCPP 和痤疮丙酸杆菌均可刺激单核巨噬细胞增生,但分泌的细胞因子及免疫功能有明显差异。NCPP 活化巨噬细胞未见明显致肝纤维化作用。

白蛇六味和蟾蜍制剂的临床疗效与实验研究

引言1975年北京医学院第一附属医院一位移行上皮乳头状膀胱癌患者,两次手术后复发。经膀胱镜检查,发现膀胱内充满肿瘤。患者拒绝全切手术,自服加味龙蛇羊泉汤和蟾蜍汁,4个月后,经膀胱镜和脱落细胞复查,肿瘤全部消失,患者恢复了健康。据此我们在临床中选择18例膀胱癌病人,采取相同治法,观察治疗前后的变化,但未出现同样的疗效。

贵金属和过渡金属化合物在癌症化学疗法中的应用

3、有机贵金属和过渡金属π—配合物 3.1、钛、锆、铪、钒、铌和钽 最近几年人们才开始研究金属π—配合物的抗癌活性。其中最重要的结构类型化合物为26,研究较多的配合物之一是273.72-76,它对治疗实体和腹水肿瘤具有广谱性（见表4）,其它的二茂合钛衍生物,

挥发油与中药

当你走进中药店,就会感受到一种特异的扑鼻而来的中药气味,这种特异的、由中药饮片散发出来的气味就是挥发油引起的。 挥发油,又名精油。是一类可随水蒸汽蒸馏得到的与水不怕混溶的挥发性油状成分的总称。它广泛地存在于植物体中,几乎可以说,凡是有气味(大多芳香)的植物均含有多少不等的挥发油。而分布最多的植物科属为松科、柏科、木兰科、樟科、芸香科、桃金娘科、伞形科、唇形科、败酱科、菊科和姜科等。