芜菁的化学成分研究

目的研究芜菁的化学成分,发现其活性成分。方法芜菁经甲醇回流提取、硅胶柱层析、薄层层析、Sephadex LH-20柱层析进行分离纯化,波谱分析(核磁共振氢谱、碳谱)确定结构谱。结果从该药用植物分离得到17个化合物,分别为:(1)1-(4-羟基苯基)-2-丙酮;(2)4-(2-丁氧基乙基)苯酚;(3)1-甲氧基-3-吲哚乙腈;(4)2,2′-oxybis(1,4)-di-tert-butylbenzene;(5)单棕榈酸甘油酯;(6)邻苯二甲酸-1-丁酯-2-异丁酯;(7)邻苯二甲酸二丁酯;(8)1-甲氧基-3-吲哚甲醛;(9)3,7-Dimethyl-n-octan-3α-ol-1-yl-benzoate;(10)邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯;(11)β-谷甾醇;(12)TgSSTg;(13)3-吲哚甲醛;(14)咖啡酸;(15)槲皮素;(16)auriculatumA;(17)甘草黄苷。结论1~5、8~9、12~13均为首次从该植物分离得到。以上化合物的发现进一步丰富了芜菁的化学成分组成,为综合开发和利用芜菁植物资源提供前期的实验基础。

芜菁多糖铁配合物的合成工艺研究

目的研究芜菁多糖铁(Ⅲ)[BP-Fe(Ⅲ)]配合物的合成工艺。方法以三氯化铁和芜菁多糖为反应物,合成一种芜菁多糖铁(Ⅲ)配合物;采用单因素法系统研究pH、反应时间、温度、枸橼酸钠与多糖质量比4个因素对BP-Fe(Ⅲ)配合物合成量的影响;采用正交实验筛选BP-Fe(Ⅲ)配合物的最优合成工艺;采用UV法测定BP-Fe(Ⅲ)配合物中的铁含量,进行铁离子特征反应实验;对BP-Fe(Ⅲ)配合物和芜菁多糖进行红外光谱表征。结果正交实验结果显示BP-Fe(Ⅲ)配合物的最优合成工艺条件为枸橼酸钠和芜菁多糖质量比2∶1,反应时间180 min,反应液pH=6,反应温度60℃,该条件下铁含量为4.53%,对BP-Fe(Ⅲ)配合物中铁含量影响顺序为:枸橼酸钠和多糖质量比(A)>反应液pH值(B)>反应时间(C)>反应温度(D);铁离子特征反应实验结果表明芜菁多糖与铁络合成稳定的配合物;红外光谱图显示芜菁多糖与铁形成的稳定配合物基本结构无较大变化。结论本方法操作简单,成本低,适用于多糖铁配合物的合成。

不同海拔高度芜菁营养成分分析

【目的】研究不同海拔高度对芜菁营养成分的影响,分析芜菁在青海省的适生区范围,为芜菁种植选择最佳适生区以及提高资源利用率提供重要的依据。【方法】选取不同来源的13份芜菁为材料,比较分析芜菁在青海省西宁市(海拔2261 m,A处理)、青海省海南藏族自治州贵南县(海拔3100 m,B处理)和青海省玉树藏族自治州玉树市小苏莽乡(海拔3750 m,C处理)3个不同海拔的地区种植对其营养成分的影响。【结果】随着海拔高度的增加,芜菁的可溶性双缩脲蛋白质含量增加、总糖含量增加、亚硝酸盐含量增加、硝态氮含量降低、含水量降低,而海拔高度对芜菁抗坏血酸含量、总抗氧化能力和粗纤维含量没有显著影响,表现为在B处理下,抗坏血酸含量高于其他两个地区,总抗氧化能力更强,粗纤维含量比较高。海拔高度与总糖、亚硝酸盐含量呈极显著正相关,与可溶性糖、硝态氮含量呈极显著负相关;土壤理化性质与可溶性蛋白、可溶性糖、总糖、硝态氮和亚硝酸盐含量具有相关性。【结论】在不同海拔地区芜菁含有的营养成分间存在显著差异,4份材料(1402、W_(30)、昌都和玉树芫根)在海拔2261和3100 m的地区各营养成分含量表现更优,1份材料(W 22)在海拔为3750 m的地区营养含量表现更佳。9个营养指标中有4个与海拔高度达到显著性相关;土壤理化性质与营养成分含量具有相关性。

