基于网络药理学和分子对接技术探讨芪竹方治疗胃癌的分子机制

目的通过网络药理学和分子对接方法分析芪竹方治疗胃癌的作用机制。方法利用中药系统药理学数据库和分析平台筛选芪竹方的活性成分和对应人类靶点,利用GeneCards和DisGeNET数据库鉴定胃癌相关基因,筛选芪竹方治疗胃癌的潜在基因。利用STRING数据库获取蛋白互作数据,DAVID在线工具进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,利用Cytoscape3.9.1软件构建药材-成分-靶点网络、蛋白互作网络及药材-成分-靶点-通路网络并进行拓扑学分析。结果共筛选到芪竹方活性成分118个及其人类靶点245个,数据库鉴定到胃癌相关基因3376个,取交集后得到83个潜在靶点。功能富集分析得到118条相关通路和438条GO项,其主要与癌症相关通路、信号转导相关通路、基因表达调控、细胞凋亡及缺氧反应等有关。网络图拓扑学分析显示排名靠前的6个核心靶点包括AKT1、JUN、CASP3、CCND1、MYC和IL-6,及3个关键活性成分quercetin、lute⁃olin和kaempferol。分子对接结果显示这些核心靶点与活性成分间具有较强的结合能力。结论利用网络药理学和分子对接揭示了芪竹方治疗胃癌的潜在分子机制,为其应用于临床提供了一定的理论依据。

芪竹方改善早期胃癌ESD后症状及预防复发的临床观察

目的观察芪竹方改善早期胃癌胃黏膜剥离术(ESD)后气阴两虚型症状及预防胃癌复发的临床疗效。方法共84例早期胃癌ESD后气阴两虚证患者随机分成2组,其中脱落6例,纳入治疗组39例,对照组39例。对照组给予胃复春治疗,治疗组予芪竹方治疗,持续治疗1 a。观察2组临床复发率、胃镜像糜烂灶、病理积分、中医证候积分及癌胚抗原(CEA)变化。结果治疗后,治疗组在复发率方面低于对照组(5.13%vs.20.51%,P<0.05),治疗组可以较好地减少糜烂灶(P<0.01),降低病理积分及CEA水平(P<0.01),改善临床症状(P<0.01),均优于对照组(P<0.05)。结论芪竹方可以较好地改善临床症状,减少胃黏膜糜烂、肠化生及异型增生,降低复发率,临床疗效显著。

芪竹方对MGC-803细胞VEGFKDR表达影响的研究

目的:了解芪竹方对MGC803细胞血管内皮生长因子VEGF及其受体KDR表达的影响。方法:分成芪竹方高、低浓度、DMSO对照、空白对照4组处理MGC803细胞,运用RT-PCR、免疫荧光法研究VEGF、KDR的表达量。结果:芪竹方高、低浓度、DMSO对照、空白对照4组VEGFmRNA表达量光密度积分分别是:(6.7±2.12)、(9.98±3.27)、(18.99±7.73)、(20.55±4.85),芪竹方高浓度与空白对照组间差别具有显著性;KDRmRNA分别是(49.66±9.76)、(38.22±3.54)、(47.5±5.87)、(45.18±7.25),各组间无显著性差别;VEGF蛋白表达量荧光度值分别是:(24.6±5.5)、(29.4±4.8)、(43.2±7.4)、(40.4±3.2),芪竹方高浓度与空白对照组间差别具有显著性;KDR蛋白表达量荧光度值分别是:(32.2±8.6)、(35.4±8.3)、(37.4±11.3)、(27.4±4.7),各组间无显著性差别。结论:芪竹方对MGC803细胞VEGF表达具有下调作用,对KDR表达无明显影响。芪竹方抑制胃癌的作用可能与抑制VEGF表达有关。

