芍仙萸颗粒通过调节调节性T细胞/辅助性T细胞免疫平衡治疗小鼠原发免疫性血小板减少症的机制研究

目的探究芍仙萸颗粒对原发免疫性血小板减少症(ITP)小鼠肝脾组织损伤及调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞(Th17)免疫平衡的影响。方法利用大鼠抗小鼠CD41单克隆抗体(MWReg30)诱导建立ITP小鼠模型,随机分为对照组、ITP组,低、高剂量芍仙萸颗粒组和阳性对照[泼尼松(PED)]组,动物血细胞分析仪检测血小板数;瑞氏染色计数骨髓巨核细胞总数、产血小板型巨核细胞数;计算肝、脾脏器指数,苏木精-伊红(HE)染色观察肝、脾组织形态学变化;流式细胞术检测Treg、Th17比例;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Treg、Th17相关细胞因子水平。结果相比于对照组,ITP组血小板数、骨髓产血小板型巨核细胞数减少,骨髓巨核细胞总数、肝指数、脾指数增加(P<0.05),同时肝、脾组织可见明显病理学改变,肝小叶界限不清,肝细胞索排列紊乱,肝细胞空泡化严重,细胞间隙增大;脾脏白髓增大,红髓缩小,淋巴细胞增多;相比于ITP组,低剂量芍仙萸颗粒组、高剂量芍仙萸颗粒组及阴性对照组血小板数、骨髓产血小板型巨核细胞数增加,骨髓巨核细胞总数、肝指数、脾指数减少(P<0.05),同时肝、脾组织病理学改变明显减轻,且高剂量芍仙萸颗粒组作用效果更佳,与PED组比较差异无统计学意义(P>0.05)。相比于对照组,ITP组Treg比例、Treg/Th17比值及白细胞介素(IL)-10、转化生长因子(TGF)-β1表达减少,Th17细胞比例及IL-17表达增加(P<0.05);相比于ITP组,低剂量芍仙萸颗粒组、高剂量芍仙萸颗粒组Treg细胞比例、Treg/Th17比值及IL-10、TGF-β1表达增加,Th17细胞比例及IL-17表达减少(P<0.05),且高剂量-芍仙萸颗粒组作用效果更佳。结论芍仙萸颗粒可增加ITP小鼠血小板数、产血小板型巨核细胞数,以及减轻肝脾组织损伤,可能通过上调Treg比例、下调Th17比例,使Treg/Th17趋于免疫平衡而实现。

芍仙萸颗粒对免疫性血小板减少症小鼠肝脾组织的影响

目的 探讨芍仙萸颗粒对免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)小鼠肝脾组织及辅助性T细胞(helper T cell,Th cell)17/调节性T细胞(regulatory T cell,Treg cell)免疫平衡的影响。方法 将30只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、芍仙萸颗粒低剂量组(5.85 g/kg)、高剂量组(11.7 g/kg)和泼尼松组(5.4 mg/kg),每组6只。检测各组小鼠免疫相关指标、Th17和Treg细胞数,计算Th17/Treg比值,并观察小鼠肝脏、脾脏的形态变化。结果 与对照组相比,模型组小鼠血小板计数下降,血小板相关免疫球蛋白(platelet-associated immunoglobulin,PAIg)水平上升(P <0.05);芍仙萸颗粒低、高剂量组血小板计数上升,PAIg水平下降(P <0.05)。与对照组相比,模型组小鼠白介素(interleukin,IL)-17和转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1水平下降,IL-10水平上升(P <0.05);芍仙萸颗粒低、高剂量组IL-17和TGF-β1水平上升,IL-10水平下降(P <0.05)。与对照组相比,模型组小鼠脾脏组织紊乱,白髓较大,红髓较小,髓索、髓窦内可见大量发育异常的巨核细胞,肝脏组织肿胀,肝小叶结构消失,汇管区及间质有大量炎症细胞浸润;芍仙萸颗粒低、高剂量组,肝脾组织病理改变较模型组显著改善,与泼尼松组疗效相当。与对照组相比,模型组小鼠Th17细胞数增加,而Treg细胞数减少,Th17/Treg比值上升(P <0.05);芍仙萸颗粒低、高剂量组,两者比值对应下降(P <0.05)。结论 芍仙萸颗粒可显著增加ITP小鼠血小板数量,有效控制出血,并通过调节Th17/Treg细胞免疫平衡对ITP小鼠的肝脾组织起到一定的保护作用。