芜菁酸性多糖体内抗肿瘤活性研究

目的:探究芜菁酸性多糖一组分(BRAP-1)对非小细胞肺癌H226细胞荷瘤小鼠的影响。方法:将60只小鼠分为模型组(0.1 mL/10 g)、阳性药物顺铂组[3 mg/(kg·2 d)]、BRAP-1低剂量组[50 mg/(kg·d)]、BRAP-1中剂量组[100 mg/(kg·d)]和BRAP-1高剂量组[200 mg/(kg·d)]。试验期间观察小鼠肿瘤生长情况,计算抑瘤率、脏器指数;酶联免疫法检测各组小鼠血清中的白细胞介素18(IL-18)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;实时荧光定量核酸扩增法(q-PCR)、免疫印迹试验检测IL-18、IL-1β、受体相互作用蛋白1(RIP-1)、RIP3、混合谱系激酶结构域样蛋白(MLKL)基因表达情况。结果:与模型组相比较,BRAP-1低、中剂量组抑瘤效果明显(P<0.05),阳性组和BRAP-1高剂量组抑瘤率效果显著(P<0.01);模型组与其他各组相比较,阳性组和BRAP-1高剂量组小鼠血清中IL-1β含量显著增加(P<0.01),IL-18、TNF-ɑ在阳性组中明显降低(P<0.05),BRAP-1各剂量组中显著增加(P<0.01);q-PCR、免疫印迹试验结果显示,与模型组相比IL-1β随给药剂量增加mRNA相对表达量减少(P<0.01),而IL-18、MLKL、RIP1、RIP3的mRNA及蛋白相对表达量增加(P<0.01)。结论:BRAP-1可以通过调节免疫细胞因子水平,上调坏死性凋亡相关蛋白MLKL、RIP1、RIP3抑制肺鳞癌H226细胞体内生长。

芜菁固体饮料制备工艺优化

针对芜菁产品辛辣味严重的问题,以γ-环糊精对芜菁提取物进行包埋,根据Box-Benhnkend的中心组合设计试验原理,以感官评分为响应值,确定其最佳工艺,并通过正交试验优化芜菁固体饮料配方工艺。结果表明:最佳包埋工艺为在55℃下,添加γ-环糊精2 g,包埋4 h。固体饮料最佳配比为芜菁膏粉3.8 g、白砂糖4%、苹果酸0.04%,用200 mL水冲泡。γ-环糊精能够对芜菁提取液中辛辣气味有效包埋,以其为主要原料的芜菁固体饮料,酸甜可口,香味浓郁,可为高原抗缺氧产品研发及芜菁深加工提供参考依据。

氮肥用量对芜菁植株生长及肉质根品质的影响

为探究适宜芜菁植株生长的氮肥施用量,以芜菁为研究对象,将田园土和椰糠以2∶1体积比配成栽培基质,加入0.1 kg/m^(2)腐熟后的羊粪。以46%含氮量的尿素为变量,将尿素分别按1 hm^(2)施入40 kg、80 kg、120 kg和160 kg,对照为芜菁常规化肥(不施加尿素)的施肥量,共设5个处理。通过测定并比较芜菁植株的生长指标、肉质根品质及产量,研究不同氮肥施用量对芜菁植株生长发育及肉质根品质的影响。结果表明,施入氮肥120 kg/hm^(2),对芜菁植株生长最有力,肉质根品质最佳,产量最高。最终得出施用46%含氮量的尿素120 kg/hm^(2)可以获得相对高产优质的芜菁。

芜菁中性多糖对PC12细胞氧化损伤保护作用机制的初步研究

以H_(2)O_(2)诱导PC12细胞建立氧化损伤模型,研究芜菁中性多糖(neutral polysaccharide from Brassica rapa L.,BRNP)对PC12细胞氧化损伤保护及初步作用机制。采用CCK-8法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶(LDH)检测H_(2)O_(2)对PC12细胞氧化损伤的保护作用;JC-1法检测BRNP对H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞线粒体膜电位的影响;Western blot法检测BRNP对H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平。结果表明,BRNP对PC12细胞无明显细胞毒性;H_(2)O_(2)的造模浓度和时间分别为300μmol/L、4 h;BRNP在一定程度上可减轻H_(2)O_(2)对PC12细胞的氧化损伤;BRNP可降低H_(2)O_(2)对PC12细胞线粒体膜电位的损伤;以不同剂量BRNP干预PC12细胞后,Bax、Caspase-3蛋白表达水平均有显著降低(P<0.05);而Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。综上所述,BRNP能够改善H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞氧化应激损伤及保护其细胞功能,其作用机制可能与抑制细胞内LDH生成、提高抗氧化酶活性及其凋亡蛋白表达水平有关。

