复方芪丹方对高血压和糖尿病导致射血分数保留心力衰竭模型大鼠心脏功能及糖脂代谢的影响

目的观察复方芪丹方对高血压和糖尿病致射血分数保留心力衰竭(HFpEF)模型大鼠心脏功能及糖脂代谢的影响。方法选择SPF级14周龄自发性高血压大鼠(SHR),持续高脂高糖饲料喂养16周,高脂高糖饲料喂养2周后腹腔注射1%链脲佐菌素(25 mg/kg)复制高血压、糖尿病致HFpEF大鼠模型。将大鼠按随机数字表法分为HFpEF模型组、阳性药物对照组〔沙库巴曲缬沙坦钠(诺欣妥)组,给予诺欣妥18 mg/kg〕、复方芪丹方低剂量组(芪丹低剂量组,给予复方芪丹方含生药4.90 g/kg)、复方芪丹方高剂量组(芪丹高剂量组,给予复方芪丹方含生药9.80 g/kg);另设SHR模型组(SHR组,给予等体积纯净水)和正常对照组〔Wistar-Kyoto(WKY)组,给予等体积纯净水〕。灌胃8周后采用超声评估大鼠心脏功能;心脏超声结束后,腹主动脉取血,分离血浆和血清,检测空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)水平和糖化血清蛋白(GSP)、胰岛素(FINS)、瘦素(LEP)、胰高血糖素(GCG)、C肽,以及血浆心钠素(ANP)和脑钠肽(BNP)水平;同时取心脏组织行苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察心肌组织病理学变化。结果与WKY组比较,HFpEF模型组舒张早期二尖瓣血流峰值速度(E)、二尖瓣心房收缩期最大血流(A)、E/舒张早期二尖瓣环心肌运动速度(e')比值、ANP、BNP、TC、TG、LDL-C、FPG、GSP、C肽、GCG、LEP、FINS、IRI水平均明显升高,e'、左房射血分数(LAEF)、胰岛素敏感指数(ISI)自然对数(IAI)均明显降低(均P<0.05);与HFpEF模型组比较,芪丹低、高剂量组E、A、E/e'比值、TC、FPG、C肽、GCG、LEP、FINS、IRI水平均明显降低〔E(m/s):0.78±0.13、0.81±0.15比1.02±0.15,A(m/s):0.46±0.06、0.43±0.04比0.67±0.07,E/e'比值:15.34±4.58、15.01±3.56比24.47±6.38,TC(mmol/L):3.16±1.00、2.40±0.69比4.61±0.73,FPG(mmol/L):13.92±1.80、12.65±2.13比17.05±3.44,C肽(μg/L):1.84±0.42、1.46±0.42比2.75±0.70,GCG(ng/L):132.79±28.69、122.33±31.47比161.23±21.43,LEP(μg/L):5.77±1.82、5.37±1.02比9.30±1.42,FINS(pmol/L):104.13±27.65、83.57±32.62比133.10±32.78,IRI:10.85±3.87、7.73±3.16比17.19±5.80,均P<0.05〕,e'和IAI明显升高〔e'(m/s):5.20±0.52、5.53±0.70比4.30±0.62,IAI:-5.45±0.34、-5.07±0.48比-5.88±0.45,均P<0.05〕,芪丹高剂量组LAEF、左室射血分数(LVEF)均显著升高(LAEF:0.52±0.05比0.46±0.06,LVEF:0.82±0.05比0.75±0.08),ANP、BNP含量和LDL-C水平显著降低〔ANP(μg/L):0.48±0.16比0.70±0.11,BNP(ng/L):15.87±4.18比21.08±3.23,LDL-C(mmol/L):1.33±0.72比2.47±0.86,均P<0.05〕。HE染色显示,复方芪丹方可显著改善心肌细胞形态。结论复方芪丹方可改善高血压、糖尿病致HFpEF模型大鼠的糖脂代谢,增加胰岛素敏感性,降低心房内压及心室压力,改善心肌病理形态和心脏舒张功能。

芪丹方主成分抑制肝星状细胞增殖及最佳配伍剂量

目的:对芪丹方中的主成分丹酚酸B(Sal B)、丹参酮ⅡA(TSN)、白藜芦醇(Res)、黄芪甲苷(AsA)和甘草次酸(GA)进行配伍研究,以确定芪丹方最佳有效成分之间的配伍比例。方法:采用甲基噻唑基二苯基四唑溴化铵(MTT)法观察不同药物对肝星状细胞(HSC)增殖的抑制作用,单因素法筛选抗肝纤维化的最佳浓度;在单因素试验的基础上,采用响应面法筛选抗肝纤维化的处方。结果:确定最佳配伍为TSN∶Sal B∶AsA=5.57∶5.96∶5.55(摩尔比),对HSC增殖的抑制率可达97.45%;各组分单独给药则显示Sal B、TSN、AsA和GA对HSC增殖的抑制能力较强,Res的抑制能力较弱,且TSN、Sal B和AsA的浓度与抑制率有较大的联系;TSN的抑制效果最好,抑制率为24.19%。结论:Sal B、TSN、Res、AsA和GA单独给药均可抑制HSC的增殖,并呈浓度依赖性。联合用药时,TSN、Sal B和AsA对HSC增殖的抑制作用明显增强。

