中药芪红合剂含药血清对人外周血内皮祖细胞增殖的影响

目的观察中药芪红合剂含药血清对体外培养的人外周血内皮祖细胞(EPCs)增殖的影响。方法将12只雄性Wistar大鼠随机分为中药芪红合剂组(低剂量组、中剂量组、高剂量组)和对照组,制备含药血清和空白血清。采用密度梯度离心法分离获得人外周血单个核细胞,经激光共聚焦显微镜、流式细胞仪鉴定为EPCs。加入各实验血清组培养液培养EPCs,分别作用不同时间(24h、48h、72h)后,倒置相差显微镜下观察EPCs生长情况,噻唑蓝比色试验(MTT法)测定EPCs的吸光度值。结果与对照组比较,中药芪红合剂含药血清低、中、高剂量组EPCs增殖明显(P<0.05),且呈一定的量效、时效关系。在同一作用时间,低剂量芪红合剂含药血清干预后EPCs的增殖明显(P<0.05)。在同一剂量组中,芪红合剂含药血清干预后EPCs的增殖随时间推移逐渐增强,于72h达到高峰(P<0.05)。结论中药芪红合剂含药血清对体外培养的人外周血EPCs的增殖具有一定的促进作用,可能是其防治血管内皮损伤及内皮功能障碍相关性疾病的作用机制之一。

芪红合剂含药血清对体外培养人外周血内皮祖细胞NO及NOS的影响

目的观察芪红合剂含药血清对人外周血内皮祖细胞(EPCs)一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响,探讨其对人外周血内皮祖细胞的保护机制。方法12只雄性Wistar大鼠随机分为芪红合剂组(低剂量组、中剂量组、高剂量组)和对照组,制备含药血清和空白血清。采集健康成人外周血,分离单核细胞,体外培养7d后,收集贴壁细胞,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪鉴定正在分化的EPCs,加入含不同浓度芪红合剂药物血清及空白血清的M199培养基孵育24h,将其在倒置荧光显微镜下计数,硝酸还原酶法测定NO,化学比色法测定NOS。结果芪红合剂药物组的血清NO水平和NOS活性明显高于空白血清对照组(P<0.05),并且呈剂量依赖性。结论芪红合剂可能通过增加EPCsNOS活性,促进NO分泌,防止血管内皮损伤及动员血管内皮祖细胞修复损伤血管来发挥血管内皮保护作用。

芪红合剂对肾间质纤维化模型大鼠的实验研究

目的探讨芪红合剂对肾间质纤维化的防治作用。方法采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化动物模型,以公认有肾脏保护作用的血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)为阳性对照,测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),免疫组织化学法测肾组织纤维蛋白溶解酶原激活物抑制因子(PAI)-1、纤维连接蛋白(FN)的表达。结果芪红合剂能降低血BUN、Scr水平,显著抑制PAI-1、FN的表达,减轻肾间质纤维化程度。PAI-1分别与FN、肾间质纤维化面积显著相关。肾间质纤维化面积分别与BUN、Scr相关。结论芪红合剂有早期防治肾间质纤维化作用。

芪红合剂含药血清对人外周血内皮祖细胞数量及其功能的影响

目的观察芪红合剂含药血清对人外周血内皮祖细胞(EPCs)数量及其功能的影响。方法采用血清药理学方法,制备成芪红合剂低、中、高剂量含药血清及空白血清。用密度梯度离心法分离获得单个核细胞,培养7 d后,经激光共聚焦显微镜、流式细胞仪鉴定为正在分化的EPCs;收集贴壁细胞,分别用含低、中、高剂量芪红合剂含药血清及空白血清的条件培养液培养12 h、24h、48 h后,倒置相差显微镜下观察EPCs生长情况。分别采用细胞计数法、黏附能力测定实验观察EPCs的数量和黏附能力。结果与对照组比较,芪红合剂含药血清能增加EPCs的数量,且能改善EPCs黏附能力,并且其影响呈一定的剂量相关性、时间依赖性。低剂量芪红合剂组较中、高剂量组作用明显(P<0.05),且在同一剂量组中,芪红合剂含药血清对EPCs数量和黏附功能的影响随时间推移逐渐增强,于72 h达到高峰作用(P<0.05)。结论芪红合剂能促进体外培养人外周血EPCs的数量和黏附功能。

中药芪红合剂对肾间质纤维化模型大鼠肾组织中基质金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的影响

目的:探讨中药芪红合剂对肾间质纤维化模型大鼠肾组织中基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响,及其对肾间质纤维化的作用机制。方法:采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化的动物模型,40只雄性Wistar大鼠随机分为4组:假手术组(A组)、手术模型组(B组)、芪红合剂组(C组)、依那普利组(D组)。术后14d处死各组大鼠,收集血清测定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平,取结扎侧肾组织分别用HE、Masson染色,采用免疫组化和原位杂交方法分别检测肾组织中基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、纤维连接蛋白(FN)和TIMP-1mRNA的表达,并用计算机图像分析系统进行分析。结果:手术模型组大鼠肾组织中FN、TIMP-1和TIMP-1mRNA的表达较假手术组显著升高,两治疗组较模型组明显降低。手术模型组大鼠血肌酐、尿素氮水平较假手术组明显增高,两治疗组较手术模型组显著下降。结论:中药芪红合剂可降低大鼠血尿素氮、血肌酐水平,并可通过抑制基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和FN的表达,而起到减轻肾间质纤维化病变程度的作用,推测其抑制TIMP-1表达上调的作用可能是其抗肾小管间质纤维化的作用机制之一。

