芜菁多糖铁配合物的合成工艺研究

目的研究芜菁多糖铁(Ⅲ)[BP-Fe(Ⅲ)]配合物的合成工艺。方法以三氯化铁和芜菁多糖为反应物,合成一种芜菁多糖铁(Ⅲ)配合物;采用单因素法系统研究pH、反应时间、温度、枸橼酸钠与多糖质量比4个因素对BP-Fe(Ⅲ)配合物合成量的影响;采用正交实验筛选BP-Fe(Ⅲ)配合物的最优合成工艺;采用UV法测定BP-Fe(Ⅲ)配合物中的铁含量,进行铁离子特征反应实验;对BP-Fe(Ⅲ)配合物和芜菁多糖进行红外光谱表征。结果正交实验结果显示BP-Fe(Ⅲ)配合物的最优合成工艺条件为枸橼酸钠和芜菁多糖质量比2∶1,反应时间180 min,反应液pH=6,反应温度60℃,该条件下铁含量为4.53%,对BP-Fe(Ⅲ)配合物中铁含量影响顺序为:枸橼酸钠和多糖质量比(A)>反应液pH值(B)>反应时间(C)>反应温度(D);铁离子特征反应实验结果表明芜菁多糖与铁络合成稳定的配合物;红外光谱图显示芜菁多糖与铁形成的稳定配合物基本结构无较大变化。结论本方法操作简单,成本低,适用于多糖铁配合物的合成。

芜菁中性多糖对PC12细胞氧化损伤保护作用机制的初步研究

以H_(2)O_(2)诱导PC12细胞建立氧化损伤模型,研究芜菁中性多糖(neutral polysaccharide from Brassica rapa L.,BRNP)对PC12细胞氧化损伤保护及初步作用机制。采用CCK-8法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶(LDH)检测H_(2)O_(2)对PC12细胞氧化损伤的保护作用;JC-1法检测BRNP对H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞线粒体膜电位的影响;Western blot法检测BRNP对H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平。结果表明,BRNP对PC12细胞无明显细胞毒性;H_(2)O_(2)的造模浓度和时间分别为300μmol/L、4 h;BRNP在一定程度上可减轻H_(2)O_(2)对PC12细胞的氧化损伤;BRNP可降低H_(2)O_(2)对PC12细胞线粒体膜电位的损伤;以不同剂量BRNP干预PC12细胞后,Bax、Caspase-3蛋白表达水平均有显著降低(P<0.05);而Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。综上所述,BRNP能够改善H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞氧化应激损伤及保护其细胞功能,其作用机制可能与抑制细胞内LDH生成、提高抗氧化酶活性及其凋亡蛋白表达水平有关。

芜菁酸性多糖结构及对脂多糖诱导肺损伤小鼠的保护作用

目的:研究芜菁酸性多糖(Brassica rapa L.acidic polysachharide-1,BRAP-1)的结构及其对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠肺损伤的影响及其机制。方法:采用苯酚硫酸法、间羟基联苯法、考马斯亮蓝法、高效凝胶渗透色谱、傅里叶变换红外光谱、气相色谱-质谱法对BRAP-1化学组成、分子质量、结构及单糖组成进行分析。动物实验正常组、模型组小鼠灌胃0.5 mL/d生理盐水,BRAP-1低、中、高剂量组分别灌胃50、100、200 mg/(kg mb·d),持续10 d,采用LPS气管滴注法建立肺损伤模型,检测相关指标,包括肺湿质量/干质量比值、肺泡灌洗液蛋白质量浓度、总细胞数,并进行苏木精-伊红染色;采用酶联免疫吸附测试法测定各组小鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-10、干扰素γ水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测肺组织中肿瘤坏死因子受体、Toll样受体4、核转录因子-κB p65(nuclear factor kappa B p65,NF-κB p65)、IL-1β、NOD样受体3(NOD-like receptor 3,NLRP3)基因m RNA表达水平。结果:与模型组相比,BRAP-1对肺损伤小鼠肺组织水肿、肺泡浸润、蛋白渗出、细胞因子过度释放等病理学改变有缓解作用;并显著降低NF-κB/NLRP3通路关键基因mRNA表达水平。结论:BRAP-1对LPS诱导的小鼠肺损伤具有显著保护作用,其机制可能是调节NF-κB/NLRP3信号通路。