单兆伟教授自拟芪竹方加减治疗胃癌术后气阴两虚

癌肿形成之时可用攻消之法。然术后正气创伤,出现新的本虚标实之证,患者胃痛隐隐,究其缘由,乃因虚致实,则治疗不离开扶正驱邪之原则。单兆伟教授认为,胃癌术后患者多为气阴不足,用黄芪、玉竹为君药益气养阴。自创芪竹方能够显著改善患者生存质量,抗胃癌术后复发与转移,诱导人胃癌细胞MGC-803发生凋亡。其机制与线粒体途径有关。

芪竹方对人脐静脉内皮细胞的PTK和P-STAT3异常表达的影响

目的:了解芪竹方对细胞的毒作用,了解芪竹方对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)刺激增殖后的细胞内蛋白酪氨酸激酶(PTK)活性和P-STAT3表达的影响。方法:建立对比模型组,用CCK-8法检测芪竹方对HUVEC增殖的影响,用ELISA法定量测定细胞中PTK含量,用Western Blot法测定细胞P-STAT3表达。结果:芪竹方对HUVEC正常增殖无影响;HUVEC被酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)刺激后,空白组PTK和P-STAT3表达异常,芪竹方组对PTK表达有抑制作用,抑制率达65%,同时对P-STAT3表达有抑制,高浓度的芪竹方组作用与阳性药相当。结论:芪竹方对细胞无毒作用,对细胞的PTK和P-STAT3的异常表达有抑制作用。

芪竹方中单体及配伍对人胃癌细胞MGC-803抑制作用研究

目的:观察芪竹方单体成分薯蓣皂苷、莪术醇及两者配伍对人胃癌细胞MGC-803的增殖抑制作用,初步探讨芪竹方复方在抗肿瘤治疗中的有效成分及作用机制。方法:选用5个剂量的薯蓣皂苷、莪术醇单药组,及2个剂量的两药配伍组在24h、48h 2个不同时间点作用人胃癌细胞MGC-803,采用MTT法检测药物对MGC-803的增殖抑制率。结果:一定浓度范围内,薯蓣皂苷及莪术醇均对MGC-803细胞的增殖有剂量、时间依赖性抑制作用,且两药配伍使用较单药能产生更好的抑制作用。结论:薯蓣皂苷及莪术醇可能为芪竹方抑制人胃癌细胞MGC-803增殖的有效成分。

芪竹方联合FOLFOX4方案治疗化疗失败的晚期胃癌患者22例临床观察

目的观察芪竹方联合FOLFOX4方案治疗一线化疗失败的晚期胃癌患者的有效性及安全性。方法将44例一线化疗失败的晚期胃癌患者随机分为治疗组和对照组各22例。治疗组给予芪竹方口服,每日1剂,同时联合FOLFOX4方案化疗;对照组单纯给予FOLFOX4方案化疗。治疗直至病情进展,或出现不能耐受的毒性,或患者拒绝接受化疗。比较两组患者临床证候改善情况、生存质量、肿瘤反应情况、无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)、不良反应以及P-糖蛋白(Pg-p)、谷胱甘肽S-转移酶(GST-π)、拓扑异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ)表达情况。结果治疗组临床证候改善情况、PFS、OS均明显优于对照组(P<0.05或P<0.01)。治疗组治疗后Pg-p、GST-π、Topo-Ⅱ的表达例数均无明显变化(P>0.05);对照组治疗后Pgp、Topo-Ⅱ无明显变化(P>0.05),但GST-π表达例数明显高于治疗前(P<0.05)。结论芪竹方联合FOLFOX4治疗一线化疗失败的晚期胃癌有增效减毒作用,稳定GST-π的表达可能为其增效原因之一。

