芍药色素对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝小鼠的保护作用

目的研究芍药色素对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝小鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法C57BL/6型雄性小鼠48只,分为正常对照组、模型对照组、芍药色素大剂量组、中剂量组、小剂量组。使用链脲佐菌素腹腔注射加高脂饮食建立小鼠2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝模型。检测小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血糖、胰岛素水平,检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)炎症因子水平,检测肝组织中丙二醛(MDA)、超氧歧化酶(SOD)水平,HE染色法观察肝组织病理学改变,Western blotting方法检测肝组织NF-κB蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型对照组小鼠血清中ALT、AST、TC、TG、血糖、胰岛素水平上升;血清中TNF-α、IL-6水平、肝组织中MDA水平明显升高,肝组织SOD水平明显下降;肝组织NF-KB蛋白表达上调。使用芍药色素后ALT、AST、TC、TG、血糖、胰岛素、TNF-α、IL-6、MDA水平下降,SOD水平上升、NF-κB表达下调。HE染色发现肝组织病变明显减轻。结论芍药色素对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝小鼠有保护作用,可以抑制炎症和氧化应激反应,其机制可能与调节NF-κB蛋白表达有关。

芍药色素下调miR-21并激活SIRT1/FOXO1同路进而保护CCl_(4)诱导的大鼠急性肝损伤

目的考察芍药色素是否通过微小RNA-21(miR-21)调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框转录因子O1(FOXO1)通路保护四氯化碳(CCl_(4))诱导的大鼠急性肝损伤。方法将72只SD大鼠分为正常组、模型组(CCl_(4)处理)、芍药色素组(芍药色素处理)、芍药色素+miR-21组(芍药色素+miR-21处理)、EX527组(SIRT1特异性抑制剂EX527处理)和芍药色素+EX527组(芍药色素+EX527处理),每组12只。大鼠在第3、6和9天分别灌胃给予0.1、0.2和0.3 ml的CCl_(4),第10~16天灌胃给予芍药色素或静脉注射miR-21激动剂、腹腔注射EX527处理,1次/d。称重法检测大鼠的肝脏指数,全自动生化分析仪检测大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,TUNEL染色检测各组大鼠肝细胞凋亡,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,免疫印迹实验(Western blot)分析大鼠肝组织中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、SIRT1、FOXO1和磷酸化FOXO1(p-FOXO1)表达水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定大鼠肝组织中miR-21表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠肝脏指数、ALT、AST、MDA水平、肝细胞凋亡数量、Bax蛋白、miR-21的表达水平和FOXO1/p-FOXO1值升高(P<0.05),SOD水平、Bcl-2、SIRT1、FOXO1和p-FOXO1蛋白的表达水平降低(P<0.05),大鼠急性肝损伤造模成功。与模型组比较,芍药色素组大鼠的肝脏指数、ALT、AST、MDA水平、肝细胞凋亡数量、Bax蛋白、miR-21的表达水平和FOXO1/p-FOXO1值降低(P<0.05),SOD水平、Bcl-2、SIRT1、FOXO1和p-FOXO1蛋白的表达水平升高(P<0.05)。与芍药色素组比较,芍药色素+miR-21组大鼠肝组织的SIRT1、FOXO1和p-FOXO1蛋白水平降低(P<0.05),FOXO1/p-FOXO1值升高(P<0.05)。EX527组大鼠SIRT1、FOXO1和p-FOXO1蛋白水平降低(P<0.05),FOXO1/p-FOXO1水平升高(P<0.05)。而芍药色素+miR-21组或芍药色素+EX527组大鼠的肝脏指数、ALT、AST、MDA水平、肝细胞凋亡数量和Bax蛋白表达升高,SOD水平和Bcl-2表达水平降低(P<0.05)。结论芍药色素可下调miR-21并激活SIRT1/FOXO1同路,进而保护CCl_(4)诱导的大鼠急性肝损伤。

观赏芍药花黄色素对断奶仔猪血清抗氧化能力的影响

本试验旨在研究观赏芍药花黄色素对断奶仔猪血清抗氧化能力的影响,试验选择100头26日龄、体重相近"杜×长×大"断奶仔猪,随机分为4个组,每个组5个重复,每个重复5头。试验1组为对照组,饲喂基础饲粮,试验2组、试验3组、试验4组分别在基础饲粮中添加0.01%、0.02%、0.04%观赏芍药花黄色素,试验为期28d。结果表明:与试验1组相比,试验3组、试验4组血清过氧化酶活性分别提高12.40%、14.13%(P<0.05),血清超氧化物歧化酶活性分别提高14.63%和16.78%(P<0.05),血清谷胱甘肽过氧化物酶分别提高10.20%、9.85%(P<0.05),血清丙二醛含量分别降低6.61%和8.05%(P<0.05),由此可见,饲粮中添加观赏芍药花黄色素可以提高断奶仔猪血清抗氧化能力,综合各项指标和添加成本,0.02%观赏芍药花黄色素在断奶仔猪饲料里添加效果较理想。

双标样高效液相色谱法测定紫玉米花青素的含量

采用分子量校正系数减小由于样品分子量与标样不同造成的偏差;根据紫玉米花青素中矢车菊素-3-葡萄糖苷和芍药色素-3-葡萄糖苷及其衍生物含量为主要组成部分,选择矢车菊素-3-葡萄糖苷和芍药色素-3-葡萄糖苷为标样的双标样高效液相色谱法分别计算相应衍生物含量减小由于样品母环与单一标样不同造成的偏差,最终确定紫玉米花青素含量为93.77mg/g。并证实该方法的精密度、重复性和稳定性均较高。

多元统计及“成分-靶点-疾病”在线关联分析脑心通胶囊中质量标志物

目的基于质量标志物(Q-marker)概念,通过筛选脑心通胶囊Q-markers,构建活性化合物-靶点网络,建立脑心通的整体质控方法。方法采用多元统计方法找到多批次脑心通胶囊的特异性成分,运用基于BATMAN-TCM网络药理学计算平台构建"Q-markers-靶点-通路-疾病"网络,并进行生物学信息注释。进一步建立超高效液相色谱法(UPLC)同时质控Q-markers的分析方法。结果多元统计分析将桑皮苷A、羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸、毛蕊异黄酮苷、迷迭香酸、丹酚酸B、芒柄花素和丹参酮IIA 9种成分初步确定为脑心通胶囊整体质控的Q-markers。通过靶点网络构建和拓扑学分析结果推测,Q-markers主要作用于PTGIS、PTGS2、CHRNA10、ENPP1和ADORA2A 5个关键靶点。针对Q-markers建立的UPLC质控方法,线性关系良好(r<0.999),重复性、稳定性、精密度试验RSD均<3%。结论基于多元统计,网络药理学和UPLC多成分定量测定技术的Q-markers辨析方法,可以初步建立有效成分群多角度的分析方法,并用于脑心通胶囊的质量控制。