艾溴利平降低巴马小型猪脂负荷后血清三酰甘油和游离脂肪酸

目的：观察脂蛋白酯酶活化剂艾溴利平（ibrolipim，别名NO-1886）对高脂高蔗糖高胆固醇喂养的巴马小型猪餐后三酰甘油代谢的影响。方法：将10头巴马小型猪随机分为正常对照组和高脂高糖高胆固醇喂养组，分别用正常饲料、高脂高糖高胆固醇饲料喂养5个月，每个月末监测其空腹血糖、血清总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油和游离脂肪酸水平。第5个月末从2组动物中分别随机选取3头进行脂肪耐量试验，分别经胃管给予以下4种处理：生理氯化钠溶液（10mL·kg^-1），20％脂肪乳剂（10mL·kg^-1），20％脂肪乳剂＋艾溴利平（0．3g·kg^-1），20％脂肪乳剂＋艾溴利平（1．0g·kg^-1）。测定0—8h内每小时血清三酰甘油和游离脂肪酸水平。结果：高脂高蔗糖高胆固醇喂养的小型猪血糖和血脂各项指标均显著升高。艾溴利平可以降低正常对照组脂负荷后血清三酰甘油和游离脂肪酸，呈一定剂量依赖，对高脂高糖高胆固醇喂养组的三酰甘油和游离脂肪酸亦有降低作用，但是降低幅度低于正常对照组。结论：艾溴利平可以降低正常对照组和高脂高蔗糖高胆固醇组脂负荷后血清三酰甘油和游离脂肪酸水平。

艾溴利平对高糖诱导的内皮细胞内皮素1、血管性假血友病因子表达的影响

目的观察艾溴利平对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞内皮素1、血管性假血友病因子(vWF)表达的影响,并探讨其分子机制。方法应用终浓度为33.3 mmol/L葡萄糖诱导人脐静脉内皮细胞12细胞株高糖模型,实验分为正常对照组、高糖模型组、艾溴利平组,噻唑蓝法评价内皮细胞活力;采用放射免疫方法测定内皮素1含量;酶联免疫吸附法检测培养上清中vWF含量;逆转录-聚合酶链反应检测内皮素1、vWF mRNA的表达;细胞免疫荧光法检测细胞内内皮素1、vWF蛋白水平的改变。结果高糖显著降低内皮细胞活力,增加内皮素1、vWF表达。艾溴利平能显著抑制高糖诱导的内皮功能障碍。低浓度艾溴利平(2、4、8μmol/L)短时间(6、12、24 h)提高细胞活力,降低内皮素1、vWF表达(P<0.01)。结论艾溴利平能抑制高糖引起的人脐静脉内皮细胞功能损伤,可能与vWF、内皮素1表达降低有关。

脂蛋白脂酶激活剂艾溴利平类似物的合成

合成了两个新型的艾溴利平类似物——N-2-硝基-4-氯苯基-4-[(膦酸二乙酯基)甲基]苯甲酰肼(5,总收率28.1%)和N-2-四氮唑基-4-氯苯基-4-[(膦酸二乙酯基)甲基]苯甲酰胺(7,总收率30.5%)。以对氯甲基苯甲酸为原料,经酯化、水解和酰氯反应制得中间体4-[(膦酸二乙酯基)甲基]苯甲酰氯(4);4与2-硝基-4-氯苯肼盐酸盐反应合成了5。4先与2-氨基-5-氯苯腈反应制得N-2-氰基-4-氯苯基-4-[(膦酸二乙酯基)甲基]苯甲酰胺(6);6再与叠氮化钠反应合成了7。其结构经1H NMR和IR表征。

艾溴利平对糖尿病小型猪心肌组织蛋白激酶-B表达的影响

目的观察磷脂酰肌醇-3激酶信号通路中关键分子蛋白激酶-B(Akt2)在饮食诱导的糖尿病小型猪心肌组织中的表达,以及合成化合物艾溴利平对Akt2表达的影响,探讨艾溴利平在糖尿病心肌病变中的作用。方法15只雄性广西巴马小型猪按体重随机分为3组,每组5只。正常对照组饲正常饲料,高能量组饲高脂高糖高胆固醇饲料,加药组在高脂高糖高胆固醇饲料中加入艾溴利平(0.4 g·kg^(-1)·d^(-1))。每月末测定血糖、三酰甘油(TG)、胰岛素、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)并行口服葡萄糖耐量实验(OGTF)。5 mo末取部分心肌组织,用Western blotting和免疫组织化学方法检测Akt2蛋白的表达。结果与正常对照组相比,高能量组血糖、TG、胰岛素和HDL-C升高,糖耐量减低;加药组与高能量相比,血糖、TG和胰岛素明显降低,HDL-C水平升高,OGTF血糖清除和胰岛素分泌近似正常对照组。心肌组织Akt2蛋白表达量正常对照组为1.48±s 0.22,明显高于高能量组(1.00±0.16,P<0.01);而加药组Akt2蛋白表达量1.38±0.20,高于高能量组(P<0.01),与正常对照组相近(P>0.05)。结论高脂高糖高胆固醇饮食诱导的糖尿病小型猪心肌组织Akt2表达降低,艾溴利平能够上调心肌组织Akt2蛋白的表达。

艾溴利平对高糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及蛋白激酶B表达的影响

目的观察艾溴利平对高糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡和蛋白激酶B(PKB)磷酸化的影响,并探讨其分子机制。方法应用终浓度为33.3 mmol·L-1葡萄糖诱导内皮细胞HUVEC-12细胞株高糖模型,实验分为正常对照组、高糖模型组、艾溴利平组和抑制剂组,Hoechst33258染色及AnnexinV和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测PKB总蛋白、PKB苏氨酸308(PKB-Thr308)及PKB丝氨酸473(PKB-Ser473)的磷酸化水平。结果高糖模型组内皮细胞凋亡指数(AI)增加为(14.07±s 0.25)%,高于正常对照组(P<0.01),艾溴利平8μmo·lL-1组AI降至(5.42±0.13)%,与高糖模型组相比有非常显著差异(P<0.01),抑制剂组AI增加至(12.00±0.10)%。低浓度艾溴利平(2、4、8μmo·lL-1)短时间(6、12、24、48 h)增加PKB磷酸化(P<0.01);而阻断PKB活性可显著抑制艾溴利平的抗凋亡作用。结论艾溴利平能抑制高糖引起的人脐静脉内皮细胞凋亡,可能与信号分子PKB的激活有关。