芪竹方对结肠癌耐药株HCT-8/V及肝癌耐药株Bel/Fu细胞耐药体外逆转作用的观察

[目的]研究芪竹方对结肠癌耐药株HCT-8/V、肝癌耐药株Bel/FU体外逆转作用。[方法]血清药理法制备芪竹方含药血清,MTT法检测芪竹方及其含药血清对HCT-8/V及Bel/FU细胞耐药逆转作用。[结果]芪竹方250μg/ml、50μg/ml、芪竹方20%含药血清、10%含药血清均可逆转HCT-8/V细胞的耐药性(P<0.05),其逆转倍数分别为14.65、6.20、6.53、3.01;芪竹方及其含药血清对Bel/FU细胞耐药性无逆转作用。[结论]芪竹方可体外逆转结肠癌耐药细胞株HCT-8/V耐药性,而对Bel/FU细胞无体外逆转作用。

芪竹方对人胃腺癌MGC-803细胞Caspase-3及端粒酶增殖与凋亡的影响

[目的]观察芪竹方对人胃腺癌MGC-803细胞Caspase-3及端粒酶增殖与凋亡的影响,探讨中药复方在抗肿瘤治疗中的作用机制。[方法]选用芪竹方500μg/ml在4、8、12、16 h 4个不同时间点及125、250、500μg/ml3个不同浓度在24 h作用人胃腺癌细胞MGC-803,分别采用Caspase-3分光光度法及TRAP银染法端粒酶活性检测法检测Caspase-3和端粒酶在人胃腺癌细胞MGC-803中的表达。[结果]芪竹方500μg/ml在16 h时可明显提高人胃腺癌细胞MGC-803中Caspase-3的活化程度,在250、500μg/ml作用24 h时可明显降低人胃腺癌细胞MGC-803端粒酶的活性。[结论]芪竹方可能通过介导人胃腺癌MGC-803细胞中Caspase-3的增殖及诱导端粒酶凋亡等多途径多靶点而发挥作用。

芪竹方粗提物对MGC-803细胞VEGF、KDR／flk-1蛋白表达的影响

目的 探讨芪竹方粗提物对MGC-803细胞血管内皮生长因子（vEGF）及其血管内皮生长因子受体（KDR／flk-1）蛋白表达的影响。方法MGC-803细胞处理方法被分成空白对照、二甲基亚砜（DMSO）对照、芪竹方粗提物高（500gg／m1）、低浓度（250gg／ml）四组，采用流式细胞仪、westernbloting两种方法测定VEGF、KDR／flk-1蛋白的表达量。结果空白对照、DMSO对照、芪竹方粗提物高、低浓度四组在流式细胞术检测中VEGF表达量分别是120．0±10．8、116．8±14．7、95．0±12．5、108．4±13．5，与空白对照组比较，芪竹方粗提物高浓度组VEGF表达降低，具有显著性差异；KDR／flk-1分别是10．4±3．5、9．0±3．4、6．8±2.3、6．8±3．5，各组间差异无统计学意义。在westernbloting法检测中VEGF蛋白表达量灰度值分别是14．45±4．61、12．32±3．27、2．58±0．84、3．45±1．12，芪竹方粗提物高浓度、低浓度组均明显低于空白对照组，差异具有显著性；KDR／ilk-1蛋白表达量灰度值分别是3．87±1．05、3．55±1.32、3．62±1．01、3．73±0．88，各组间差异无统计学意义。结论苠竹方粗提物对MGC．803细胞VEGF表达有下调作用，对KDR／flk-1表达无明显影响。

五通法论治肠癌经验浅析

肠癌近年来发病率和患病率呈上升趋势,可因发病部位不同或病程阶段不同而临床表现各异。孟河医派传人单兆伟教授潜心脾胃病诊治研治50余年,结合其多年临证经验及“轻灵平和”的用药特点,根据脏腑及疾病的变化提出在六腑以通为用的基础上运用五通法:通瘀止痛温中阳、通降积滞清肠腑、通泄魄门主邪去、通郁理气养脾肺、通窍醒神畅机体治疗,其在辨治肠癌的独到见解和丰富的临床经验值得学习和推广。