中药芪红合剂对肾间质纤维化模型大鼠肾组织中CTGF表达的影响

目的观察中药芪红合剂在肾间质纤维化过程中对致纤维化因子结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨其可能的肾保护作用机制。方法采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化的动物模型,40只雄性Wistar大鼠随机分为4组:假手术组(A组)、手术模型组(B组)、芪红合剂组(C组)、依那普利组(D组)。术后14d处死各组大鼠,收集血清测定血肌酐(Scr)、尿素氮(Bun)水平,取结扎侧肾组织分别用HE、Masson染色,采用免疫组化方法检测肾组织中结缔组织生长因子(CTGF)的表达,并用计算机图像分析系统进行分析。结果模型组大鼠肾组织中CTGF的表达较假手术组显著升高,两治疗组较模型组明显降低。模型组大鼠血肌酐、尿素氮水平较假手术组明显增高,两治疗组较模型组显著下降。结论中药芪红合剂可降低大鼠血尿素氮、血肌酐水平,并可通过抑制CTGF的表达,而起到减轻肾间质纤维化病变程度的作用,推测其抑制CTGF表达上调的作用可能是其抗肾小管间质纤维化的作用机制之一。

中药芪红合剂对肾间质纤维化模型大鼠肾组织中PAI-1表达的影响

目的:探讨中药芪红合剂对肾间质纤维化模型大鼠肾组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)表达的影响,及其对肾间质纤维化的作用机制。方法:采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化的动物模型,40只雄性Wistar大鼠随机分为4组:假手术组(A组)、手术模型组(B组)、芪红合剂组(C组)、依那普利组(D组)。术后14d处死各组大鼠,收集血清、测定血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平,取结扎侧肾组织分别用HE、Masson染色,采用免疫组化检测肾组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的表达,并用计算机图像分析系统进行分析。结果:模型组大鼠肾组织中PAI-1的表达较假手术组显著升高,两治疗组较模型组明显降低。模型组大鼠血肌酐、尿素氮水平较假手术组明显增高,两治疗组较模型组显著下降。结论:中药芪红合剂可降低大鼠血尿素氮、血肌酐水平,并可通过抑制纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的表达,而起到减轻肾间质纤维化病变程度的作用,推测其抑制PAI-1表达上调的作用可能是其抗肾间质纤维化的作用机制之一。

中药芪红合剂对肺间质纤维化模型大鼠肺组织中TGF-β_1表达的影响

目的:探讨中药芪红合剂在肺间质纤维化过程中的作用及其机理。方法:采用气管内注射博来霉素A5建立肺间质纤维化的大鼠模型。将40只Wistar大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、泼尼松治疗组、芪红合剂治疗组,每组10只。给各组大鼠灌胃相应的生理盐水或药物,术后15d处死各组大鼠,取两肺组织,一部分行石蜡包埋切片,HE染色,观察病理改变,另一部分采用ELISA法定量测定TGF-β1。结果:与假手术组比较,模型组大鼠肺组织有明显的纤维化改变,TGF-β1的含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,泼尼松治疗组和芪红合剂治疗组大鼠肺组织中TGF-β1含量显著下降(P<0.01)。结论:中药芪红合剂可能通过降低肺组织中TGF-β1的含量而减轻肺间质损伤及纤维化改变。

中药芪红合剂对肾间质纤维化模型大鼠肾皮质中bcl-2表达的影响

目的:探讨凋亡相关基因bcl-2在肾小管损伤及间质纤维化过程中的表达以及扶正活血化瘀中药芪红合剂在肾小管损伤及间质纤维化过程中的肾保护作用及可能的作用机制。方法:采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型,将大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、中药芪红合剂组、依那普利组,术后10d处死各组大鼠,收集血清测定尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)水平,结扎侧肾组织行HE、Masson染色,Masson染色分析肾间质纤维化程度,免疫组化半定量检测各组大鼠肾组织中bcl-2、FN的蛋白表达。结果:模型组bcl-2、FN的蛋白表达及肾间质纤维化面积明显高于假手术组,BUN、Cr水平均显著升高(P<0.05);中药芪红合剂组、依那普利组较模型组bcl-2的蛋白表达显著上调,FN的蛋白表达及肾间质纤维化面积明显降低,BUN、Cr水平均显著下降(P<0.05)。结论:中药芪红合剂可能通过增强凋亡调控基因bcl-2蛋白表达的上调而减轻肾小管损伤及间质纤维化。