芪归银复方化学成分研究进展

芪归银复方由黄芪、当归、金银花、青蒿、虎杖5味药组成,不仅能够配合抗生素治疗耐药菌,而且能延缓、甚至逆转细菌耐药性的产生,但是该复方化学成分复杂,尚未明确其治病的物质基础。因此,通过查阅文献,对该方中5种单味药中的化学成分进行总结,并对其中所含的170种化学成分进行归类,以期为芪归银复方中化学成分研究提供依据,最终明确其延缓耐药的物质基础。

芪归银颗粒通过影响脓毒症急性肾损伤大鼠的炎症反应及自噬影响肾功能

目的通过观察芪归银颗粒干预下,脓毒症急性肾损伤大鼠的自噬和炎症反应的变化,明确芪归银颗粒对脓毒症急性肾损伤大鼠肾功能的影响与炎症反应和自噬之间的关系。方法应用SD大鼠盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)建立脓毒症模型,诱导大鼠发生急性肾损伤(acute kidney injury,AKI),实验分为3组:假手术组,CLP组,CLP+芪归银组,每组包括6只大鼠,每组分别在监测时间点测量以下指标:①循环指标:血压;②肾功能损伤指标:血清肌酐(Scr),胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)、组织基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP2);③炎症指标:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、TOLL样受体4(TLR4)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK);④自噬指标:LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ。采用SPSS 19.0软件完成统计分析,各组均数需经方差齐性检验为方差齐后,再进行多组均数ANOVA检验。结果CLP组和CLP+芪归银组大鼠血压12 h开始降低,而假手术组无明显变化。CLP组和CLP+芪归银组之间血压差异无统计学意义。CLP组和CLP+芪归银组Scr从12 h开始升高,且与假手术组差异有统计学意义。24 h后CLP+芪归银组比CLP组Scr水平降低。IGFBP-7与TIMP-2乘积CLP组3 h后开始明显升高,而CLP+芪归银组与CLP组比较明显降低。CLP组和CLP+芪归银组TNF-α在3 h、6 h、12 h、24 h和48 h均较0 h升高;CLP组和CLP+芪归银组TNF-α在3 h、6 h、12 h、24 h和48 h均较假手术组升高;3 h、6 h、12 h、24 h和48 h CLP+芪归银组比CLP组降低。CLP组TLR4在6 h、12 h和24 h均较假手术组升高。而CLP+芪归银组在6 h与假手术组比较差异无统计学意义,而与CLP组差异有统计学意义。CLP组MAPK与假手术组比较,6 h、12 h和24 h均有升高,CLP+芪归银组比CLP组降低。CLP组较假手术组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高;在12 h和24 h,CLP+芪归银组较CLP组降低。结论芪归银能够改善脓毒症AKI。脓毒症AKI的变化与炎症反应有关,炎症反应是通过TLR4、MAPK途径来实现的。脓毒症AKI还与循环灌注相关,自噬也是脓毒症AKI的病理生理机制。虽然芪归银并不改善平均动脉压,但是芪归银可以通过抑制炎症反应使自噬减少,使脓毒症AKI得到改善。

基于HPLC-LTQ-Orbitrap MS技术芪归银提取物在ICR小鼠体内入血移行成分的鉴定

目的:分析芪归银提取物灌胃ICR小鼠后的入血成分,探讨芪归银的生物体内效应成分。方法:应用HPLC-ESI-LTQ-Orbitrap技术,通过对比空白血浆、口服芪归银提取物后的血浆以及芪归银提取物的色谱图和质谱碎片离子信息,并结合文献报道和对照品比对,筛选和鉴定小鼠灌胃芪归银提取物后的血中移行成分。结果:在小鼠血浆中筛选出27个药源性成分,并鉴定了其中的21个成分,其中包括原型成分15个,葡萄糖醛酸化和异构化产物6个。结论:芪归银在小鼠体内主要以原型、葡萄糖醛酸化和异构化产物的形式入血;所建立的分析方法简便灵敏,可为阐明芪归银方的药理作用及其机制提供依据。