芪丹方对5/6肾切除所致慢性肾衰竭大鼠的保护作用及机制

目的研究芪丹方对5/6肾切除所致慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾脏的保护作用及机制。方法 50只SD大鼠随机分为5组:假手术组,模型组,卡托普利组(5 mg·kg-1),芪丹方高、低剂量组(12.34,6.17 g·kg-1),每组10只。采用5/6肾切除法制备CRF大鼠模型。考马斯亮蓝法检测24 h尿蛋白;检测血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)的含量;HE染色观察大鼠肾脏组织病理学改变;流式细胞小球微阵列术(CBA)检测血清炎症因子白细胞介素-1α(IL-1α)、白细胞介素-2(IL-2)的含量;免疫组化法检测肾脏组织CD68的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白及血清BUN、Scr、IL-1α、IL-2含量显著升高(P<0.05,P<0.01),肾组织CD68阳性表达显著增加(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠的24 h尿蛋白,血清Scr、IL-1α、IL-2含量,及肾组织CD68阳性表达均显著降低(P<0.05,P<0.01),芪丹方高剂量组的血清BUN显著降低(P<0.05)。结论芪丹方能有效改善CRF大鼠肾功能,减轻肾脏病理改变,其作用机制可能与通过减少肾脏巨噬细胞的浸润,下调IL-1α、IL-2等细胞因子表达相关。

UPLC法同时测定芪丹方中9种主要有效成分

目的:建立同时测定芪丹方中9种有效成分黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、丹酚酸B、丹参酮ⅡA、白藜芦醇、大黄素、阿魏酸、藁本内酯、甘草次酸含量的方法。方法:采用UPLC系统,UPLC ACQUITY HSS T3色谱柱;0.5%甲酸溶液(A)-乙腈(B)为流动相,体积流量0.4 m L·min^(-1),梯度洗脱:0~4 min,77%~83%A,4~7.5 min,46%~77%A,7.5~12.5 min,0%~46%A;检测波长:201 nm,256 nm,275 nm,324 nm。结果:建立的方法在12.5 min内可完成一次色谱分析,9种成分均有较好的分离度,方法精密度、重复性的RSD均<2.0%,各成分具有较好的线性关系(R>0.999 6);回收率96.15%~98.33%,RSD<2.0%。结论:该方法快捷、准确、重复性好,能同时测定芪丹方中9种主要有效成分的含量,可较全面地控制芪丹方的质量。

甲钴胺联合复方芪丹方治疗糖尿病周围神经病变48例临床观察

目的:观察甲钴胺联合复方芪丹方对糖尿病周围神经病变(DPN)的疗效及对氧化应激反应的影响。方法:选取DPN患者96例为研究对象,随机分为对照组和观察组各48例。两组均予DPN常规治疗,对照组予甲钴胺片口服治疗;观察组在对照组基础上予复方芪丹方口服治疗,两组均连续观察12周。评价并比较两组治疗前后感觉功能、神经症状及神经反射功能。测量双侧腓肠神经感觉传导速度(SNCV)及腓总神经运动传导速度(MNCV)。检测两组超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的水平。同时比较治疗后两组临床疗效。结果:观察组临床总有效率83.3%,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后感觉功能、神经症状及神经反射评分较对照组显著降低(P<0.05),腓肠神经SNCV、腓总神经MNCV较对照组显著升高(P<0.05)。观察组治疗后MDA血清水平显著低于对照组(P<0.05),而其SOD、GSH-Px血清水平则显著高于对照组(P<0.05)。结论:甲钴胺联合复方芪丹方治疗能有效改善DPN患者临床症状,改善神经传导异常状态,提高神经传导速度,其机制可能与抑制患者机体内氧化应激反应有关。

克敏芪丹方总黄酮苷的大孔树脂纯化工艺优选

目的:筛选适合分离纯化克敏芪丹方中总黄酮苷的大孔吸附树脂并优选其纯化工艺参数。方法:以总黄酮苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的比吸附量、洗脱率为指标,考察D101,AB-8,S-8型大孔吸附树脂对有效成分含量的影响,通过单因素试验考察上样液浓度、上样量及乙醇用量对克敏芪丹方中总黄酮苷大孔树脂纯化工艺的影响。采用HPLC测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量,检测波长260 nm;采用UV测定总黄酮苷含量,检测波长509 nm。结果:药液浓缩至相对密度约1.05(60℃),加水稀释至0.5 g·m L^(-1),通过径高比1∶6的AB-8型大孔树脂柱,加1 BV水洗除杂,上样吸附和除杂流速均为2 BV·h^(-1),上样量为每1 g树脂上1.5倍生药量药液;加70%乙醇4 BV洗脱,洗脱流速4 BV·h^(-1),收集洗脱液。总黄酮苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的转移率分别为78.22%,43.81%。结论:该纯化工艺合理、稳定,可推广于克敏芪丹方的大生产应用。