艾滋病毒1型逆转录酶抑制剂的小鼠血清活性动态研究

目的:观察艾滋病毒1型逆转录酶(HIV-1RT)抑制剂在小鼠血清中的活性动态,探讨其在药效评价中的可应用性。方法:不同途径给予小鼠已知和未知HIV-1RT抑制剂后,在不同时间取血分离血清,体外测定血清抑制 HIV-1RT的活性。结果:正常小鼠血清有非特异性抑制HIV-1RT的活性,经稀释后可排除;非核苷类RT抑制剂可在体外直接测定小鼠体内用药后的血清抑制HIV-1RT活性和动态,核苷类RT抑制剂的血清抗HIV-1RT的活性可测出,但血清活性不如非核苷类药物为高,主要因核苷类药物的活性物质是其三磷酸盐,在细胞内转化后形成。此种体外测定小鼠用药后血清活性的体内体外结合的实验方法,简便快速,可初步分析药物与血清蛋白的结合率以及估算其生物利用度和清除率。结论:体内与体外相结合的逆转录酶抑制剂的小鼠血清活性的测定方法,可应用于非核苷类HIV-1RT抑制剂的药效评价,对于核苷类HIV-1RT抑制剂,取血时间要长,并同时测定血清在细胞内的活性,以便综合分析。

美FDA批准替诺福韦双酯治疗儿科艾滋病毒-1感染患者

2012年1月，美国FDA批准了Gilead科学有限公司的替诺福韦双酯（tenofovir disoproxil fumarate／Viread）联合其它抗逆转录病毒药物治疗2～12岁儿科艾滋病毒-1感染患者。FDA还同时批准了替诺福韦双酯的3种低剂量规格片剂和1种口服粉剂，分别用于治疗6～12和2～5岁儿科艾滋病毒-1感染患者。

HIV-1前病毒基因扩增诊断早期HIV感染的研究

目的建立HIV前病毒核酸的检测方法,并探讨其早期诊断断HIV-1感染的效果。方法从HIV1+2蛋白印迹法确定HIV抗体阳性、并经病毒载量检测阳性的HIV感染者血浆中提取基因组DNA,应用合成HIV-1基因组gag区九条引物随机组合RT-PCR扩增HIVgag区核酸片断,筛选扩增灵敏度最高的三个扩增片断。其引物组合扩增样本核酸PCR产物经凝胶电泳观察判断结果。结果该方法的敏感性为94·17%,特异性为100%,三个片断扩增灵敏度分别为76·67%、87·5%、69·17%。结论PCR扩增HIV前病毒保守区多个基因片断,具有较高的灵敏度和特异度,方法简单,可以应用到HIV感染的早期诊断中。

河南省HIV-1流行毒株pol基因的分型与系统发生分析

目的了解河南省艾滋病病毒1型(HIV1)流行毒株pol基因的亚型及其系统发生情况。方法采集河南省20名艾滋病病人的抗凝全血,分离血浆,用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)扩增pol基因部分序列(PR与RT的p55区)并直接进行序列测定,登陆Web站点http://hivweb.lanl.gov确定毒株亚型。用BioEdit和DNASTAR软件的MegAlign模块进行系统发生分析,SPSS软件包对数据进行统计学分析。结果20份标本的pol基因序列系统发生分析显示均为B亚型,且具有较高的系统发生同源性,与东北地区流行毒株的相似度≥97%,PR基因离散率<0.2%,RT基因平均离散率为3.15%(0.7%～5.1%)。PR和RT基因遗传变异的差异具有显著的统计学意义(P<0.001)。结论pol基因的系统发生分析可以作为河南省HIV1毒株亚型确定的方法。河南与东北两地pol基因相似性以及PR与RT基因进化差异的意义,有待进一步研究。

HIV-1SF2株env基因(120)在大肠杆菌中的表达

运用基因重组技术，将ＨＩＶ－１ＳＦ２株编码外膜蛋白ｇｐ１２０的ｅｎｖ基因片段与原核载体ｐＢＶ２２０进行重组，构建成质粒ｐＢＶＳＦ２ｅｎｖ，并在肠杆菌（ＥＣｏｉｌＤＨ１０ｂ）中获得表达，经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ反应证实，该重组蛋白可与来自ＨＩＶ－１感染者的血清（含多克隆抗体）发生特异性反应。

1995年云南瑞丽HIV1毒株的基因变异和分析

从１９９５年瑞丽静脉注射毒品者及其配偶２６人的血样中，经ＰＣＲ扩增细胞内ＨＩＶ基因并对其ｅｎｖＣ２－Ｖ３区进行测序，结果发现１８人为Ｂ亚型ＨＩＶ１，８人为Ｃ亚型ＨＩＶ１毒株。在瑞丽以Ｂ亚型毒株为主，与我们以往报告一致。Ｃ亚型毒株的出现曾有报导，我们进一步分析发现，Ｃ亚型毒株感染者多在１９９４和１９９５年被感染。根据其核苷酸序列测定的基因离散率（２．２５％），远小于Ｂ型毒株（６．７％），也说明它是近两年才在瑞丽流行的。Ｃ亚型毒株感染者明显聚集于城周，而Ｂ亚型毒株感染者均匀分布，提示其传染源的定向性。对它的可能来源文中进行了讨论。

