芜菁酸性多糖对肺损伤小鼠过氧化损伤及细胞凋亡的影响

研究芜菁酸性多糖(Brassica rapa L.acidic polysachharide-1,BRAP-1)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肺损伤小鼠的保护作用及机制。建立LPS诱导肺损伤小鼠模型进行BRAP-1干预,通过生化试剂检测小鼠肺泡灌洗液中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢(H_(2)O_(2))水平;Western blot法检测肺组织中蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase,PI3K)、细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)、磷酸化蛋白激酶B(phospho-protein kinase B,p-AKT)蛋白表达水平及与凋亡相关的B淋巴细胞瘤-2样蛋白关联X蛋白(B-cell lymphoma-2-associated X protein,BAX)、半胱氨酸蛋白酶-3(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2样蛋白(B-cell lymphoma-2,BCL-2)表达水平。结果表明与模型组相比,BRAP-1不同程度降低小鼠肺泡灌洗液中MDA、MPO、H_(2)O_(2)及肺组织中PI3K、AKT蛋白表达水平以及凋亡因子BAX、凋亡关键因子Cleaved Caspase-3蛋白表达水平,增强抗凋亡因子BCL-2蛋白表达水平。研究表明,BRAP-1可通过清除肺损伤小鼠的肺组织自由基、抑制氧化应激,调节肺组织细胞凋亡,从而起到保护作用。

芜菁酸性多糖BRAP-2体内抗Lewis肺癌活性研究

目的评价芜菁多糖的急性毒性并研究芜菁酸性多糖BRAP-2(Brassica rapa L.acide polysaccharide-2)体内抗Lewis肺癌(Lewis lung cancer,LLC)活性.方法通过急行毒性实验、半数致死量(median lethal dose)测定和最大耐受量(maximal tolerable dose,MTD)实验来评价芜菁多糖的急性毒性;采用CCK-8法检测Lewis肺癌细胞的生长曲线;通过计算Lewis肺癌小鼠肿瘤体积、抑瘤率及有效体质量来研究芜菁酸性多糖BRAP-2抗Lewis肺癌活性.结果芜菁多糖的MTD为28 g/kg·d,毒性作用低;LLC细胞在培养的前4d进入对数生长期,结果具有统计学意义(P<0.01);与模型组比,芜菁酸性多糖BRAP-2各剂量组和DDP组的瘤重均显著降低,抑瘤率明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),芜菁酸性多糖BRAP-2高、中、低剂量组和DDP组抑瘤率分别为51.45%、46.57%、19.53%和76.83%,造模前和造模给药后各实验小鼠体质质量发生不同程度的变化,差异均有统计学意义(P<0.05).结论芜菁多糖毒性作用低;Lewis肺癌细胞培养的第4d可作为传代、冻存和制造LLC肺癌模型的最佳时间段;可推测芜菁酸性多糖BRAP-2体内具有较好的抑瘤活性,同时多糖类成分因具有提高机体免疫力和抗肿瘤,低毒、高效、安全、副作用小等特点临床上可作为优选的抗肿瘤药.

芜菁酸性多糖结构及对脂多糖诱导肺损伤小鼠的保护作用

目的:研究芜菁酸性多糖(Brassica rapa L.acidic polysachharide-1,BRAP-1)的结构及其对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠肺损伤的影响及其机制。方法:采用苯酚硫酸法、间羟基联苯法、考马斯亮蓝法、高效凝胶渗透色谱、傅里叶变换红外光谱、气相色谱-质谱法对BRAP-1化学组成、分子质量、结构及单糖组成进行分析。动物实验正常组、模型组小鼠灌胃0.5 mL/d生理盐水,BRAP-1低、中、高剂量组分别灌胃50、100、200 mg/(kg mb·d),持续10 d,采用LPS气管滴注法建立肺损伤模型,检测相关指标,包括肺湿质量/干质量比值、肺泡灌洗液蛋白质量浓度、总细胞数,并进行苏木精-伊红染色;采用酶联免疫吸附测试法测定各组小鼠血清肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-10、干扰素γ水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测肺组织中肿瘤坏死因子受体、Toll样受体4、核转录因子-κB p65(nuclear factor kappa B p65,NF-κB p65)、IL-1β、NOD样受体3(NOD-like receptor 3,NLRP3)基因m RNA表达水平。结果:与模型组相比,BRAP-1对肺损伤小鼠肺组织水肿、肺泡浸润、蛋白渗出、细胞因子过度释放等病理学改变有缓解作用;并显著降低NF-κB/NLRP3通路关键基因mRNA表达水平。结论:BRAP-1对LPS诱导的小鼠肺损伤具有显著保护作用,其机制可能是调节NF-κB/NLRP3信号通路。