芜菁中性多糖对A549荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的探究芜菁中性多糖对A549小鼠移植瘤模型肿瘤微环境及凋亡相关蛋白、细胞因子水平的影响。方法实验采用酶联免疫法、HE染色法、免疫组化法,检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,caspase-3)、白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素12(interleukin-12,IL-12)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量及B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)相对表达水平,计算免疫器官指数、抑瘤率。结果芜菁中性多糖中、高剂量组能使A549荷瘤小鼠肿瘤组织caspase-3蛋白含量显著增加(P<0.01);使小鼠血清中IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α含量升高(P<0.01);Bcl-2蛋白表达水平降低,Bax蛋白表达水平升高(P<0.01)。结论芜菁中性多糖对人肺腺癌细胞A549生长具有抑制作用,可提高A549荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数,下调Bcl-2蛋白,上调Bax蛋白的表达,减轻荷瘤小鼠脏器病理损伤。

芜菁子挥发油提取物抑菌条件研究

本文通过水蒸气蒸馏法制得芜菁子挥发油提取物,选取鲜切果蔬中常见病原菌单核细胞增生李斯特菌作为供试菌,用芜菁子挥发油提取物在室温25℃条件下对单核细胞增生李斯特菌进行短时间挥发接触抑菌处理后,模拟鲜切果蔬的低温储藏温度、pH值环境进行单核细胞增生李斯特菌培养。以最小抑菌浓度为考察指标,开展单因素试验,并应用培养温度、处理时间、培养基pH值3因素3水平正交试验优化抑菌处理条件。结果表明:在培养温度10℃、处理时间25 min、培养基pH值5的条件下,芜菁子挥发油提取物对单核细胞增生李斯特菌的最小抑菌浓度为0.0056%,且抑菌空间内感官评价为极轻微异味、不刺鼻、不刺眼,比常规试验的最小抑菌浓度降低了65.85%,抑菌效果得到提升,抑菌空间内的异味减少。该抑菌处理条件稳定、合理、可行,可为芜菁子挥发油提取物的综合利用提供参考。

芜菁多糖除蛋白及抑制RAW264.7巨噬细胞焦亡作用研究

目的 考察芜菁多糖两种方法除蛋白效果,并探讨其对RAW264.7巨噬细胞焦亡的抑制作用。方法 采用AB-8大孔吸附树脂法、Savage法去除蛋白,苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)及三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)建立细胞焦亡模型,细胞毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)检测芜菁多糖对RAW264.7细胞增殖率的影响,免疫印迹实验(Western-Blot,WB)检测消皮素D (gasdermin D,GSDMD)相对表达量,酶联免疫吸附测定法检测白细胞介素-18 (interleukin18,IL-18)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-6水平。结果 AB-8大孔吸附树脂除蛋白,多糖保留率为85.9%,蛋白去除率为91.0%;Savage法多糖保留率为77.6%,蛋白去除率为72.8%,精密度、稳定性、重复性和加样回收率的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于2.0%。与模型组相比,芜菁多糖各剂量能显著下调GSDMD的表达(P<0.05),减少LPS/ATP诱导的RAW264.7细胞炎性因子IL-18、IL-1β、TNF-α、IL-6的释放(P<0.05)。结论 AB-8大孔吸附树脂法较Savage法,蛋白去除率及多糖保留率更高;芜菁多糖对LPS/ATP诱导的RAW264.7细胞焦亡具有抑制作用,能在一定程度上减轻细胞损伤,这可能与其抑制LPS/ATP诱导焦亡过程中的炎性反应和调控GSDMD蛋白的表达有关。

芜菁BrrLOX 7基因克隆、表达及生物信息学分析

脂氧合酶(lipoxygenase,EC 1.13.11.12;简称LOX),是一类由非血红素铁组成的脂肪酸双加氧酶,在植物的生长发育和环境胁迫响应中发挥着重要作用,本研究以4片真叶期芜菁幼苗为材料,利用同源克隆技术从芜菁中克隆BrrLOX 7基因。利用生物信息学方法分析BrrLOX 7基因序列。使用荧光定量PCR技术分析非生物胁迫下BrrLOX 7基因表达模式。结果显示,克隆的BrrLOX 7基因CDS长度为2715 bp,编码904个氨基酸,编码的蛋白质分子量为103.10 ku,无跨膜结构和信号肽。亚细胞定位预测显示,该基因编码的蛋白位于叶绿体中,该蛋白与白菜和萝卜的序列同源性和遗传距离最近。不同胁迫下的表达模式显示,BrrLOX 7基因参与对4种胁迫(盐胁迫、冷胁迫、热胁迫、干旱胁迫)的响应。研究结果将为BrrLOX 7基因的功能研究奠定基础。

