芪蚣抗纤方活血化瘀药对肝纤维化大鼠血液粘稠度的影响

目的：探讨芪蚣抗纤方活血化瘀药抗肝纤维化的作用机理。方法：40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（N组）、模型组（M组）及芪蚣抗纤方活血化瘀低、高剂量组（HD组、HG组）,除N组外,其余3组猪血清腹腔注射法复制肝纤维化大鼠模型,HD、HG组分别用1 mL/200 g体重、2 mL/200 g体重活血方灌胃,用药4周后,比较各组脾重、脾重指数及血液粘稠度。结果：M组脾重、脾重指数及全血高、中、低切粘度、血浆粘度均明显高于N组（P〈0.05~0.01）,给予活血化瘀药后,各指标较M组明显降低（P〈0.05~0.01）,HG组较HD组改变更明显。结论：芪蚣抗纤方活血化瘀药能通过改善肝脾微循环,降低血液粘度,减轻瘀血程度,有保护肝细胞,改善肝纤维化的作用。

芪蚣抗纤方对免疫性肝纤维化大鼠肝组织病理形态的影响

目的:通过用芪蚣抗纤方(QF)对免疫损伤性肝纤维化大鼠治疗前后肝组织病理结构变化的观察,进一步阐明QF抗免疫性肝纤维化机理。方法:采用猪血清腹腔注射法持续8周诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,然后应用QF灌胃治疗四周,第十二周起,分批处死动物,取肝组织,常规制备石蜡切片和超薄切片,并对石蜡切片进行HE染色、胶原纤维特殊染色(Mallory)和免疫组织化学染色。光镜及透射电镜观察。结果:QF高低剂量治疗组较模型组肝细胞损伤都有不同程度好转,胶原纤维明显减少。结论:QF可能有保护和修复受损的肝细胞,抑制胶原纤维的形成,具有抗免疫损伤性肝纤维化作用。

芪蚣抗纤方对免疫损伤性肝纤维化大鼠凝血酶原时间的影响

目的:研究芪蚣抗纤方对免疫损伤性肝纤维化大鼠凝血酶原时间(PT)的影响。方法:采用猪血清给大鼠腹腔注射制备肝纤维化的模型,再以芪蚣抗纤方标准剂量、大剂量和α-干扰素治疗,通过Quick一步法检测PT。结果:模型组PT明显长于治疗组,有极显著统计学意义。结论:芪蚣抗纤方能显著缩短肝纤维化大鼠凝血酶原时间(PT),改善出血倾向。

芪蚣抗纤方拆方对免疫损伤性肝纤维化大鼠肝功能的影响及量效比较

目的:探讨芪蚣抗纤方拆方对免疫损伤性肝纤维化大鼠肝功能的影响及量效比较。方法:猪血清腹腔注射法复制肝纤维化大鼠模型,分为正常对照组、模型组、活血小剂量组、活血大剂量组、软坚小剂量组、软坚大剂量组。用药4周后,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)含量。结果:活血组ALT、球蛋白明显下降,白/球比正常;软坚组小剂量基本同活血组,而大剂量组ALT显著升高,高于模型组,白/球比降低。结论:芪蚣抗纤方拆方活血组及软坚小剂量组能降低ALT、球蛋白。具有保护肝细胞,减轻肝组织免疫性损伤,改善肝纤维化作用;软坚大剂量组药物毒性显现,在选用此药物时应慎用剂量。

芪蚣抗纤方及拆方干预大鼠免疫损伤性肝纤维化的实验研究

目的观察芪蚣抗纤方(QF)及拆方对大鼠免疫损伤性肝纤维化的影响。方法 50只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、QF全方干预组、软坚散结药干预组、活血药干预组,猪血清攻击法诱导免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,实验过程8周。免疫组化法检测肝组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)相关表达;免疫组织化学染色检测肝纤维化大鼠TGF-β1和Smad2、Smad3阳性表达。结果药物干预后,治疗组TGF-β1含量明显下降,Smad2、Smad3表达减少,全方比拆方效果明显。结论芪蚣抗纤方及拆方对TGF-βl和Smads家族蛋白有显著调节作用,可干预大鼠肝纤维化形成,全方比拆方效果更明显。预防和治疗肝纤维化除了运用常法活血药与软坚药,益气健脾必不可少。

芪蚣抗纤方抗免疫损伤性大鼠肝纤维化的分子机制研究

目的观察芪蚣抗纤方(QF)对免疫损伤性肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1、smad2、smad3蛋白表达以及TGF-β1mRNA阳性表达的影响,探讨QF治疗大鼠免疫损伤性肝纤维化的分子机制。方法采用猪血清腹腔攻击法制备免疫损伤性肝纤维化大鼠模型。通过免疫组化半定量法观察肝组织TGF-β1、smad2、smad3蛋白表达;PT-PCR法提取总RNA,电泳仪观察TGF-β1 mRNA阳性表达。结果免疫组化学染色显示:模型组大鼠肝组织TGF-β1胞浆强阳性表达,Smad2棕色阳性着色由胞浆转至胞核。QF干预组大鼠肝组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达下调(P<0.01)。PT-PCR结果显示:伴随着肝纤维化的形成,TGF-β1 mRNA阳性表达有明显增强趋势,经过治疗后TGF-β1 mRNA阳性表达明显减弱。结论 QF能有效干预免疫损伤性大鼠肝纤维化的形成,其分子机制可能是:通过调节TGF-β1/Smads信号通路发挥抗肝纤维化作用,通过下调TGF-β1 mRNA的表达从而减少胶原纤维合成及沉积发挥抗纤维化作用。

