中药黄芪中异黄酮苷类化合物的高效液相色谱-串联质谱分析

利用高效液相色谱-大气压化学电离质谱联用技术,建立了黄芪提取物中的有效成分毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷和芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷的定性分析方法。这两个化合物在大气压化学电离质谱条件下,质谱裂解行为的研究表明,二者具有相似的特征质谱裂解行为,即在正离子模式下的一级质谱中均产生强的准分子离子[M+H]+峰和苷元离子[M+H-G lu]+峰;且苷元离子经碰撞诱导解离均产生.CH3(15 Da)、CH3OH(32Da)和2CO(56 Da)的中性丢失;同时发生Retro-D iels A lder(RDA)裂解反应,导致在毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷和芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷的二级质谱图中分别产生相对分子质量为m/Z148和m/Z133的特征碎片离子峰。这些特征碎片可以作为这两个化合物定性的依据。该方法已成功应用于黄芪注射液中的这两种物质的定性分析。

高效液相色谱法考察黄芪蜜炙前后4种异黄酮含量的变化

目的通过HPLC法测定炮制前后黄芪中4种异黄酮含量,为黄芪和炙黄芪提供简便快捷的分析方法。方法色谱柱为kromasil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水系统,梯度洗脱,检测波长:251nm,柱温:40℃,流速:1.0mL.min-1,进样量:10μL。结果毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)在6.3～630mg.L-1、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ)在4～400mg.L-1、毛蕊异黄酮(Ⅲ)在4.5～450mg.L-1、芒柄花素(Ⅳ)在5～500mg.L-1与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 5、0.999 5、0.999 6、0.999 7。4种成分的加样回收率均>96%,RSD均<3%。结论该法简便快速,重复性良好,结果准确可靠,可用于黄芪和炙黄芪药材中4种主要异黄酮类成分的含量测定,为提高黄芪、炙黄芪质量标准提供借鉴。

HPLC法同时测定黄芪桂枝五物汤中6种有效成分的含量

目的建立同时测定黄芪桂枝五物汤中芍药苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、肉桂酸以及刺芒柄花素6种有效成分含量的方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Agilent zorbax SB-C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-体积分数0.1%甲酸水溶液(B),检测波长为254 nm,流速1.0 mL·min,柱温40℃。结果芍药苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、肉桂酸和刺芒柄花素分别在质量浓度299.9~4798 mg·L^(-1)、10.55~168.8 mg·L^(-1)、4.625~74.00 mg·L^(-1)、1.375~22.00 mg·L^(-1)、6.575~105.2 mg·L^(-1)、0.6250~10.00 mg·L^(-1)内线性关系良好,r均大于0.999;加样回收率分别为98.92%~102.53%、99.47%~104.24%、98.81%~103.70%、99.15%~103.45%、98.44%~102.53%、96.32%~101.44%,RSD均小于2.0%。结论所建立的HPLC方法可用于同时测定黄芪桂枝五物汤中6种有效成分的含量,为黄芪桂枝五物汤的质量控制提供实验依据。

补阳还五汤吸收入脑及入血成分的UPLC-Q-TOF-MS/MS分析

目的:对大鼠灌胃补阳还五汤提取物后的吸收入脑及入血成分进行分析,为该复方的临床应用提供参考。方法:采用UPLC-Q-TOF-MS/MS对正常大鼠脑组织、血浆和脑缺血再灌注大鼠脑组织、血浆进行分析,色谱条件为流动相甲醇-0. 1%甲酸水溶液梯度洗脱,流速0. 3 mL·min^-1,进样量3μL;质谱条件为电喷雾离子源,正、负离子模式扫描,扫描范围m/z50~1 000。根据保留时间、精确相对分子质量、一级和二级质谱数据等鉴定补阳五汤中的原型成分。结果:补阳还五汤提取物给药后,发现5个化合物能透过血脑屏障进入正常脑组织,鉴定为毛蕊异黄酮苷、芍药内酯苷、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-乙酰基、红花黄色素C和黄芪甲苷;2个化合物能透过血脑屏障进入造模脑组织,鉴定为毛蕊异黄酮苷和芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-乙酰基;7个化合物进入正常血浆中,经鉴定为毛蕊异黄酮苷、芍药内酯苷、羟基红花黄色素A等;3个化合物进入造模血浆中,鉴定为毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-乙酰基,6″-O-乙酰基-(6αR,11αR)-9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡糖苷和芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷-6″-O-乙酰基。结论:补阳还五汤在正常与脑缺血损伤大鼠中的药效物质基础不尽相同,可为该复方的作用机制研究奠定基础。