芜菁的化学成分和生物活性研究进展

芜菁主要含有黄酮类、苯丙素类、多糖类等成分,药理研究表明其粗提物或纯化合物具有抗缺氧、抗氧化、抗肿瘤和保肝等多种药理活性。本文通过检索中国知网、PubMed等数据库,对近20年国内外有关芜菁化学成分及其药理活性的最新研究进展进行综述,以期为芜菁植物资源的合理开发和利用提供参考。

基于转录组序列的芜菁SSR标记开发及应用

为了研究芜菁(Brassica rapa L.)种质资源的多样性水平,本研究采用转录组测序的方法挖掘芜菁的SSR分子标记。结果表明:转录组测序分析共获得了253720条unigene,其中13247条unigene序列中含有2个或2个以上SSR位点,SSR的发生频率为25.05%,平均每3.15 kb出现1个SSR,分布频率为31.42%。30对引物最终均获得了多态性高、条带清晰的结果,共扩增出多态性条带有126条,平均每对引物扩增出4.2条,平均多态率100%。根据电泳检测扩增结果,最终得到24对多态性高、条带清晰的芜菁SSR引物,24对SSR引物在50份芜菁材料中共扩增获得了101个等位基因,平均每个位点等位基因数4.21个,分析显示,平均有效等位基因数(Ne)为1.4817个,有效等位变异率为35.19%,这些结果表明,筛选出的引物能较好地表现50份芜菁的遗传多样性,同时对于更多芜菁品种的DNA指纹图谱构建和杂交种鉴定均具有重要意义。

干旱胁迫对不同抗旱类型芜菁苗期生理特性的影响

以干旱敏感型芜菁(WJC106)和抗旱型芜菁(WJC129)为试验材料,采用盆栽自然干旱方法,研究干旱胁迫对不同抗旱类型芜菁苗期丙二醛含量、相对电导率、抗氧化酶活性、渗透调节物质、光合荧光以及叶片气孔形态特征的影响。结果表明:干旱胁迫显著增加芜菁苗期丙二醛含量和相对电导率,WJC106的增幅分别为59.71%和27.05%,WJC129分别为54.52%和20.06%,其细胞膜受损程度较大。WJC129有较强的调节能力,在干旱胁迫下其抗氧化酶活性和渗透调节物质的含量显著高于WJC106。干旱胁迫下WJC106和WJC129脯氨酸增幅分别为85.22%和88.97%,可溶性蛋白增幅分别为32.51%和58.26%,脯氨酸和可溶性蛋白起主要渗透调节作用。干旱胁迫除对芜菁有效光量子产量影响不明显之外,对叶绿素含量、光合及荧光参数均造成负面影响,其中WJC106受影响较大,WUE下降了71.5%,而WJC129光合及荧光各项指标相对比较稳定,WUE反而增加了18.2%。干旱胁迫使两个不同抗旱类型的芜菁苗期叶片气孔变小,保卫细胞变薄,气孔开度和气孔张开率显著减小。在干旱胁迫下,抗旱型芜菁的气孔开度、气孔张开率和气孔保卫细胞厚度著大于干旱敏感型,仍能维持较高的光合作用。WJC129抗旱型芜菁叶片表面有蜡质层覆盖,使其抗旱性增加。

芜菁苗期抗旱性鉴定及抗旱指标的评价

为了探究不同芜菁品种苗期的抗旱性,筛选抗旱的优质种质,以42份芜菁为试材,采用盆栽和自然干旱的方法,测定其苗期的株高、茎粗、叶面积、根冠比、丙二醛、可溶性蛋白、可溶性糖、脯氨酸、抗旱指数和恢复指数等指标,结合抗旱系数、主成分分析、加权隶属函数和回归分析等方法对芜菁苗期抗旱性进行综合评价。结果表明:干旱胁迫使芜菁苗期的株高、茎粗、叶面积和根冠比显著降低,同时使其可溶性糖、可溶性蛋白、丙二醛和脯氨酸显著升高;茎粗、根冠比、丙二醛和脯氨酸可作为芜菁苗期抗旱性的主要鉴定指标;并初步建立了预测芜菁苗期抗旱性的回归方程;筛选出5个苗期抗旱型品种,27个苗期中度抗旱型品种和12个苗期干旱敏感型品种,其中W29来自新疆的‘恰玛古’抗旱性最好。