芪蚣抗纤方对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路影响

目的:观察芪蚣抗纤方(QF)对免疫损伤性肝纤维化大鼠TGF-β1/Smads信号通路影响。方法:采用猪血清攻击法复制免疫损伤性肝纤维化大鼠模型;用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清LN、HA、TGF-β1含量;免疫组化法观察TGF-β1、Smad2 mRNA、Smad3 mRNA、Smad7 mRNA表达。观察QF抗肝纤维化的分子机制。结果:①血清学指标结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清TGF-β1、LN、HA含量明显升高(P<0.05或P<0.01)。经QF干预后,大鼠血清TGF-β1、LN、HA含量明显下降(P<0.01)。②免疫组织化学结果:模型组大鼠肝组织TGF-β1胞浆强阳性表达,Smad2棕色阳性着色由胞浆转至胞核,Smad7无阳性表达。QF干预组大鼠肝组织TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达下调(P<0.01)。结论:QF通过调节TGF-β1/Smads信号通路,能保护和修复受损的肝细胞,抑制胶原纤维的形成,发挥抗肝纤维化作用。

芪蚣抗纤方中活血化瘀药对肝纤维化大鼠转化生长因子-β_1及Smad2/3的影响

目的:观察芪蚣抗纤方(QF)活血组对免疫损伤性肝纤维化大鼠转化生长因子(TGF-β1)及Smad2/3的影响。方法:猪血清腹腔注射法复制免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,分为正常对照组,模型组、活血低剂量组、活血高剂量组,用双抗夹心法(ELISA法)测定血清TGF-β1含量;免疫组化法检测肝组织TGF-β1,Smad2,Smad3的表达。结果:①血清学指标:模型组血清TGF-β1含量较其他组明显升高(P<0.01)。与模型组比较,活血组血清TGF-β1含量显著下降(P<0.01),并具量效关系。②免疫组化检测:模型组肝组织TGF-β1,Smad2,Smad3表达明显,活血组肝组织中TGF-β1,Smad2,Smad3表达明显低于模型组(P<0.01)。结论:芪蚣抗纤方活血组通过降低TGF-β1,减少Smad2/3的激活,从而抑制肝纤维结缔组织增生,减轻肝损伤及肝纤维化程度。具有抑制肝纤维化的作用。

芪蚣抗纤方拆方对肝纤维化大鼠Smad2/3及Smad7蛋白的影响

目的:观察芪蚣抗纤方(Qigong Kangxian Prescription,QF)活血组和软坚组对肝纤维化大鼠细胞内信号转导分子2,3,7(Smad 2/3及Smad7)的影响。方法:成年健康雄性SD大鼠60只,随机分为6组,除正常对照组10只外,其余50只均用猪血清腹腔注射法复制免疫损伤性肝纤维化大鼠模型,0.5 mL/只,每周2次,连续8周。活血组和软坚组分别给于活血方和软坚方。低、高剂量组按生药量以5,10 g.kg-1ig给药。实验结束处死大鼠,断头取血,分离血清,用ELISA法测定转化生长因子(transforming growth factor,TGF)β1的含量。部分肝组织固定于10%甲醛液,石蜡包埋,制光镜切片,免疫组织化学法检测肝组织TGF-β1、Smad2,Smad3及Smad7蛋白的表达。结果:①血清及肝组织TGF-β1含量及表达活血高剂量组分别为(0.65±0.09)μg.L-1,4.33±2.06,软坚低剂量组分别为(0.62±0.08)μg.L-1,4.11±1.14,与模型组(1.22±0.16)μg.L-1,10.33±3.34相比有显著差异(P<0.01);②Smad2和Smad3蛋白表达显色指数活血高剂量组分别为(3.88±2.00),(3.22±1.89)分,软坚低剂量组分别为(4.22±1.49),(4.77±1.75)分,与模型组(10.20±3.06),(10.22±3.06)分相比有显著差异(P<0.01);③Smad7蛋白表达显色指数活血高剂量组为(6.89±1.50)分,软坚低剂量组为(4.33±1.78)分,与模型组(1.56±0.73)分相比有显著差异(P<0.01)。结论:芪蚣抗纤方活血组及软坚组可通过减少Smad 2/3的激活,增加Smad7的表达,抑制肝纤维结缔组织增生,减轻肝损伤及肝纤维化程度。具有抑制肝纤维化作用。

芪蚣抗纤方及拆方药物血清对HSC-T6增殖及TGF-β_1 mRNA蛋白表达的影响

目的:探讨芪蚣抗纤方(QKD)及拆方抗免疫损伤性大鼠肝纤维化作用机制及配伍意义。方法:采用改良型血清药理学对比方法,观察各组血清对肝星状细胞(HSC-T6)增殖及转化生长因子(TGF-β1)mRNA受体蛋白表达的影响。结果:与正常大鼠血清组比较,模型组大鼠血清组HSC-T6增殖明显增强(P<0.01);与模型组比较,药物血清各组能抑制HSC-T6增殖(P<0.01或P<0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠HSC-T6细胞上清液中TGF-β1mRNA含量明显升高(P<0.01)。药物血清各组TGF-β1mRNA含量均明显下调(P<0.01)。结论:芪蚣抗纤方及拆方抗肝纤维化的主要机制之一是抑制HSC-T6增殖,使TGF-β1mRNA受体蛋白表达下调,芪蚣抗纤方全方较活血方和软坚方更具配伍意义,且呈剂量依赖性。