HPLC-MS/MS法测定芪葵颗粒中25个成分的含量

目的:建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定芪葵颗粒中25个成分(7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷、L-苯丙氨酸、毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷、芦丁、2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-葡萄糖苷、美迪紫檀苷、异黄芪皂苷Ⅱ、杨梅素、无水柠檬酸、紫檀烷、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅰ、环黄芪苷Ⅱ、异黄芪皂苷Ⅰ、L-色氨酸、黄芪皂苷Ⅱ、异槲皮苷、刺芒柄花苷、金丝桃苷、没食子酸、槲皮素、毛蕊异黄酮、芒柄花素、大黄素)的含量。方法:采用Agilent Poroshell 120 SB-C_(18)色谱柱(100 mm×3.0 mm,2.7μm),以含0.1%甲酸和1 mmol·L^(-1)甲酸铵的水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),柱温45℃,进样体积2μL;采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)模式,负离子模式扫描。结果:25个成分在测定的质量浓度范围内线性关系良好,相关系数(r)均>0.9950,精密度、重复性、稳定性均良好,平均加样回收率在89.5%~105.7%,RSD≤4.0%;3批芪葵颗粒中上述25个成分的含量范围分别为0.005~0.006、0.102~0.104、0.107~0.155、0.073~0.074、0.016~0.019、1.058~1.120、0.032~0.047、0.040~0.052、5.600~6.617、0.026~0.030、0.009~0.011、0.009~0.013、0.077~0.085、0.018~0.026、0.131~0.154、0.061~0.068、0.032~0.038、0.108~0.127、0.043~0.064、0.167~0.185、0.084~0.110、0.021~0.026、0.186~0.203、0.091~0.094、0.020~0.033 mg·g^(-1)。结论:所建立的方法可准确测定芪葵颗粒中多个主要成分,适用于芪葵颗粒制剂的质量评估与控制。

复方芪麻胶囊UPLC指纹图谱建立和同时测定8种成分研究

目的 建立复方芪麻胶囊（CQC）的UPLC指纹图谱，并同时测定指标成分天麻素、5-羟甲基糠醛（5-HF）、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷（CG）、野漆树苷、柚皮苷、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷（FG）、毛蕊异黄酮、芒柄花素的量，为评价CQC质量提供依据。方法 分析采用Agilent Eclipse C18柱（100 mm×4.6 mm，3.5 μm），以乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱，体积流量0.3 mL/min，柱温25℃，检测波长为265 nm。结果 得到分离度和重现性良好的CQC UPLC指纹图谱，相似度在0.98以上，标示出22个共有峰；8种成分中天麻素在5.976~29.880 μg/mL、5-HF在10.596~52.980 μg/mL、CG在2.697~13.485 μg/mL、野漆树苷在2.262~11.309 μg/mL、柚皮苷在40.768~203.840 μg/mL、FG在5.825~29.126 μg/mL、毛蕊异黄酮在0.372~1.858 μg/mL、芒柄花素在1.888~9.440 μg/mL线性关系良好，r均〉0.999 9，加样回收率分别为1.04%、1.30%、1.81%、1.41%、1.29%、1.01%、1.48%、1.29%。10批样品中天麻素量在2.883~3.491 mg/g，5-HF量在1.710~3.791 mg/g，CG量在0.107~0.286 mg/g，野漆树苷量在0.157~0.346 mg/g，柚皮苷量在8.853~10.726 mg/g，FG量在0.282~0.692 mg/g，毛蕊异黄酮量在0.097~0.135 mg/g，芒柄花素量在0.041~0.063 mg/g。结论 同时对CQC UPLC指纹图谱和8个指标成分进行分析，方法快速、简便、准确，可以作为有效评价该制剂质量的方法。