芜菁酸性多糖结构及对脂多糖诱导肺损伤小鼠的保护作用

目的:研究芜菁酸性多糖(Brassica rapa L.acidic polysachharide-1,BRAP-1)的结构及其对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠肺损伤的影响及其机制。方法:采用苯酚硫酸法、间羟基联苯法、考马斯亮蓝法、高效凝胶渗透色谱、傅里叶变换红外光谱、气相色谱-质谱法对BRAP-1化学组成、分子质量、结构及单糖组成进行分析。动物实验正常组、模型组小鼠灌胃0.5 mL/d生理盐水,BRAP-1低、中、高剂量组分别灌胃50、100、200 mg/(kg mb·d),持续10 d,采用LPS气管滴注法建立肺损伤模型,检测相关指标,包括肺湿质量/干质量比值、肺泡灌洗液蛋白质量浓度、总细胞数,并进行苏木精-伊红染色;采用酶联免疫吸附测试法测定各组小鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-10、干扰素γ水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测肺组织中肿瘤坏死因子受体、Toll样受体4、核转录因子-κB p65(nuclear factor kappa B p65,NF-κB p65)、IL-1β、NOD样受体3(NOD-like receptor 3,NLRP3)基因m RNA表达水平。结果:与模型组相比,BRAP-1对肺损伤小鼠肺组织水肿、肺泡浸润、蛋白渗出、细胞因子过度释放等病理学改变有缓解作用;并显著降低NF-κB/NLRP3通路关键基因mRNA表达水平。结论:BRAP-1对LPS诱导的小鼠肺损伤具有显著保护作用,其机制可能是调节NF-κB/NLRP3信号通路。

特色蔬菜芜菁种质资源与遗传育种研究进展

芜菁为药食饲同源的根菜类蔬菜,具有较高的利用价值。本文从芜菁的种质资源、育种研究、离体再生体系以及分子研究进展对现有的研究结果进行了阐述,以期为芜菁的种质资源筛选及品种选育等研究提供依据,促进芜菁产业发展。

紫花苜蓿-花溪芜菁甘蓝-辣椒粮草间作种植模式的经济效益及其栽培技术要点

为提高土地复种指数,增加农民收入,于2021—2022年开展紫花苜蓿-花溪芜菁甘蓝-辣椒粮草间作种植模式,分析该种植模式的经济效益。该种植模式全年合计纯收入为4995.23元/667m2元,经济效益显著。为紫花苜蓿-花溪芜菁甘蓝-辣椒粮草间作种植模式的推广提供参考,介绍在该间作模式下紫花苜蓿、花溪芜菁甘蓝、辣椒的栽培技术要点。

芜菁子油脂微波提取工艺及其脂肪酸和生物活性研究

以芜菁子为原料,通过微波提取和索氏提取芜菁子油脂,并研究2种方法提取的芜菁子油脂的脂肪酸和生物活性。结果表明:当微波功率204 W、料液比1∶9(g/mL)、提取时间16 min时,微波提取的芜菁子油脂(BSO-M)的得率为29.92%。BSO-M中不饱和脂肪酸含量为87.17%,索氏提取的芜菁子油脂(BSO-S)中不饱和脂肪酸含量为98.58%;BSO-M的降糖能力明显高于BSO-S,而BSO-S具有较强的抗氧化能力。

威宁芜菁甘蓝不同比例替代黄贮玉米秸对威宁牛生长、消化性能及血清生化指标的影响

试验旨在探讨威宁芜菁甘蓝不同比例替代黄贮玉米秸秆对威宁牛生长、消化性能及血清生化指标的影响。选取体重(261.32±20.56)kg威宁牛公牛32头,随机分为4组,分别用0(对照组)、10%(试验Ⅰ组)、20%(试验Ⅱ组)和30%(试验Ⅲ组)威宁芜菁甘蓝替代黄贮玉米秸,进行为期90 d的饲养试验,其中预试期为10 d,正试期为80 d。正试期内测定威宁牛平均日增重、料重比并计算经济效益;正式期最后5 d,采用全收粪法测定干物质表观消化率;试验结束后的第1天,采集血液测定血清生化指标。结果表明:平均日增重试验Ⅱ组显著高于对照组及试验Ⅰ组(P<0.05),与试验Ⅲ组差异不显著(P>0.05);料重比对照组显著高于试验Ⅱ组和试验Ⅲ组(P<0.05),与试验Ⅰ组差异不显著(P>0.05);干物质采食量试验Ⅱ组显著高于对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅲ组(P<0.05);干物质表观消化率试验Ⅱ组和试验Ⅲ组显著高于对照组及试验Ⅰ组(P<0.05);经济效益日盈利,对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅲ组分别比试验Ⅱ组低29.51%、19.55%和24.23%。根据试验结果得出,威宁芜菁甘蓝替代黄贮玉米秸20%组日粮干物质采食量、日增重、干物质表观消化率及日盈利最高,同时降低了料重比。