芪归银颗粒治疗脓毒症急性肾损伤患者的临床研究

目的观察芪归银颗粒治疗脓毒症急性肾损伤的临床疗效,评价芪归银颗粒对脓毒症急性肾损伤(AKI)患者的肾脏保护作用。方法纳入脓毒症急性肾损伤患者60例,随机分为治疗组与对照组各30例,对照组按照指南常规治疗,治疗组在对照组基础上予芪归银颗粒口服(或胃管注入)。记录两组患者治疗前后血尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)、28 d死亡率、ICU平均住院天数、24 h尿量、肾损伤恢复率。结果经治疗,两组患者SCr、BUN均呈下降趋势,治疗组SCr在治疗后第3天下降较对照组明显(P <0.05);两组非连续性肾脏替代治疗(CRRT)患者治疗第3天24 h尿量均呈明显上升(P <0.05),且治疗组提升的尿量高于对照组;两组中需要CRRT的患者尿量没有明显差异(P> 0.05),但治疗组平均进行血滤天数明显低于对照组(P <0.05);治疗7 d后,治疗组较对照组肾损伤恢复率更高(P <0.05)。两组患者ICU住院时间及28 d死亡率均无明显差异(P>0.05)。治疗组在治疗第3天虚实夹杂证患者SCr均明显低于实证和虚证(P <0.05)。结论芪归银颗粒能够降低脓毒症AKI患者的SCr水平,提高肾损伤恢复率,对于需要行CRRT的脓毒症患者,芪归银颗粒能够明显降低其CRRT的时间,较早脱离血液过滤;对于不需要CRRT的脓毒症AKI患者,芪归银颗粒能够较早提高其24 h尿量。但对ICU住院时间及28 d致死率没有影响,无法改善患者的预后。芪归银颗粒治疗不同证型的脓毒症AKI患者存在疗效差异,对降低虚实夹杂证患者的SCr效果最为显著。

芪归银对铜绿假单胞菌致肺炎大鼠免疫调节作用初探

目的:初步探索芪归银对耐药铜绿假单胞菌(PA)致肺炎大鼠的免疫影响,为全面揭示其疗效机制奠定基础。方法:在空白和模型对照基础上,设置芪归银实验组与阿莫西林西药干预对照组。采集各组肺组织,并腹主动脉采血分离血清。检测肺组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的蛋白表达,血清中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度,进一步深入检测肺组织中HMGB1及其受体晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、Toll-样受体4(TLR4)的基因表达。结果:模型组大鼠肺组织HMGB1蛋白及基因表达较对照组均明显升高,芪归银可一定程度降低其蛋白和基因表达;但阿莫西林对HMGB1和受体RAGE、TLR4的基因表达影响更为显著。模型组大鼠血清中IL-1β和TNF-α浓度较对照组均明显升高,芪归银可降低二者浓度,其中,对TNF-α浓度影响较阿莫西林更为显著。结论:肺炎发生时,芪归银对肌体核心免疫网络因子HMGB1及其受体RAGE、TLR4表达均有影响,对重要信号通路效应分子IL-1β和TNF-α也有影响,更深入的疗效机制有待进一步研究揭示。

芪归银治疗脓毒症的临床观察

目的:探讨芪归银治疗脓毒症的临床疗效。方法:选取我院2018年10月—2020年10月收治的61例脓毒症患者,采用随机纸片法分为观察组(31例)和对照组(30例)。对照组采用亚胺培南治疗,观察组采用亚胺培南联合芪归银治疗。比较两组治疗前后C-反应蛋白、降钙素原、血乳酸水平,比较两组临床治疗有效率。结果:治疗后,两组C-反应蛋白、降钙素原、血乳酸均低于治疗前,且观察组C-反应蛋白、降钙素原、血乳酸均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组临床治疗有效率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:芪归银治疗脓毒症可以降低C-反应蛋白、降钙素原、血乳酸水平,提高临床疗效,值得临床推广。

基于靶点网络的芪归银复方与亚胺培南和左氧氟沙星联用对铜绿假单胞菌的作用机制分析

目的:通过芪归银和不同抗生素对铜绿假单胞菌的直接作用的比较分析,发现不同药物作用方式的异同。方法:针对芪归银、亚胺培南和左氧氟沙星3个药物的作用机制进行了差异分析。通过进一步对芪归银特异性靶点群的功能进行富集分析,发现其特异性途径。结果:芪归银复方(金银花中的芦丁、当归中的白桦脂酸、虎杖中的大黄素、青蒿中的青蒿素)通过作用于7个共有的铜绿假单胞菌靶点,与亚胺培南和左氧氟沙星发挥协同抑菌疗效。并发现亚胺培南特异性蛋白16个,左氧氟沙星特异性相关蛋白5个,芪归银特异性相关蛋白222个。通过芪归银特异性相关靶点的功能富集分析,发现其通过影响铜绿假单胞菌的代谢途径和抗生素合成途径,达到抗菌作用,这可能是芪归银复方协同增强其他抗生素作用、降低耐药的重要方面。结论:在靶点层面分析了芪归银复方对缓解抗生素耐药的可能机制,为进一步发现中药抗菌和抗耐药的可能途径提供线索。