HIV-1母婴传播及干预措施

人免疫缺陷病毒-1型(HIV-1)可经母婴传播感染婴儿,其传播方式主要有三种:(1)宫内传播;(2)分娩期传播;(3)产后传播。近年来,HIV-1母婴传播的研究进展迅速,有关母婴传播率、传播时间、危险因素及干预措施等方面的报道较多,本文综述了近年来这几方面的研究进展。

新疆乌鲁木齐HIV-1流行毒株膜蛋白基因C2-V3区序列测定和亚型分析

应用ＰＣＲ方法对７份１９９６年３－５月采集于新疆乌鲁木齐ＨＩＶ－１阳性静脉吸毒者的外周血单核细胞（ＰＢＭＣｓ）样品进行扩增，获得了ＨＩＶ－１膜蛋白（ｅｎｖ）基因的核酸片段，并对其Ｃ２－Ｖ３区及邻区３５０－４５０个核苷酸序列进行了测定和分析。研究结果表明，７份样品都为Ｃ亚型的ＨＩＶ－１毒株序列，其组内的基因离散率为１．０％；与Ａ－Ｅ参考亚型及部分Ｃ亚型代表株序列相比较，这７个毒株与代表印度Ｃ亚型毒株及云南德宏州Ｃ亚型毒株的序列十分相似，其组间的基因离散率均为３．５％，与非洲Ｃ亚型毒株ｎｏｆ的基因离散率为１４．０％。根据以上数据及其它资料提示，ＨＩＶ－１在新疆乌鲁木齐的流行时间不长，且其毒株的传入与流行在云南德宏州的相同亚型ＨＩＶ－１毒株密切相关。

HIV-1核蛋白p24在昆虫细胞中的表达

将完整的ＨＩＶ－１ｐ２４基因克隆到杆状病毒转移质粒中。使用重组转移质粒与野生型杆状病毒（ＡｃＮＰＶ）ＤＮＡ共转染Ｓｆ９昆虫细胞，经筛选获得带有编码ｐ２４基因的重组杆状病毒。重组杆状病毒感染Ｓｆ９细胞后在细胞中表达了ＨＩＶ核蛋白ｐ２４。其重组蛋白的分子量为２４ｋＤ。此重组糖蛋白在免疫荧光，免疫印染和酶联免疫实验中都能被人ＨＩＶ－１阳性血清和单克隆抗体所识别。

免疫荧光检测HIV-1抗体方法的建立和应用

Using the mixture of HIV -1 infected and no - infected HeLa CD4+ cells, the antigen slides were prepared and the immunofluorescence assay for detection of antibodies to human immunode-ficiency virus type 1 was established. Seventy - seven serum samples including the national stan-dard reference of HIV antibody reagents were tested. The sensitivity and specificity were 96. 4 %and 100%, respectively. Compared with the confirmation test of Western Blot, the coincident rate was 92. 6 %. The results indicated that the specificity of immunofluorescence assay was high, and the positive predicted value was 100%, so it can be used as one of the confirmatory methods for HIV -1 antibody.

圆锥乌头多糖脱蛋白及抗HIV-1 RT活性研究

目的从圆锥乌头Aconitum paniculigerum Nakai中提取多糖,并研究圆锥乌头多糖体外抗HIV-1逆转录酶(HIV-1 RT)的活性。方法利用水提醇沉法从圆锥乌头中提取多糖,加入胰蛋白酶脱除粗多糖中的蛋白质,通过苯酚硫酸法计算粗多糖中的多糖含量,通过考马斯亮蓝法计算蛋白脱除率。以奈韦拉平为阳性对照药测试圆锥乌头多糖体外抗HIV-1逆转录酶(HIV-1 RT)的活性。结果圆锥乌头粗多糖质量百分得率为18.86%;最佳蛋白脱除方法为加入粗多糖量30%的胰蛋白酶,脱除率达到89.2%;对HIV-1逆转录酶(HIV-1 RT)的半抑制率IC50为95.04μg.mL-1。结论圆锥乌头药材中粗多糖含量比较高且具有抗HIV-1逆转录酶(HIV-1 RT)的活性。

用核酸序列为基础的扩增（NASBA）检测HIV－1RNA

用核酸序列为基础的扩增（ＮＡＳＢＡ）检测ＨＩＶ－１ＲＮＡ戴玉琳综述何宇平，顾金祥审校用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测血清阳转者标本的ＨＩＶ－１序列已被证明为特异且敏感。ＰＣＲ需要ＤＮＡ作为标本，如果标本中只有ＨＩＶ－１病毒，通过事先的逆转录步骤检测也是可...

1996年加利福尼亚州洛杉矶县HIV-1O群感染的鉴定

１９９６年加利福尼亚州洛杉矶县ＨＩＶ－１Ｏ群感染的鉴定把引起获得性免疫缺陷综合症（ＡＩＤＳ）世界流行的ＨＩＶ－１毒株定名为Ｍ群病毒。最近鉴定到一群也引起ＡＩＤＳ，但是与Ｍ群毒株有很大遗传学差别的ＨＩＶ－１毒株归类为Ｏ群病毒。已报道在西非和中非（喀麦隆...