芜菁酸性多糖BRAP-2体内抗Lewis肺癌活性研究

目的评价芜菁多糖的急性毒性并研究芜菁酸性多糖BRAP-2(Brassica rapa L.acide polysaccharide-2)体内抗Lewis肺癌(Lewis lung cancer,LLC)活性.方法通过急行毒性实验、半数致死量(median lethal dose)测定和最大耐受量(maximal tolerable dose,MTD)实验来评价芜菁多糖的急性毒性;采用CCK-8法检测Lewis肺癌细胞的生长曲线;通过计算Lewis肺癌小鼠肿瘤体积、抑瘤率及有效体质量来研究芜菁酸性多糖BRAP-2抗Lewis肺癌活性.结果芜菁多糖的MTD为28 g/kg·d,毒性作用低;LLC细胞在培养的前4d进入对数生长期,结果具有统计学意义(P<0.01);与模型组比,芜菁酸性多糖BRAP-2各剂量组和DDP组的瘤重均显著降低,抑瘤率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),芜菁酸性多糖BRAP-2高、中、低剂量组和DDP组抑瘤率分别为51.45%、46.57%、19.53%和76.83%,造模前和造模给药后各实验小鼠体质质量发生不同程度的变化,差异均有统计学意义(P<0.05).结论芜菁多糖毒性作用低;Lewis肺癌细胞培养的第4d可作为传代、冻存和制造LLC肺癌模型的最佳时间段;可推测芜菁酸性多糖BRAP-2体内具有较好的抑瘤活性,同时多糖类成分因具有提高机体免疫力和抗肿瘤,低毒、高效、安全、副作用小等特点临床上可作为优选的抗肿瘤药.

7,8-二羟基黄酮纳米粒子通过保护卵巢储备缓解代谢综合征

以芜菁多糖构建的7,8-二羟基黄酮(7,8-DHF)纳米粒子对两种不同膳食模式(高脂和低脂)饲养的C57BL/6J雌性小鼠进行24周的干预,采用分子生物学方法对代谢综合征(MetS)各项指标、炎症因子及卵巢储备功能进行了测定,探究了其对小鼠MetS的改善作用和机制。结果表明,7,8-DHF及其纳米粒子均可有效缓解小鼠MetS的症状,可显著降低高脂膳食(HFD)诱导的小鼠体重过度增长,与HFD对照组相比,7,8-DHF及7,8-DHF纳米粒子组体重分别下降了8.5%和16.4%;可显著改善血脂、血糖及血胰岛素水平、小鼠的葡萄糖耐受性和胰岛素敏感性;能够显著降低血清中循环脂多糖、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)等炎症相关指标;可以有效保护小鼠卵巢储备功能,维持其正常的动情周期和血清雌二醇、卵泡刺激素的水平稳态。7,8-DHF纳米粒子对MetS各项指标的干预效果显著优于单独的7,8-DHF。7,8-DHF及其纳米粒子对雌性小鼠MetS的干预作用可能是通过缓解肠道菌群介导的全身炎症并作用于对卵巢储备功能的保护而实现的。

芜菁中性多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用

目的:研究芜菁中性多糖(Brassica rapa L.neutral polysaccharides,BRNP)对D-半乳糖致衰老小鼠模型的抗氧化作用。方法:昆明小鼠随机分为空白组、模型组、VE对照组和BRNP高、中、低剂量组,连续灌胃42 d后摘眼球取血测定各组小鼠血清以及全脑、肝脏匀浆中的超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、还原性谷脱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量,采用HE染色观察肝组织病理学改变。结果:与空白组相比,模型组血清、全脑及肝脏匀浆中SOD、T-AOC、CAT、GSH、GSH-Px水平明显下降,而MDA水平显著上升;药物干预组与模型组相比,显著提高血清以及全脑、肝脏匀浆中的SOD、T-AOC、CAT、GSH、GSH-Px的活性,并显著降低MDA含量;HE染色发现BRNP对衰老小鼠肝脏组织具有一定的保护作用。结论:BRNP能有效提高D-半乳糖致衰老小鼠模型抗氧化能力,达到延缓衰老的作用。