民和县126人HIV－1检测结果分析

民和县１２６人ＨＩＶ－１检测结果分析青海省民和县防疫站姜文山，张治中，李飞保艾滋病（ＡＩＤＳ）是由艾滋病病毒（ＨＩＶ）侵入人体后，破坏人体免疫功能而使人体发生一系列不可治疗的细菌、病毒感染和肿瘤，最后导致患者死亡的传染病。该病自八十年代初在西方首次发...

HIV－1的母－婴垂直传播

本文综述了ＨＩＶ－１的母－婴垂直传播的研究进展。

云南省2008-2009年HIV-1病毒株亚型分布

目的了解云南省目前HIV-1流行株的基因型及其地区和人群分布。方法收集2008-2009年云南省15个地市788例HIV感染者／艾滋病患者（HIV／AIDS）的血浆标本和背景信息，采用RT-PCR法分别扩增HIV-1 gag、pol全长基因（1584bp和3147bp）及env基因的C2V3片段（558bp），序列编辑后用Genotyping及Mega5．03软件工具确定病毒基因型，分析HIV-1株的地区和人群分布特征。结果788例标本获得1728条HIV-1基因序列，其中全长gag基因序列599条、全长pof基因序列564条、env基因C2V3区序列525条，确定617例基因亚型，构成比分别为CRF08_BC（50．2％）、CRF01_AE（25．0％）、未知重组（10．2％）、CRF07_BC（9．2％）、C亚型（2．9％）和B（B′）亚型（2．4％）。HIV-1株在云南省具有地域分布特征，可分为以临沧和昆明为代表的CRF08_BC为主的地区，以德宏和西双版纳为代表的CRF08_BC与CRF01_AE构成比相近的地区；未知重组型在云南省少数民族中所占比例（17．0％）显著高于汉族（6．7％）；异性性传播感染者和静脉注射吸毒感染者的CRF08_BC亚型均占总数的50．0％以上，但前者CRF01_AE的构成比占约30．0％，后者未知重组型和CRF07_BC的比例分别达到约15．0％。未知重组病毒株呈现两种重组模式，分别为B（B′）／C重组和以CRF01_AE为母株嵌入B（B′）和／或C片段重组，并以前者为主（74．6％）。结论云南省HIV-1株组成复杂，具有显著的地域、民族和传播途径相关的特征，并出现新型重组病毒株，应密切监测。

内罗毕HIV－Ⅰ的母婴传播

内罗毕ＨＩＶ－Ⅰ的母婴传播Ｄａｔｔａ等报告在肯尼亚内罗毕的定群研究中，人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）Ⅰ型的母婴传播率为４３％，这比非洲及别地区的另一些研究估计高的多。在９０名以抗体的检出被认为受感染的儿童中，４０名原先检查抗体为阴性，推断可能是在出生后通...

HIV-1N348I耐药突变流行状况及突变模式的研究

目的阐明HIV-1耐药相关突变N348I在中国艾滋病患者中的流行率及突变模式。方法用RT-PCR从血浆标本中扩增614例治疗失败和619例未治疗的艾滋病患者的HIV-1po1基因蛋白酶（PR）反转录酶（RT）全长基因（2100bp）。将获得的1233条序列提交斯坦福大学HIV-1耐药数据库，根据数据库比对结果，分析N348I出现的频率及模式。结果N348I突变在抗病毒治疗失败患者中的流行率为6．5％，在未治疗患者中的流行率为0．8％。使用含齐多夫定（AZT）方案治疗的患者，N348I突变的流行率显著高于使用不含AZT方案治疗的患者（14．1％vs4．7％，x2=10．21，P〈0．01）；在出现N348I突变的接受治疗的患者中，N348I均以与其他突变联合的形式出现，与胸苷类似物耐药突变（TAMs）共同发生占85．0％（34／40）、与M184V／I共同出现占52．5％。结论使用一线方案治疗失败的艾滋病患者中，N348I突变有一定流行，该突变的发生以特有突变模式出现。

深圳地区120株HIV-1膜区和结构蛋白区基因变异分析

目的研究深圳地区HIV-1病毒株在膜区和结构蛋白区基因变异情况,比较不同亚型毒株之间基因离散率的差异。方法收集HIV-1感染者新鲜血浆,提取血浆中HIV-1病毒株RNA,RT-PCR套式扩增env区和gag区基因,基因测序后进行序列比对和分析,构建基因进化树,计算基因离散率。结果各亚型毒株在env区相互之间基因离散率最大的是B亚型和07-BC亚型,最小的是07-BC亚型和08-BC亚型;各亚型毒株在gag区相互之间基因离散率最大的是01_AE亚型和07-BC亚型,最小的是07-BC亚型和C亚型。结论 07-BC、08-BC及C亚型在两个基因片段上基因距离均最近,说明这三个亚型可能有共同的起源。